一种测量肌酸激酶同工酶含量的改良型试剂制备方法技术

技术编号:21031640 阅读:43 留言:0更新日期:2019-05-04 04:29
本发明专利技术公开了一种测量肌酸激酶同工酶含量的改良型试剂制备方法,包括两种试剂分别为:R1试剂和R2试剂,R1试剂由咪唑、D(+)‑葡萄糖、二乙三胺五乙酸、亚硫酸钠、醋酸镁、ADP‑K、AMP、N‑乙酰半胱氨酸、NaDP‑Na、A5‑PP、NaN3、已糖激酶和G6‑P‑DH组成,R2试剂由CAPSO free acid、D(+)‑葡萄糖、CREATINE PHOSPHATE和NaN3组成。本发明专利技术的试剂采用免疫抑制法,用抗人M血清抑制M亚单位,然后测定剩余的B亚单位活性,在340nm的波长下测量B亚单位活性在做相应运算即得CK‑MB活性,本试剂直接采用CKMB抗体直接反应避免了现有技术在一系列处理过程中带来的干扰,增加了监测数据的精度。

Preparation of an improved reagent for measuring creatine kinase isoenzymes

The invention discloses an improved reagent preparation method for measuring the content of creatine kinase isoenzymes, which includes two reagents: R1 reagent and R2 reagent. The reagent R1 consists of imidazole, D(+) glucose, diethylenetriamine pentaacetic acid, sodium sulfite, magnesium acetate, ADP_K, AMP, N_acetylcysteine, NaDP_Na, A5_PP, NaN3, hexokinase and G6_P_DH. The reagent R2 is composed of C, D, D, D, D, D, D, K, N, N APSO free acid, D (+) glucose, CREATINE PHOSPHATE and NaN3. The reagent of the invention adopts immunosuppressive method, inhibits M subunit with anti-human M serum, then determines the activity of the remaining B subunit, measures the activity of B subunit at the wavelength of 340 nm, and then obtains the activity of CK MB by corresponding calculation. The reagent directly reacts with CKMB antibody to avoid the interference caused by the existing technology in a series of processing processes, and increases the accuracy of monitoring data.

【技术实现步骤摘要】
一种测量肌酸激酶同工酶含量的改良型试剂制备方法
本专利技术涉及医疗
,具体为一种测量肌酸激酶同工酶含量的改良型试剂制备方法。
技术介绍
肌酸激酶的同工酶在临床诊断中有十分重要的意义,在各种病变包括肌肉萎缩和心肌梗塞发生时,人的血清中肌酸激酶水平迅速提高,认为在心肌梗塞的诊断中测定肌酸激酶的活性比做心电图更为可靠,心肌梗死时,肌酸激酶在起病6小时内升高,24小时达高峰,3-4日内恢复正常,其中肌酸激酶的同工酶CK-MB诊断的特异性最高。生化分析仪测量肌酸激酶同工酶目前常用技术:CK由M和B两个亚单元组成三种的二聚体,CK1(BB)、CK2(MB)和CK3(MM)主要存在于胞浆中,另外血清中还有少量的线粒体同工酶(CKm),心肌中CK活力较高(仅次于骨骼肌),其中CK-MB约占13-22%(骨骼肌中<1%),因此,其作为心肌损伤的指标具有特异性,在生化分析仪测量肌酸激酶同工酶测定过程中封闭CKM抗体通过计算得出CKMB含量的测量方式在测试的过程中会产生一定的干扰,造成检测结果的失真。
技术实现思路
(一)解决的技术问题针对现有技术的不足,本专利技术提供了一种测量肌酸激酶同工酶含量的改良本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种测量肌酸激酶同工酶含量的改良型试剂制备方法,其特征在于,包括两种试剂分别为:R1试剂和R2试剂;R1试剂由咪唑、D(+)‑葡萄糖、二乙三胺五乙酸、亚硫酸钠、醋酸镁、ADP‑K、AMP、N‑乙酰半胱氨酸、NaDP‑Na、A5‑PP、NaN3、已糖激酶和G6‑P‑DH按照以下重量配比制成:5‑10g:0.7‑1.2g:0.7‑1.2g:0.1‑0.5g:1‑5g:0.9‑1.4g:1‑5g:2‑7g:1‑5g:0.012‑0.016g:0.8‑1.2g:7‑12ku:2‑7ku;R2试剂由CAPSO free acid、D(+)‑葡萄糖、CREATINE PHOSPHATE和NaN3按照以...

【技术特征摘要】
1.一种测量肌酸激酶同工酶含量的改良型试剂制备方法,其特征在于,包括两种试剂分别为:R1试剂和R2试剂;R1试剂由咪唑、D(+)-葡萄糖、二乙三胺五乙酸、亚硫酸钠、醋酸镁、ADP-K、AMP、N-乙酰半胱氨酸、NaDP-Na、A5-PP、NaN3、已糖激酶和G6-P-DH按照以下重量配比制成:5-10g:0.7-1.2g:0.7-1.2g:0.1-0.5g:1-5g:0.9-1.4g:1-5g:2-7g:1-5g:0.012-0.016g:0.8-1.2g:7-12ku:2-7ku;R2试剂由CAPSOfreeacid、D(+)-葡萄糖、CREATINEPHOSPHATE和NaN3按照以下重量配比制成:2-7g:7-12g:20-70g:1-5g;一种测量肌酸激酶同工酶含量的改良型试剂制备方法,包括以下步骤:1)R1试剂原料的测量:使用测量装置测量咪唑、D(+)-葡萄糖、二乙三胺五乙酸、亚硫酸钠、醋酸镁、ADP-K、AMP、N-乙酰半胱氨酸、NaDP-Na、A5-PP、NaN3和已糖激酶的重量,并依次加入量筒的内部搅拌混合,备用;2)R1试剂的调试:将混合后的咪唑、D(+)-葡萄糖、二乙三胺五乙酸、亚硫酸钠、醋酸镁、ADP-K、AMP、N-乙酰半胱氨酸、NaDP-Na、A5-PP、NaN3和已糖激酶用5mol/L的NaOH/HCl溶液调节pH值至6.75,误差为±0.05;3)R1试剂的制备:测量所需重量的G6-P-DH,并将测量后的G6-P-DH放入调节PH值后的溶剂中进行搅拌混合,制备完成,将制备完成的R1试剂放入试剂盒的内部,备用;4)R2试剂原料的测量:使用测量装置测量足量的CAPSOfreeacid,使用测量装置测量足量D(+)-葡萄糖、CREATINEPHOSPHATE和NaN3,备用;5)R2试剂...

【专利技术属性】
技术研发人员:杨苏民邹志良
申请(专利权)人:河北艾欧路生物科技有限责任公司
类型:发明
国别省市:河北,13

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