用于治疗和/或预防流感的组合物、方法和用途技术

本发明专利技术提供了用于治疗和/或预防流感的组合物、方法和用途。所述组合物包含经酸酐处理的蛋白质和另一种用于治疗和/或预防流感的药物。本发明专利技术制备的酸酐化蛋白是酸酐化的乳球蛋白，在体外实验中可以广谱地抑制多种亚型流感病毒感染细胞；在动物体内实验中，其具有显著的预防和治疗流感病毒感染的作用。流感病毒具有亚型多、突变率高的特点，使广谱性抗流感制剂的开发十分重要。酸酐化蛋白不仅可抑制多种季节性流感病毒的感染，而且对高致病性禽流感病毒H7N9和曾引起大流行的流感病毒H1N1(2009)也有显著的抑制作用，提示它可被开发成为高效、广谱地防治流感病毒的生物制剂。

Compositions, methods and uses for the treatment and/or prevention of influenza

【技术实现步骤摘要】
用于治疗和/或预防流感的组合物、方法和用途
本专利技术属于蛋白质工程领域，具体地涉及经酸酐处理的蛋白质抑制流感病毒的方法和用途。
技术介绍
流感病毒与流感疫情流行性感冒(Influenza)，是由流感病毒(Influenzaviruses,IVs)感染引起的，可引起急性呼吸道感染，主要是口、咽、支气管甚至肺部的不适，特征是突发高热、咽痛、咳嗽、流涕和肌肉关节痛等，严重的将导致死亡。世界卫生组织在2018年底的统计结果显示，每年仅因季节性流感引起的呼吸道疾病，就会造成全球范围内29万到65万人死亡。历史上四次大规模流感的爆发，每年的季节性流感和新型流感的突发与流行，提示着流感病毒对人类健康有持续性的威胁。流感病毒属于正黏病毒科(Orthomyxoviridae)，是一种高突变率、高致病性的RNA病毒。流感病毒根据核蛋白和基质蛋白抗原决定簇的不同，可划分为甲(A)、乙(B)、丙(C)和丁(D)四个亚型，甲、乙、丙型三种流感病毒都可感染人，其中，甲型流感病毒主要感染人、猪、马和禽类，乙型主要感染人和猪，丙型只感染人，丁型主要感染猪和牛。甲型流感病毒变异性强，是引起人类中流感大流行的原因。甲本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.在体外使用经酸酐处理的蛋白质抑制流感病毒的方法，其中所述蛋白质选自：乳球蛋白，优选β‑乳球蛋白(β‑lactoglobulin,β‑LG)，更优选牛β‑乳球蛋白；白蛋白，优选牛血清白蛋白、人血清白蛋白、鸡卵清白蛋白；RNA酶，优选RNA酶Ι；优选地，所述方法包括使经酸酐处理的蛋白质和任选地选自奥司他韦、扎那米韦、帕拉米韦、拉那米韦、Xofluza、金刚烷胺和金刚乙胺的药物与流感病毒接触，所述经酸酐处理的蛋白质是通过将酸酐溶液与蛋白质溶液混合产生的；优选地，其中根据蛋白质中的精氨酸和/或赖氨酸的修饰率测定，所述经酸酐处理的蛋白质是完全酸酐化的；优选地，其中酸酐的终浓度选自3、6、12、24、...

【技术特征摘要】
1.在体外使用经酸酐处理的蛋白质抑制流感病毒的方法，其中所述蛋白质选自：乳球蛋白，优选β-乳球蛋白(β-lactoglobulin,β-LG)，更优选牛β-乳球蛋白；白蛋白，优选牛血清白蛋白、人血清白蛋白、鸡卵清白蛋白；RNA酶，优选RNA酶Ι；优选地，所述方法包括使经酸酐处理的蛋白质和任选地选自奥司他韦、扎那米韦、帕拉米韦、拉那米韦、Xofluza、金刚烷胺和金刚乙胺的药物与流感病毒接触，所述经酸酐处理的蛋白质是通过将酸酐溶液与蛋白质溶液混合产生的；优选地，其中根据蛋白质中的精氨酸和/或赖氨酸的修饰率测定，所述经酸酐处理的蛋白质是完全酸酐化的；优选地，其中酸酐的终浓度选自3、6、12、24、36、48和60mM或3mM以上其他浓度，优选60mM；优选地，其中所述流感病毒在生物样品，如唾液、血液、血清、痰液中，在生物体，如哺乳动物，如人的表面上，或者在物品表面上。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述酸酐选自：3-羟基-邻苯二甲酸酐、琥珀酸酐和马来酸酐。3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述酸酐溶液是酸酐的二甲基亚砜溶液，优选地通过将所述酸酐的粉末溶解于二甲基亚砜获得；优选地酸酐溶液的浓度为0.5M以上，优选0.5M-10M，优选1M-5M，更优选1M；其中优选地，所述蛋白质溶液是蛋白质的磷酸盐溶液；其中优选地，所述磷酸盐选自磷酸氢二钠、磷酸氢二钾、磷酸二氢钠、磷酸二氢钾、磷酸钠和磷酸钾，优选磷酸氢二钠；其中优选地，所述磷酸盐溶液的pH大于7，例如7.5-14，8-10，或8.5-9，优选8.5；其中优选地，所述磷酸盐溶液中的蛋白质浓度为5mg/mL以上，10mg/mL-100mg/mL，20mg/mL-80mg/mL，或50mg/mL-70mg/mL，优选20mg/mL；其中优选地，所述经酸酐处理的蛋白质通过将酸酐溶液加入蛋白质溶液，混匀后在将pH维持于大于7，例如7.5-14，8-10，或8.5-9，优选8.5的情况下温育足以使蛋白质被酸酐溶液完全修饰，如通过蛋白质中的精氨酸和赖氨酸的修饰率测定；然后纯化和任选浓缩经酸酐处理的蛋白质获得；所述经酸酐处理的蛋白质的剂型为溶液、搽洗剂、喷雾剂、盥洗剂和干粉。4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中所述流感病毒选自禽流感假病毒、甲型流感和乙型流感，例如H7N9，甲型流感/Shanghai/4664T/2013(H7N9)；H5N1，甲型流感/QH/59/05(H5N1)，甲型流感/Thailand/Kan353/2004(H5N1)；H3N2，甲型流感/Guizhou/54/89(H3N2)；H1N1，甲型流感/PuertoRico/8/1934(H1N1)，甲型流感/Shanghai/37T/2009(H1N1)和乙型流感/Florida/4/2006。5.经酸酐处理的蛋白质和任选的另一种用于治疗和/或预防流感的药剂在制备用于预防和/或治疗受试者中的流感病毒感染的药物中的用途，其中所述经酸酐处理的蛋白质是通过将酸酐溶液与蛋白质溶液混合产生的，其中所述蛋白质选自：乳球蛋白，优选β-乳球蛋白(β-lactoglobulin,β-LG)，更优选牛β-乳球蛋白；白蛋白，优选牛血清白蛋白、人血清白蛋白、鸡卵清白蛋白；RNA酶，优选RNA酶Ι；优选地，其中根据蛋白质中的精氨酸和/或赖氨酸的修饰率测定，所述经酸酐处理的蛋白质是完全酸酐化的；优选地，其中酸酐的终浓度选自3、6、12、24、36、48和60mM以上或3mM以上其他浓度，优选60mM；优选地，其中所述酸酐选自：3-羟基-邻苯二甲酸酐、琥珀酸酐和马来酸酐；优选地，其中所述酸酐溶液是酸酐的二甲基亚砜溶液，优选地通过将所述酸酐的粉末溶解于二甲基亚砜获得；优选地酸酐溶液的浓度为0.5M以上，优选0.5M-10M，优选1M-5M，更优选1M；优选地，其中所述蛋白质溶液是蛋白质的磷酸盐溶液；其中优选地，所述磷酸盐选自磷酸氢二钠、磷酸氢二钾、磷酸二氢钠、磷酸二氢钾、磷酸钠和磷酸钾，优选磷酸氢二钠；其中优选地，所述磷酸盐溶液的pH大于7，例如7.5-14，8-10，或8.5-9，优选8....

【专利技术属性】
技术研发人员：杨霞，陆路，姜世勃，付玉红，李佩玉，徐巍，
申请(专利权)人：山西锦波生物医药股份有限公司，复旦大学，
类型：发明
国别省市：山西,14