用于检测慢性鼻窦炎伴鼻息肉亚型的ELISA试剂盒及其制备方法技术

本发明专利技术提出一种用于检测慢性鼻窦炎伴鼻息肉亚型的ELISA试剂盒及其制备方法，包括包被有夏科雷登氏结晶蛋白CLC抗体的酶标板，所述包被有夏科雷登氏结晶蛋白CLC抗体为小鼠抗人CLC单克隆抗体。本发明专利技术采用小鼠抗人CLC单克隆抗体，其应用到ELISA试剂盒中，以实现检测慢性鼻窦炎伴鼻息肉亚型的目的，该试剂盒能够快速对鼻息肉亚型进行鉴别，且相比较传统的病理检测方法准确性更高，此ELISA试剂盒可以同时对样品进行大批量、快速检测，节约了人力成本和就医成本。

ELISA kit for detection of chronic sinusitis with nasal polyps and its preparation method

The present invention provides an ELISA kit for detecting chronic sinusitis with nasal polyp subtypes and its preparation method, including an enzyme label plate coated with CLC antibody of Charlotte Crystalline Protein, which is coated with CLC antibody of Charlotte Crystalline Protein as a mouse anti-human CLC monoclonal antibody. The present invention adopts mouse anti-human CLC monoclonal antibody, which is applied to ELISA kit to detect chronic sinusitis with nasal polyp subtypes. The kit can quickly identify nasal polyp subtypes, and has higher accuracy than traditional pathological detection methods. The ELISA kit can simultaneously detect large quantities of samples and quickly, saving human costs and labor costs. Cost of medical treatment.

【技术实现步骤摘要】
用于检测慢性鼻窦炎伴鼻息肉亚型的ELISA试剂盒及其制备方法
本专利技术属于生物医药
，尤其涉及一种用于检测慢性鼻窦炎伴鼻息肉亚型的ELISA试剂盒及其制备方法。
技术介绍
慢性鼻窦炎伴鼻息肉(Chronicrhinosinusitiswithnasalpolyps，CRSwNP)是鼻窦黏膜的慢性炎症，查体可见鼻腔或中鼻道息肉形成。CRSwNP常见症状为鼻堵、流涕或鼻涕倒流、嗅觉减退、面部闷胀感或压力感，持续时间超过12周。患病率约为0.5-4％，CRSwNP常伴有哮喘和过敏性鼻炎，有报道7％的哮喘患者患有CRSwNP，而26-48％的CRSwNP患有哮喘。CRSwNP发病机制目前还不确定，黏膜上皮细胞破坏、宿主免疫系统失衡和病原微生物入侵可能是其发病的主要原因。CRSwNP主要的治疗方式是手术和药物治疗。但研究表明，即使通过规范的药物或手术治疗，慢性鼻窦炎伴鼻息肉的复发率仍高达56％，严重影响患者生活质量，同时带来高额医疗支出，但临床却缺乏根治性治疗方法，因而成为鼻科学研究领域的重点。依据嗜酸性粒细胞浸润的程度可以将CRSwNP分为嗜酸性粒细胞型(EosinophilicCR本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于检测慢性鼻窦炎伴鼻息肉亚型的ELISA试剂盒，其特征在于：包括包被有夏科雷登氏结晶蛋白CLC抗体的酶标板。

【技术特征摘要】
1.一种用于检测慢性鼻窦炎伴鼻息肉亚型的ELISA试剂盒，其特征在于：包括包被有夏科雷登氏结晶蛋白CLC抗体的酶标板。2.根据权利要求1所述的用于检测慢性鼻窦炎伴鼻息肉亚型的ELISA试剂盒，其特征在于：所述包被有夏科雷登氏结晶蛋白CLC抗体为小鼠抗人CLC单克隆抗体。3.根据权利要求1所述的用于检测慢性鼻窦炎伴鼻息肉亚型的ELISA试剂盒，其特征在于：所述酶标板的每个微孔内所述夏科雷登氏结晶蛋白CLC抗体的包被量为0.1～1μg。4.根据权利要求1所述的用于检测慢性鼻窦炎伴鼻息肉亚型的ELISA试剂盒，其特征在于：进一步还包括夏科雷登氏结晶蛋白CLC标准品及其标准品稀释液、TMB底物显色液、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液、终止溶液和洗涤液。5.根据权利要求4所述的用于检测慢性鼻窦炎伴鼻息肉亚型的ELISA试剂盒，其特征在于：所述标准品为重组CLC蛋白；所述标准稀释液包括吐温20、牛血清白蛋白和磷酸缓冲盐溶液；所述检测溶液A工作液包括采用标准品稀释液稀释成浓度1～10μg/mL的生物素标记的人CLC抗体；所述检测溶液B工作液包括采用标准品稀释液稀释成浓度0.5～5μg/mL的抗生物素抗体结合的辣根过氧化物酶；所述终止溶液为硫酸；所述洗涤液包括吐温20和磷酸缓冲盐溶液。6.根据权利要求1所述的用于检测慢性鼻窦炎伴鼻息肉亚型的ELISA试剂盒，其特征在于：包被有夏科雷登氏结晶蛋白CLC抗体的酶标板的制备方法，包括以下步骤：将小鼠抗人CLC单克隆抗体用磷酸缓冲盐溶液稀释，取酶标板，向其加入稀释好的小鼠抗人CLC单克隆抗体，4℃过夜弃上清后洗板，每孔加入封闭液，再次弃上清后洗板。7.一种权利要求1～6任一项所述的用于检测慢性鼻窦炎伴鼻息肉亚型的ELISA试剂盒的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤一：制备包被有夏科雷登氏结晶蛋白CLC抗体：将小鼠抗人CLC单克隆抗体用磷酸缓冲盐溶液稀释；步骤二：制备包被有夏科雷登氏结晶蛋白CLC抗体的酶标板：取酶标板，每孔加入稀释好的小鼠抗人CLC单克隆抗体，4℃过夜弃上清后加入洗涤液洗板，每孔加入封闭液，再次弃上清后加入洗涤液洗板；步骤三：倍比稀释标准品：取标准品，向其加入标准品稀释液，制备得到浓度为Xng/mL的标准品，取浓度为Xng/mL的标准品进行倍比稀释，依次倍比稀释浓度为：Xng/mL，0.5Xng/mL，0.25Xng/mL...

【专利技术属性】
技术研发人员：张罗，王成硕，闫冰，王阳，
申请(专利权)人：张罗，王成硕，闫冰，王阳，北京市耳鼻咽喉科研究所，首都医科大学附属北京同仁医院，
类型：发明
国别省市：北京,11