激光微孔脱细胞真皮基质及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种激光微孔脱细胞真皮基质及其制备方法，所述制备方法是采用皮秒激光器对脱细胞真皮基质进行穿刺加工制备微孔脱细胞真皮基质，包括：设定皮秒激光器的参数为，每个脉冲能量是150微焦，脉宽是8皮秒；将样品固定在脉冲激光器的加工平台上，使其上下表面保持湿润；皮秒激光器对样品进行穿刺；用超声机对样品进行超声处理1‑5分钟；将样品浸泡在无菌注射用水中。本发明专利技术的制备方法使得激光加工真皮基质的孔径可控，边缘光滑，制成的微孔脱细胞真皮基质微孔分布均匀细密，保证了移植时创面基底渗液能够透过均匀的网眼更好地营养皮片，促使血管再生，提高皮片成活率，并减少疤痕的形成。

Laser microporous acellular dermal matrix and its preparation method

The invention discloses a laser microporous acellular dermal matrix and a preparation method thereof. The preparation method uses a picosecond laser to puncture the acellular dermal matrix to prepare the microporous acellular dermal matrix. The preparation method includes: setting the parameters of the picosecond laser, each pulse energy is 150 microfocal, and the pulse width is 8 picoseconds; fixing the sample on the processing platform of the pulse laser; The samples were punctured by picosecond laser, processed by ultrasonic machine for 1 to 5 minutes, and immersed in sterile water for injection. The preparation method of the invention makes the pore size of the laser-processed dermal matrix controllable, the edge smooth, and the micropore distribution of the microporous acellular dermal matrix uniform and fine. The preparation method ensures that the wound basal exudation can better nourish the skin through the uniform mesh, promote the regeneration of blood vessels, improve the survival rate of the skin graft, and reduce the formation of scars.

【技术实现步骤摘要】
激光微孔脱细胞真皮基质及其制备方法本申请是申请日为2014年08月08日、申请号为201410386574.7、专利技术名称为“激光微孔脱细胞真皮基质及其制备方法”的专利申请的分案申请。
本专利技术涉及医学皮肤组织工程技术，尤其涉及一种新型激光微孔脱细胞真皮基质的制备方法。
技术介绍
随着我国人民生活水平的提高，对皮肤急慢性创伤治疗提出的要求也越来越高。由于褥疮、静脉曲张、血管炎、糖尿病等引起的溃疡以及烧伤等急性创伤导致的皮肤缺损，常常由于缺乏可移植的自体皮片而使创面修复困难，患者也面临着因皮肤缺损造成代谢紊乱、疼痛、感染、脓毒血症甚至死亡的威胁。这其中一个重要原因，是人类真皮组织不可再生，真皮层的缺失，直接导致疤痕明显增生，严重影响患者生存质量。因此人工真皮的开发已经成为生物医学工程领域的热点。现有技术中采用无细胞真皮基质(AcellularDermalMatrix，ADM)作为真皮替代物，其将人或者动物全层皮肤经过物理脱细胞技术处理，去除表皮和真皮中的细胞成分，保留真皮中的胶原成分和三维网状结构，以及基底膜复合物。这种无细胞真皮基质由于去除了皮肤中具有强抗原性的细胞成分，减少了排异反应；同时保留了天然真皮结构，因此可以诱导移植后宿主的细胞成分按照其三维结构生长。在移植手术中，采用无细胞真皮基质与自体刃厚皮复合移植，无细胞真皮基质支持成纤维细胞的浸润、新生血管的形成，促使成纤维细胞与移植的自体表皮成分逐渐融合，最终形成完整的皮肤结构，基本恢复皮肤的原有功能。而在这个移植过程中，需要无细胞真皮基质在短时间内与创面基底建立良好的血液循环，并为在其上移植的表皮提供足够的营养，否则移植就会失败。这就需要无细胞真皮基质的三维结构能呈现网状结构，且网眼能够细密均匀，使创面基底渗液能够透过网眼营养移植的皮片，微血管可通过网眼再生。现有技术中的真皮基质网眼过大，分布不够均匀，导致创面收缩，修复效果不十分理想。
技术实现思路
针对以上现有激光微孔技术的缺陷，本专利技术目的之一是提供一种激光微孔脱细胞真皮基质，该真皮基质网眼孔径小，更有利于创面恢复和提高创面愈合质量，有效减轻疤痕形成。本专利技术的另一目的是提供一种激光微孔脱细胞真皮基质的制备方法，该制备方法能够制备出高密度微孔的生物真皮材料。本专利技术的一个技术方案为：一种激光微孔脱细胞真皮基质，所述真皮基质上的微孔孔径为0.03-0.5毫米，孔间距为0.5-3.0毫米。所述激光微孔脱细胞真皮基质为异体或异种真皮基质。(异体或异种真皮基质是指使用的真皮基质是来源于与被移植体异体或异种的生命体的全皮)一种激光微孔脱细胞真皮基质的制备方法，采用脉冲激光器对脱细胞真皮基质进行穿刺加工制备微孔脱细胞真皮基质，真皮基质上的微孔孔径为0.03-0.5毫米，孔间距为0.5-3.0毫米。所述脉冲激光器是纳秒激光器或皮秒激光器。纳秒激光器是指脉冲宽度在0.5-100纳秒的激光器，脉冲重复频率是1Hz-200KHz，加工得到的微孔孔径为0.10-0.5毫米；而皮秒激光器是指脉冲宽度在1-100皮秒的激光器，脉冲重复频率是1Hz-200KHz，加工得到的微孔孔径为0.03-0.3毫米。所述制备方法包括如下步骤：A、设定脉冲激光器的参数；B、取一块异体/异种脱细胞真皮基质样品，将样品固定在脉冲激光器的加工平台上，用适量无菌注射用水浸润或喷洒使其上下表面保持湿润；C、脉冲激光器对样品进行穿刺加工；D、将穿刺后的样品从加工平台上取下；E、用超声机对样品进行超声处理，使得样品上的微孔的边缘变得平滑；F、超声处理完毕，将样品浸泡在无菌注射用水中。所述脉冲激光器的参数包括脉冲激光重复频率、重复次数、衰减率、加工平台的移动速率以及加工方式。采用四点悬空固定法将样品固定在脉冲激光器的加工平台上，四点悬空固定法是指将样品四端固定，其余部分悬空。悬空能使样品受热均匀。样品固定在加工平台的方法为：将样品张开置于非金属基板上，用非金属材料将边缘固定在非金属基板上，非金属基板贴近样品的表面为毛表面。毛表面能减少激光的反射。样品边缘固定使样品在加工过程中不容易发生较大的移动。所述非金属基板为蓝宝石片。所述非金属材料为塑料或陶瓷。所述样品在使用脉冲激光器穿刺前浸泡于无菌注射用水中。本专利技术的积极效果：本专利技术的激光微孔脱细胞真皮基质上的微孔边缘光滑，孔径小，微孔分布均匀细密，保证了移植时创面基底渗液能够透过均匀的网眼更好地营养皮片，促使血管再生，提高皮片成活率，并减少疤痕的形成。本专利技术的方法采用脉冲纳秒激光或者皮秒激光穿刺方法，获得的微孔脱细胞真皮基质的网眼孔径小，相对于传统的二氧化碳激光打孔方法制备出来的真皮基质，更有利于的恢复和提高创面愈合质量，有效减轻疤痕的形成。由于采用超声机处理微孔，使微孔脱细胞真皮基质上的微孔边缘光滑，使血管易再生。说明书附图图1是经过脱细胞处理的小型异体/异种背部真皮组织图图2是本专利技术的激光微孔脱细胞真皮基质图图3是光镜下的激光微孔脱细胞真皮基质图图4是皮下埋藏实验显示良好的生物组织相容性图5是“一步法”自体中全厚皮片复合移植步骤一图6是“一步法”自体中全厚皮片复合移植步骤二图7是“一步法”自体皮片复合移植术后1个月的图具体实施方式实施例1：皮秒激光器加工皮秒激光器加工微孔异体/异种脱细胞真皮基质的制备方法，包括以下步骤：A、设定皮秒激光器的参数：每个脉冲的能量是150微焦，脉宽是8皮秒，加工移动速度是2mm/s，衰减幅度是20％，加工方式是打点方式，间距是1毫米，连续在同一个地方打点两次，激光器的束斑直径是30微米左右。调整激光器出光孔的高度，使得焦面落在待加工的真皮基质上；B、从无菌注射用水中取出一块异体/异种脱细胞真皮基质样品，其为5厘米*5厘米的方块，迅速采用四点悬空固定法将其固定在激光加工设备的加工平台上；四点悬空固定法是指将样品四端固定，其余部分悬空。C、用适量无菌注射用水浸润或喷洒使异体/异种脱细胞真皮基质样品表面平整且上下表面湿润；样品表面没有凹凸点和折边；D、激光加工设备对异体/异种脱细胞真皮基质样品进行连续加工，获得微孔异体/异种脱细胞真皮基质；E、完毕，用陶瓷镊子迅速将微孔异体/异种脱细胞真皮基质取下，并浸泡在无菌注射用水的容器中；F、把容器置于超声机中进行超声处理，一般时间为1-5分钟即可；G、将超声处理后的真皮基质从容器中取出，浸泡在另外一个无菌注射用水的容器中。用上述方法制备的微孔异体/异种脱细胞真皮基质微孔孔径为0.03毫米，孔间距为0.5毫米。实施例2：纳秒激光器加工纳秒激光器加工微孔异体/异种脱细胞真皮基质的制备方式，包括以下步骤：A、设定纳秒激光加工设备的参数：每个脉冲的能量是2毫焦，脉宽是2纳秒，加工移动速度是5mm/s，加工方式是打点方式，间距是2毫米，在同一个地方打点一次，激光器的束斑直径是50微米左右。调整激光器出光孔的高度，使得焦面落在待加工的真皮基质上；B、从无菌注射用水中取出一块异体/异种脱细胞真皮基质样品，其为5厘米*5厘米的方块，迅速将样品张开置于蓝宝石片基板上，用塑料钉将边缘固定在基板上，蓝宝石片基板贴近样品的表面为毛表面。蓝宝石片基板上的宽度为两英寸以上。C、用适量无菌注射用水浸润或喷洒使异体/异种脱细胞真皮基质样品表面平整且上下表面湿润；样品表本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种激光微孔脱细胞真皮基质的制备方法，其特征是：采用皮秒激光器对脱细胞真皮基质进行穿刺加工制备微孔脱细胞真皮基质，所述制备方法包括如下步骤：A、设定皮秒激光器的参数为，每个脉冲能量是150微焦，脉宽是8皮秒；B、取一块异体/异种脱细胞真皮基质样品，将样品固定在脉冲激光器的加工平台上，用无菌注射用水浸润或喷洒使其上下表面保持湿润；C、调整激光器出光孔的高度，使得焦面落在待加工的样品上，皮秒激光器对样品进行穿刺；D、将穿刺后的样品从加工平台上取下；E、用超声机对样品进行超声处理1‑5分钟，使得样品上的微孔的边缘变得平滑；F、超声处理完毕，将样品浸泡在无菌注射用水中。

【技术特征摘要】
1.一种激光微孔脱细胞真皮基质的制备方法，其特征是：采用皮秒激光器对脱细胞真皮基质进行穿刺加工制备微孔脱细胞真皮基质，所述制备方法包括如下步骤：A、设定皮秒激光器的参数为，每个脉冲能量是150微焦，脉宽是8皮秒；B、取一块异体/异种脱细胞真皮基质样品，将样品固定在脉冲激光器的加工平台上，用无菌注射用水浸润或喷洒使其上下表面保持湿润；C、调整激光器出光孔的高度，使得焦面落在待加工的样品上，皮秒激光器对样品进行穿刺；D、将穿刺后的样品从加工平台上取下；E、用超声机对样品进行超声处理1-5分钟，使得样品上的微孔的边缘变得平滑；F、超声处理完毕，将样品浸泡在无菌注射用水中。2.一种激光微孔脱细胞真皮基质的制备方法，其特征是：采用纳秒激光器对脱细胞真皮基质进行穿刺加工制备微孔脱细胞真皮基质，所述制备方法包括如下步骤：A、设定纳秒激光器的参数为，每个脉冲能量是2毫焦，脉宽是2纳秒；B、取一块异体/异种脱细胞真皮基质样品，将样品固定在脉冲激光器的加工平台上，用无菌注射用水浸润或喷洒使其上下表面保持湿润；C、调整激光器出光孔的高度，使得焦面落在待加工的样品上，纳秒激光器对样品进行穿刺；D、将穿刺后的样品从加工平台上取下；E、用超声机对样品进行超声处理1-5分钟，使得样品上的微孔的边缘变得平滑；F、超声...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗旭，许金通，
申请(专利权)人：罗旭，
类型：发明
国别省市：浙江,33