分子设计的结合藻红胆素的藻蓝蛋白β亚基类荧光蛋白及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种结合藻红胆素的藻蓝蛋白ｂｅｔａ亚基类荧光蛋白、其与链霉亲和素形成的融合蛋白及其突变体，其序列为序列１、序列２、序列３和序列４；并公开了融合链霉亲和素的荧光蛋白直接用于荧光免疫检测的方法；藻蓝蛋白ｂｅｔａ亚基保守的第１５３位半胱氨酸残基通过硫醚键可以结合藻蓝胆素ＰＣＢ，通过基因工程发现，藻蓝蛋白ｂｅｔａ亚基保守的第１５３位半胱氨酸残基通过硫醚键也可以结合藻红胆素ＰＥＢ，得到一类新型的荧光藻蓝蛋白，这类蛋白的光谱性质与结合ＰＣＢ的藻蓝蛋白ｂｅｔａ亚基荧光蛋白完全不同，有较高的荧光效率，同时由于带有Ｈｉｓ－ｔａｇ标记，便于提纯，有助于改善其溶解性，与链霉亲和素形成融合蛋白，可以直接用于免疫荧光检测，有利于其在各个领域中的应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种结合藻红胆素的藻蓝蛋白beta亚基类荧光蛋白及其应用，属于 生物技术中色素蛋白质材料领域，具体涉及结合藻红胆素PEB的藻蓝蛋白beta亚基类荧光 蛋白、其与链霉亲和素形成的融合蛋白及其突变体，以及利用此融合蛋白检测可溶性抗原 或抗体的检测方法。
技术介绍
藻胆蛋白(phycobiliprotein)是蓝藻和红藻光合作用捕光复合物的功能组分。 根据其吸收光谱和荧光光谱特征，藻胆蛋白可以分为藻红蛋白(phycoerythrin，简称CPE)、 藻红蓝蛋白(phycoerythrocyanin，简称PEC)、藻蓝蛋白(phycocyanin，简称CPC)和变藻 蓝蛋白(allophycocyanin，简称APC) 。 CPE、PEC、CPC和APC含alpha和beta亚基，每个亚 基中藻胆色素(phycobilin)通过硫醚键与藻胆蛋白脱辅基蛋白(apo-phycobiliprotein) 半胱氨酸残基的巯基共价结合，其种类及其与脱辅基蛋白的相互作用决定藻胆蛋白的光谱 性质。藻胆色素与脱辅基蛋白共价结合形成特定的构象，使得CPE主要吸收约560nm的可 见光，发射约5本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种结合藻红胆素的藻蓝蛋白ｂｅｔａ亚基类荧光蛋白，其特征在于：藻红胆素ＰＥＢ通过硫醚键结合在重组藻红蓝蛋白ｂｅｔａ亚基的２０１位，相当于原始藻蓝蛋白ｂｅｔａ亚基的１５３位。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：赵开弘，周明，佟顺刚，夏坤，
申请(专利权)人：广州天宝颂原生物科技开发有限公司，华中科技大学，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]