一种高效的多重荧光定量PCR试剂盒及其制备方法技术

本发明专利技术提供了本发明专利技术其中一方面开发了一种高效的多重荧光定量PCR反应液及试剂盒、制备方法和荧光定量PCR方法。本发明专利技术的其中一方面提供了一种高效的多重荧光定量PCR反应液,该高效的多重荧光定量PCR反应液包含基础缓冲液和蛋白质保护液。通过对试剂灵敏度及扩增性能的检测，发现本研究提供的多重荧光定量PCR试剂具有比传统试剂更高的灵敏度及扩增性能。本发明专利技术优化了多重荧光定量PCR反应液，特别是通过加入一些特定的添加剂，如一定比例的甘油、BSA和DTT等，提高了反应的灵敏度、特异性及稳定性。

【技术实现步骤摘要】
一种高效的多重荧光定量PCR试剂盒及其制备方法
本专利技术属于分子和细胞生物学领域，特别涉及高效多重荧光定量PCR检测。
技术介绍
荧光定量PCR(realtimefluores-cencequantitativePCR)是1996年由美国AppliedBiosystems公司推出的一种新型定量试验技术，其运用非常广泛，不仅可以用于mRNA表达的研究、单核苷酸多态性(SNPs)的测定、病原体的测定、肿瘤研究以及免疫组分分析等医疗方面，还可以用于新药开发、药物疗效研究以及新型诊断及检验试剂的开发等药物研究领域。染料法荧光定量PCR最常用SYBRGreenI作为DNA的结合染料，这是一种DNA小沟非饱和性结合染料，与DNA结合时可产生荧光，而游离时不产生荧光，每形成一条DNA双链，就会有一定数量的染料结合上去，从信号的累积来对产物进行定量。虽然这种方法具有价格便宜，适用性广的优点，但是其特异性差，不能区分扩增产物与非特异性扩增，更不能对不同目标产物进行分别定量，这些不足使得染料法荧光定量PCR的运用受到一定的限制。而探针法的荧光定量PCR则完全弥补了这些不足，多重荧光定量PCR更是实现同本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种高效的多重荧光定量PCR反应液,其特征在于，所述高效的多重荧光定量PCR反应液包含基础缓冲液和蛋白质保护液。

【技术特征摘要】
1.一种高效的多重荧光定量PCR反应液,其特征在于，所述高效的多重荧光定量PCR反应液包含基础缓冲液和蛋白质保护液。2.根据权利要求1所述的一种高效的多重荧光定量PCR反应液,其特征在于，所述蛋白质保护液包含甘油、BSA和DTT。3.根据权利要求1所述的一种高效的多重荧光定量PCR反应液,其特征在于，所述基础缓冲液的成分包含Tris-HCl、dNTPs、KCl、(NH4)2SO4、MgCl2。4.根据权利要求1所述的一种高效的多重荧光定量PCR反应液,其特征在于，所述多重荧光定量PCR反应液由Tris-HCl溶液、dNTPs溶液、KCl溶液、(NH4)2SO4溶液、MgCl2溶液、BSA溶液、甘油溶液和DTT溶液组成。5.根据权利要求4所述的一种高效的多重荧光定量PCR反应液,其特征在于，所述多重荧光定量PCR反应液包含200～700mMPH8.3Tris-HCl、0.3～1.5mMdNTPs、25～75mMKCl、75～200mM(NH4)2SO4、12～20mMMgCl2溶液和8％～25％的甘油。6.一种高效的多重荧光定量PCR试剂盒,其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员：张清仪，李新瑞，缪丹，任加庆，臧赢，
申请(专利权)人：吴江近岸蛋白质科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32