一种利用人参内生菌转化人参皂苷Rb1为稀有人参皂苷的方法技术

技术编号:20712740 阅读:51 留言:0更新日期:2019-03-30 15:39
一种利用人参内生菌转化人参皂苷Rb1为稀有人参皂苷的方法,属于微生物技术领域,由液体培养基的配制、固体培养基的配制、人参内生菌F1的培养及将人参主皂苷Rb1转化步骤完成,最终得到稀有人参皂苷CK。本发明专利技术采用人参内生菌转化生产稀有人参皂苷CK,内生菌生长周期短、生长迅速,易于培养而不受环境因素影响,适宜工业化生产。

【技术实现步骤摘要】
一种利用人参内生菌转化人参皂苷Rb1为稀有人参皂苷的方法
本专利技术属于微生物
,涉及一种人参皂苷的生产方法。
技术介绍
人参(PanaxginsengC.A.Mey.)是一种特殊的药用植物,药用成分集中于人参根类部分,被世界各地草药从业者广泛用于治疗各种疾病。人参主要含有的物质包括人参皂苷、氨基酸、人参多糖、有机酸及挥发油等有效化学成分。人参皂苷是人参主要药效成分,且不同部位各单体皂苷含量有差异,以在根部中Rb1的含量最高。其中稀有人参皂苷对抑制肿瘤细胞增殖、诱导细胞凋亡有重要作用。人参皂苷CompoundK(简称CK)是人参二醇型皂苷在人肠道内的代谢产物,其在体内、体外均具有良好的抗肿瘤作用,是一种具有良好开发前景的抗癌新药。植物内生菌产生与其宿主相同的化学成分,内生菌是获取植物活性成分的重要来源。内生菌在宿主的科、种以及组织水平上存在专一性。这种专一性可能是内生菌与宿主在长期共同进化中形成的。人参的名贵以及内生菌群的特殊性使得人们开始关注人参内生菌的研究。研究表明,由于稀有人参皂苷(Rh1、Rh2、F2、CK等)具有尺寸小、生物利用度高、细胞膜渗透性强等特点,因此比人参主本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种利用人参内生菌转化人参皂苷Rb1为稀有人参皂苷的方法,其特征在于由以下步骤现实:⑴液体培养基的配制取成品V8汁饮料,经离心及过滤,取上清液200‑300mL,向其中加入2‑4g CaCO3,补足水至1000mL,得到液体培养基;⑵固体培养基的配制取成品V8汁饮料,经离心及过滤,取上清液200‑300mL,向其中加入2‑4g CaCO3及琼脂粉15‑20g,补足水至1000mL,得到固体培养基;⑶人参内生菌F1的培养取人参内生菌打成菌饼块,所述的人参内生菌为Fusarium oxysporum,将菌饼接种于固体培养基平板的中心,28℃培养,6‑9天后刮取平板上的菌丝移到100mL液体培养...

【技术特征摘要】
1.一种利用人参内生菌转化人参皂苷Rb1为稀有人参皂苷的方法,其特征在于由以下步骤现实:⑴液体培养基的配制取成品V8汁饮料,经离心及过滤,取上清液200-300mL,向其中加入2-4gCaCO3,补足水至1000mL,得到液体培养基;⑵固体培养基的配制取成品V8汁饮料,经离心及过滤,取上清液200-300mL,向其中加入2-4gCaCO3及琼脂粉15-20g,补足水至1000mL,得到固体培养基;⑶人参内生菌F1的培养取人参内生菌打成菌饼块,所述的人参内生菌为Fusariumoxysporum,将菌饼接种于固体培养基平板的中心,28℃培养,6-9天后刮取平板上的菌丝移到100mL液体培养基的三角瓶中,28℃、130r/min往复摇床培养8-10天,得到人参内生菌F1的培养液;⑷人参主皂苷Rb1转化方法向含有人参内生菌F1的培养液的三角瓶中加入已灭菌的玻璃珠,再将该三角瓶放在摇床中,200rpm室温振荡1-2h,在无菌环境下过滤菌液,此菌液含有孢子;先将含有孢子的菌液按上述振荡条件下培养24h后,加入人参单体皂苷Rb1溶液,最后使人参内生菌F1菌液的孢子最终浓度为3-5×106个/mL及人参皂苷Rb1底物浓度为0.25mg/mL,继续振荡培养5-...

【专利技术属性】
技术研发人员:雷锋杰张爱华陈长宝张连学
申请(专利权)人:吉林农业大学长春中医药大学
类型:发明
国别省市:吉林,22

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