一种均相免疫检测方法及其应用技术

技术编号:21058002 阅读:83 留言:0更新日期:2019-05-08 05:45
本发明专利技术涉及一种均相免疫检测方法,其包括至少两个检测区域,在一个检测区域判断是否存在由供体‑待检抗体‑受体所形成的第一复合物,而在另一个检测区域判断是否存在由供体‑待检抗原‑受体所形成的第二复合物;其中,所述供体能够在激发状态下生成单线态氧,所述受体能与单线态氧反应产生可检测的信号。该方法解决了抗原抗体一步法检测中的高浓度样本HOOK效应问题和低浓度样本检测灵敏度偏低问题。同时该方法也解决了抗原抗体联合检测时不能区分阳性结果是抗体阳性或抗原阳性的问题。本发明专利技术所述方法特别适用于HIV抗原和抗体的联合检测中。

【技术实现步骤摘要】
一种均相免疫检测方法及其应用
本专利技术属于生物
,具体涉及一种均相免疫检测方法及其应用。
技术介绍
免疫分析方法是利用抗原与抗体特异性结合而建立的高选择性生物化学方法。免疫分析根据标记与否分为标记免疫分析法和非标记免疫分析法。由于标记物的引入,不可避免地带来了结合的抗原-抗体与过量的抗原或抗体的分离问题,因而标记免疫分析法根据分离与否又分为均相免疫分析法和非均相免疫分析法。非均相免疫分析法需要包埋、洗脱、分离等多步操作,分析过程繁琐,分析时间长,不能满足快速检测和诊断的要求。均相法则有效避免了洗脱、分离等繁琐步骤,极大提高了分析效率和性价比,得到日益广泛的应用,具有取代传统非均相免疫分析的潜力。但是,在某些运用均相免疫法检测的临床诊断项目中,需要对样本中的抗原和抗体同时进行检测。例如:人类免疫缺陷病毒(HumanImmunodeficiencyVirus,HIV)的检测,就需要即检测HIV抗体,同时也检测HIV抗原,这样就可以避免窗口期的患者因体内只有病毒抗原而没有相应的抗体或相应抗体滴度还不足以被检出时造成漏检的风险。现有的抗原抗体联合检测方法中,样本中有待检抗原或抗体中的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种均相免疫检测方法,其包括至少两个检测区域,在一个检测区域判断是否存在由供体‑待检抗体‑受体所形成的第一复合物,而在另一个检测区域判断是否存在由供体‑待检抗原‑受体所形成的第二复合物;其中,所述供体能够在激发状态下生成单线态氧,所述受体能与单线态氧反应产生可检测的信号。

【技术特征摘要】
1.一种均相免疫检测方法,其包括至少两个检测区域,在一个检测区域判断是否存在由供体-待检抗体-受体所形成的第一复合物,而在另一个检测区域判断是否存在由供体-待检抗原-受体所形成的第二复合物;其中,所述供体能够在激发状态下生成单线态氧,所述受体能与单线态氧反应产生可检测的信号。2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,当检测区域存在第一复合物和/或第二复合物时,用能量或者活性化合物激发供体产生单线态氧,所述受体与单线态氧反应生成可检测的化学发光信号。3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述待检抗体选自与待检抗原特异性结合的完整抗体或基因工程化的抗体片段。4.根据权利要求1-3中任意一项所述的方法,其特征在于,所述待检抗原选自多种不同病毒类型的抗原。5.根据权利要求1-4中任意一项所述的方法,其特征在于,所述待检抗原选自同一被分析物的不同亚型、亚亚型或流行重组型的抗原。6.根据权利要求1-5中任意一项所述的方法,其特征在于,所述受体和待检抗体通过标记抗原相连接;所述供体和待检抗体通过中间抗原相连接;所述标记抗原和中间抗原能够与待检抗体的不同表位特异性结合。7.根据权利要求1-6中任意一项所述的方法,其特征在于,所述受体和待检抗原通过标记抗体相连接;所述供体和待检抗原通过中间抗体相连接;所述标记抗体和中间抗体能够与待检抗原的不同表位特异性结合。8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述标记抗体为单克隆抗体。9.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述中间抗体为多克隆抗体。10.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,其在一个检测区域准备第一组合物,并判断第一组合物中是否存在由供体-待检抗体-受体所形成的第一复合物;在另一个检测区域准备第二组合物,并判断第二组合物中是否存在由供体-待检抗原-受体所形成的第二复合物;其中,所述第一组合物包含:待检样本;与标记抗原结合的受体;中间抗原;供体;所述标记抗原和中间抗原能够与待检抗体的不同表位特异性结合;所述第二组合物包含:待检样本;与标记抗体结合的受体;中间抗体;供体;所述标记抗体和中间抗体能够与待检抗体的不同表位特异性结合。11.根据权利要求10所述的方法,其特征在于,具体包括以下步骤:步骤S1,在一个反应区域准备第三组合物,所述第三组合物包含:待检...

【专利技术属性】
技术研发人员:王志新刘宇卉李临其他发明人请求不公开姓名
申请(专利权)人:北京科美生物技术有限公司
类型:发明
国别省市:北京,11

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