一种藻胆蛋白多肽粉的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种藻胆蛋白多肽粉的制备方法，其包括以下步骤：（1）将海藻干燥和粉碎，加入冷水和石英砂，在研磨得到海藻浆液；（2）将步骤1得到的海藻浆液离心并且分离收集上清；（3）向收集的上清液中加入硫酸铵粉末，将上清液避光沉淀，离心，得到蛋白沉淀；（4）将步骤3得到的蛋白沉淀溶于磷酸缓冲液中，加入弹性蛋白酶和胰蛋白酶酶解，并且使用透析方法来进行脱盐；（5）将步骤4得到的酶解和脱盐后的蛋白肽溶液冷冻干燥，得到藻胆蛋白多肽粉。本发明专利技术的方法能够有效从海藻中提取出藻胆蛋白，并且将其进行水解处理，得到质量优越的多肽粉。

【技术实现步骤摘要】
一种藻胆蛋白多肽粉的制备方法
本专利技术涉及肽的制备，尤其是一种藻胆蛋白多肽粉的制备方法。
技术介绍
藻胆蛋白主要包括藻蓝蛋白、藻红蛋白和别藻蓝蛋白。藻胆蛋白是一种非常重要的光动力药物的原料，特有的光敏效应可辅助激光治癌，在病灶部位富集，吸收光后高效产生自由基和活泼态氧，从而实现对肿瘤细胞的杀伤。有光毒性而没有暗毒性，在人体内代谢快，藻胆蛋白还具有抗氧化清除自由基和提高免疫力的功效。藻胆蛋白可作为功能因子用于保健食品和功能食品及特殊饲料，同时还是理想的天然色素，可大量用于食品工业和化妆品工业等，无毒副作用，是安全的添加剂。近期藻红蛋白的生产基本由美国Sigma公司垄断。国内有以红毛菜、紫球藻和螺旋藻作为原料提取藻红蛋白的报导，现在仍处于研究阶段，未有成品进入市场销售。目前，市场可以购买的藻胆蛋白往往品质不高，除非使用凝胶色谱进行分离，很难得到纯度较高的藻胆蛋白，这也限制了藻胆蛋白的深度工业使用。
技术实现思路
为了克服现有技术中的不足，本专利技术的目的在于提供一种容易消化吸收的藻胆蛋白多肽的制备方法。在本专利技术的一个方面，提供了一种藻胆蛋白多肽粉的制备方法，其特征在于：所述的方法包括以下步骤：（1）将10重量份海藻干燥和粉碎，加入2000-4000重量份0-6摄氏度的冷水和50-100重量份的石英砂，在0-6摄氏度下研磨30-60分钟，得到海藻浆液；（2）将步骤1得到的海藻浆液在3000-5000转/分下离心30-60分钟，并且分离收集上清；（3）向收集的上清液中加入硫酸铵粉末，使得硫酸铵在上清液中的浓度达到45-65%，将上清液置于0-6摄氏度下避光沉淀2-6小时，在0-6摄氏度和3000-5000转/分下进行离心，得到蛋白沉淀；（4）将步骤3得到的蛋白沉淀溶于pH为8-9的磷酸缓冲液中，加入弹性蛋白酶和胰蛋白酶在30-40摄氏度下酶解2-4小时，并且使用透析方法来进行脱盐；（5）将步骤4得到的酶解和脱盐后的蛋白肽溶液冷冻干燥，得到藻胆蛋白多肽粉。在本专利技术优选的方面，在步骤1中，将10重量份海藻干燥和粉碎，加入3200重量份4摄氏度的冷水和60重量份的石英砂，在4摄氏度下研磨40分钟，得到海藻浆液。在本专利技术优选的方面，在步骤2中，将步骤1得到的海藻浆液在4500转/分下离心40分钟，并且分离收集上清。在本专利技术优选的方面，在步骤3中，向收集的上清液中加入硫酸铵粉末，使得硫酸铵在上清液中的浓度达到55%，将上清液置于4摄氏度下避光沉淀4小时，在4摄氏度和4500转/分下进行离心，得到蛋白沉淀。在本专利技术优选的方面，在步骤4中，将步骤3得到的蛋白沉淀溶于pH为8.5的磷酸缓冲液中，加入弹性蛋白酶和胰蛋白酶在38摄氏度下酶解3.5小时，并且使用透析方法来进行脱盐。在本专利技术优选的方面，在步骤1中，所述的海藻选自条斑紫菜、坛紫菜、红藻、蓝藻、钝顶螺旋藻。在本专利技术优选的方面，在步骤1中，在研磨之前，还向研磨混合物中加入20-40重量份的丙氨酸。在本专利技术优选的方面，在步骤1中，在研磨之前，还向研磨混合物中加入32重量份的丙氨酸。在本专利技术优选的方面，在步骤3中，在加入硫酸铵粉末之后，还向上清液中加入10-20g/L的硫酸镁，5-10g/L的乙醇。在本专利技术优选的方面，在步骤3中，在加入硫酸铵粉末之后，还向上清液中加入14g/L的硫酸镁，8g/L的乙醇。在本专利技术优选的方面，在步骤3中，避光沉淀过程中不对上清液进行扰动。本专利技术的方法能够有效从海藻中提取出藻胆蛋白，并且将其进行水解处理，得到质量优越的多肽粉，在食品加工和保健品加工领域具有广泛的用途。具体实施方式除非另外地说明，本专利技术中的弹性蛋白酶和胰蛋白酶均购自安徽陆荣生物技术有限公司。所述的弹性蛋白酶和胰蛋白酶的添加量均为4000U/mL。除非另外地说明，海藻系专利技术人采购自本地海鲜市场的坛紫菜，并且所有实施例和对比例的海藻均为粉碎之后混合均匀后均匀称取的，其种类和品质完全一致。除非另外地说明，在步骤3中，避光沉淀过程中不对上清液进行扰动，并且该避光沉淀过程在冰箱中完成。实施例1在本实施例中，一种藻胆蛋白多肽粉的制备方法，其包括以下步骤：（1）将10千克海藻干燥和粉碎，加入3200千克4摄氏度的冷水和60千克的石英砂，在4摄氏度下研磨40分钟，得到海藻浆液；（2）将步骤1得到的海藻浆液在4500转/分下离心40分钟，并且分离收集上清；（3）向收集的上清液中加入硫酸铵粉末，使得硫酸铵在上清液中的浓度达到55%，将上清液置于4摄氏度下避光沉淀4小时，在4摄氏度和4500转/分下进行离心，得到蛋白沉淀；（4）将步骤3得到的蛋白沉淀溶于pH为8.5的磷酸缓冲液中，加入弹性蛋白酶和胰蛋白酶在38摄氏度下酶解3.5小时，并且使用透析方法来进行脱盐；（5）将步骤4得到的酶解和脱盐后的蛋白肽溶液冷冻干燥，得到藻胆蛋白多肽粉。实施例2在本实施例中，一种藻胆蛋白多肽粉的制备方法，其包括以下步骤：（1）将10千克海藻干燥和粉碎，加入4000千克6摄氏度的冷水和100千克的石英砂，在6摄氏度下研磨30分钟，得到海藻浆液；（2）将步骤1得到的海藻浆液在5000转/分下离心30分钟，并且分离收集上清；（3）向收集的上清液中加入硫酸铵粉末，使得硫酸铵在上清液中的浓度达到65%，将上清液置于6摄氏度下避光沉淀2小时，在6摄氏度和5000转/分下进行离心，得到蛋白沉淀；（4）将步骤3得到的蛋白沉淀溶于pH为9的磷酸缓冲液中，加入弹性蛋白酶和胰蛋白酶在40摄氏度下酶解2小时，并且使用透析方法来进行脱盐；（5）将步骤4得到的酶解和脱盐后的蛋白肽溶液冷冻干燥，得到藻胆蛋白多肽粉。实施例3在本实施例中，一种藻胆蛋白多肽粉的制备方法，其包括以下步骤：（1）将10千克海藻干燥和粉碎，加入2000千克0摄氏度的冷水和50千克的石英砂，在0摄氏度下研磨60分钟，得到海藻浆液；（2）将步骤1得到的海藻浆液在3000转/分下离心60分钟，并且分离收集上清；（3）向收集的上清液中加入硫酸铵粉末，使得硫酸铵在上清液中的浓度达到45%，将上清液置于0摄氏度下避光沉淀6小时，在0摄氏度和3000转/分下进行离心，得到蛋白沉淀；（4）将步骤3得到的蛋白沉淀溶于pH为8的磷酸缓冲液中，加入弹性蛋白酶和胰蛋白酶在30摄氏度下酶解4小时，并且使用透析方法来进行脱盐；（5）将步骤4得到的酶解和脱盐后的蛋白肽溶液冷冻干燥，得到藻胆蛋白多肽粉。实施例4本实施例和实施例1的区别在于，在步骤1中，在研磨之前，还向研磨混合物中加入32重量份的丙氨酸。实施例5本实施例和实施例1的区别在于，在步骤1中，在研磨之前，还向研磨混合物中加入40重量份的丙氨酸。实施例6本实施例和实施例1的区别在于，在步骤1中，在研磨之前，还向研磨混合物中加入20重量份的丙氨酸。实施例7本实施例和实施例1的区别在于，在步骤3中，在加入硫酸铵粉末之后，还向上清液中加入14g/L的硫酸镁，8g/L的乙醇。实施例8本实施例和实施例1的区别在于，在加入硫酸铵粉末之后，还向上清液中加入10g/L的硫酸镁，10g/L的乙醇。实施例9本实施例和实施例1的区别在于，在加入硫酸铵粉末之后，还向上清液中加入20g/L的硫酸镁，5g/L的乙醇。实施例10本实施例和实施例1的区别在于：（1）在步骤1中，在研磨本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种藻胆蛋白多肽粉的制备方法，其特征在于：所述的方法包括以下步骤：（1）将10重量份海藻干燥和粉碎，加入2000‑4000重量份0‑6摄氏度的冷水和50‑100重量份的石英砂，在0‑6摄氏度下研磨30‑60分钟，得到海藻浆液；（2）将步骤1得到的海藻浆液在3000‑5000转/分下离心30‑60分钟，并且分离收集上清；（3）向收集的上清液中加入硫酸铵粉末，使得硫酸铵在上清液中的浓度达到45‑65%，将上清液置于0‑6摄氏度下避光沉淀2‑6小时，在0‑6摄氏度和3000‑5000转/分下进行离心，得到蛋白沉淀；（4）将步骤3得到的蛋白沉淀溶于pH为8‑9的磷酸缓冲液中，加入弹性蛋白酶和胰蛋白酶在30‑40摄氏度下酶解2‑4小时，并且使用透析方法来进行脱盐；（5）将步骤4得到的酶解和脱盐后的蛋白肽溶液冷冻干燥，得到藻胆蛋白多肽粉。

【技术特征摘要】
1.一种藻胆蛋白多肽粉的制备方法，其特征在于：所述的方法包括以下步骤：（1）将10重量份海藻干燥和粉碎，加入2000-4000重量份0-6摄氏度的冷水和50-100重量份的石英砂，在0-6摄氏度下研磨30-60分钟，得到海藻浆液；（2）将步骤1得到的海藻浆液在3000-5000转/分下离心30-60分钟，并且分离收集上清；（3）向收集的上清液中加入硫酸铵粉末，使得硫酸铵在上清液中的浓度达到45-65%，将上清液置于0-6摄氏度下避光沉淀2-6小时，在0-6摄氏度和3000-5000转/分下进行离心，得到蛋白沉淀；（4）将步骤3得到的蛋白沉淀溶于pH为8-9的磷酸缓冲液中，加入弹性蛋白酶和胰蛋白酶在30-40摄氏度下酶解2-4小时，并且使用透析方法来进行脱盐；（5）将步骤4得到的酶解和脱盐后的蛋白肽溶液冷冻干燥，得到藻胆蛋白多肽粉。2.根据权利要求1所述的一种藻胆蛋白多肽粉的制备方法，其特征在于：在步骤1中，将10重量份海藻干燥和粉碎，加入3200重量份4摄氏度的冷水和60重量份的石英砂，在4摄氏度下研磨40分钟，得到海藻浆液。3.根据权利要求1所述的一种藻胆蛋白多肽粉的制备方法，其特征在于：在步骤2中，将步骤1得到的海藻浆液在4500转/分下离心40分钟，并且分离收集上清。4.根据权利要求1所述的一种藻胆蛋白多肽...

【专利技术属性】
技术研发人员：鞠文明，孙永军，唐晓波，李俊峰，鞠晓庆，毕囡囡，王淑倩，邱美茹，蔡英英，
申请(专利权)人：山东好当家海洋发展股份有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37