化学发光底物液及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种化学发光底物液。该化学发光底物液包括如下组分：150mg/L的(4‑氯苯巯基)(10‑甲基‑9,10‑二氢化吖啶亚甲基)磷酸二钠盐、10mmol/L‑500mmol/L的缓冲基质、0.1mg/L‑20mg/L的荧光增强物质、10mg/L‑5000mg/L的本底发光抑制物质及0.1g/L‑10g/L的表面活性剂；化学发光底物液的pH为8‑11，本底发光抑制物质为具有弱还原性的无机还原剂或者具有弱还原性的有机还原剂，表面活性剂为非离子表面活性剂与阴离子表面活性剂的混合物或者为非离子表面活性剂与阳离子表面活性剂的混合物。上述化学发光底物液达到发光平台期时间短、发光持续时间长，检测灵敏度高且光稳定性好，可以提高临床免疫检测速度，缩短检测时间。

【技术实现步骤摘要】
化学发光底物液及其应用
本专利技术涉及化学发光免疫分析
，特别是涉及一种化学发光底物液及其应用。
技术介绍
化学发光免疫分析技术因具有灵敏度高，检测线性范围宽、操作简单、检测时间短、易于自动化处理等特点，已成为免疫诊断领域广泛使用的免疫分析技术。化学发光分为直接化学发光、酶促(间接)化学发光和电化学发光。酶促化学发光免疫分析技术建立在酶免疫反应及化学发光基础之上，免疫反应原理与酶联免疫(EIA)、放射免疫(RIA)相似，不同之处在于信号的产生和检测。免疫反应完成后，发光底物在酶催化作用下，形成激发态的中间体，该中间体不稳定，在回复到基态的过程中会辐射光子，通过光信号测量仪器测量相对发光强度，可以推算出待检测物质的浓度。碱性磷酸酶(ALP)在酶促化学发光免疫分析中应用比较广泛，目前使用最多的碱性磷酸酶发光底物是1,2-二氧环己烷衍生物，如CDP-star、AMPPD等，此类发光底物属于辉光型，达到发光平台期时间长，通常大于20分钟。相关技术中还有以9，10-二氢吖啶衍生物为发光底物的APS-5碱性磷酸酶底物液，该底物达到发光平台期时间虽然比上述1,2-二氧环己烷衍生物发光底物的达到发光平台期时间短，但是该底物本底信号较高、稳定性较差，且价格昂贵。
技术实现思路
基于此，有必要提供一种达到平台期时间短、检测灵敏度高且稳定性好的化学发光底物液。此外，还提供化学发光底物液的应用。一种化学发光底物液，包括如下组分：150mg/L的(4-氯苯巯基)(10-甲基-9,10-二氢化吖啶亚甲基)磷酸二钠盐、10mmol/L-500mmol/L的缓冲基质、0.1mg/L-20mg/L的荧光增强物质、10mg/L-5000mg/L的本底发光抑制物质及0.1g/L-10g/L的表面活性剂；所述化学发光底物液的pH为8-11，所述本底发光抑制物质为具有弱还原性的无机还原剂或者具有弱还原性的有机还原剂，所述表面活性剂为非离子表面活性剂与阴离子表面活性剂的混合物或者为非离子表面活性剂与阳离子表面活性剂的混合物。上述化学发光底物液中，采用(4-氯苯巯基)(10-甲基-9,10-二氢化吖啶亚甲基)磷酸二钠盐作为碱性磷酸酶底物，缓冲基质具有维持pH、增加稳定性的作用；荧光增强物质能够使底物液发光信号增强，从而可以提升检测灵敏度；具有弱还原性的本底发光抑制物质能够降低本底信号值，从而提升检测灵敏度；非离子表面活性剂与阴离子表面活性剂复配的表面活性剂，及非离子表面活性剂与阳离子表面活性剂复配的表面活性剂能够改善溶液分散性，使底物液发光信号增强，从而提升检测灵敏度，同时还能使底物液产生持续、稳定的发光信号；通过将上述(4-氯苯巯基)(10-甲基-9,10-二氢化吖啶亚甲基)磷酸二钠盐、缓冲基质、荧光增强物质、本底发光抑制物质及的表面活性剂以一定的配比进行混合，能够使化学发光底物液的发光效率快、达到发光平台期时间短，发光持续时间长、检测灵敏度高且光稳定性好，从而可以提高临床免疫检测速度，缩短检测时间。在其中一个实施例中，所述缓冲基质选自三羟甲基氨基甲烷、2-氨基-2-甲基-1-丙醇及4-羟乙基哌嗪乙磺酸中的一种。在其中一个实施例中，所述荧光增强物质为含有多个碳环及至少一个阳离子取代基的芳香族化合物。在其中一个实施例中，所述本底发光抑制物质选自亚硫酸钠、亚硫酸钾、硫代硫酸钠、维生素C及二硫苏糖醇中的一种。在其中一个实施例中，所述非离子表面活性剂为羟丙基甲基纤维素，所述阴离子表面活性剂为十二烷基磺酸钠。在其中一个实施例中，所述荧光增强物质选自光泽精、亚甲基蓝及碱性蓝中的一种。在其中一个实施例中，所述化学发光底物液还包括如下组分：质量百分浓度为0.01％-0.5％的防腐剂。防腐剂具有抑菌防腐的作用，能够增加化学发光底物液的稳定性及增长化学发光底物液的有效期。在其中一个实施例中，所述防腐剂选自叠氮钠、液体生物防腐剂、5-溴-5-硝基-1,3-二噁烷及卡松中的至少一种。在其中一个实施例中，所述化学发光底物液还包括如下组分：1ppm-1000ppm的消泡剂。消泡剂具有消泡功能，通过加入消泡剂能够防止混匀时出现气泡，影响读数。在其中一个实施例中，所述消泡剂选自矿物油类消泡剂、有机硅类消泡剂及聚醚类消泡剂中的一种。上述化学发光底物液在化学发光免疫分析中的应用。附图说明图1为实施例1～3的化学发光底物液的发光动力学曲线图。具体实施方式为了便于理解本专利技术，下面将参照相关附图对本专利技术进行更全面的描述。附图中给出了本专利技术的较佳的实施例。但是，本专利技术可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本专利技术的公开内容的理解更加透彻全面。除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本专利技术的
的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本专利技术的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本专利技术。一实施方式的化学发光底物液包括如下组分：150mg/L的(4-氯苯巯基)(10-甲基-9,10-二氢化吖啶亚甲基)磷酸二钠盐、10mmol/L-500mmol/L的缓冲基质、0.1mg/L-20mg/L的荧光增强物质、10mg/L-5000mg/L的本底发光抑制物质及0.1g/L-10g/L的表面活性剂。其中，化学发光底物液的pH为8-11，本底发光抑制物质为具有弱还原性的无机还原剂或者具有弱还原性的有机还原剂，表面活性剂为非离子表面活性剂与阴离子表面活性剂的混合物或者为非离子表面活性剂与阳离子表面活性剂的混合物。上述化学发光底物液中，采用(4-氯苯巯基)(10-甲基-9,10-二氢化吖啶亚甲基)磷酸二钠盐作为碱性磷酸酶底物，缓冲基质具有维持pH、增加稳定性的作用；荧光增强物质能够使底物液发光信号增强，从而可以提升检测灵敏度；具有弱还原性的本底发光抑制物质能够降低本底信号值，从而提升检测灵敏度；非离子表面活性剂与阴离子表面活性剂复配的表面活性剂，及非离子表面活性剂与阳离子表面活性剂复配的表面活性剂能够改善溶液分散性，使底物液发光信号增强，从而提升检测灵敏度，同时还能使底物液产生持续、稳定的发光信号；通过将上述(4-氯苯巯基)(10-甲基-9,10-二氢化吖啶亚甲基)磷酸二钠盐、缓冲基质、荧光增强物质、本底发光抑制物质及的表面活性剂以一定的配比进行混合，能够使化学发光底物液的达到发光平台期时间短，发光持续时间长，灵敏度高且光稳定性好，从而可以提高临床免疫检测速度，缩短检测时间。其中，“发光平台期”是指底物液的发光值达到峰值且稳定不变的时间段。其中，缓冲基质(也叫缓冲剂)选自三羟甲基氨基甲烷(Tris)、2-氨基-2-甲基-1-丙醇及4-羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)中的一种。优选三羟甲基氨基甲烷作为缓冲基质。缓冲基质具有维持pH、增加稳定性的作用。具体地，可以使用稀盐酸来调节化学发光底物液的pH，化学发光底物液的pH优选为9.1。其中，荧光增强物质(也叫荧光增强剂)为含有多个碳环及至少一个阳离子取代基的芳香族化合物。具体地，荧光增强物质选自光泽精、亚甲基蓝及碱性蓝中的一种。优选光泽精作为荧光增强物质。其中，本底发光抑制物质选自亚硫酸钠、亚硫酸钾、硫代硫酸钠、维生素C及二硫苏糖醇(DTT)中的一种。优选硫代硫本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种化学发光底物液，其特征在于，所述化学发光底物液包括如下组分：150mg/L的(4‑氯苯巯基)(10‑甲基‑9,10‑二氢化吖啶亚甲基)磷酸二钠盐、10mmol/L‑500mmol/L的缓冲基质、0.1mg/L‑20mg/L的荧光增强物质、10mg/L‑5000mg/L的本底发光抑制物质及0.1g/L‑10g/L的表面活性剂；所述化学发光底物液的pH为8‑11，所述本底发光抑制物质为具有弱还原性的无机还原剂或者具有弱还原性的有机还原剂，所述表面活性剂为非离子表面活性剂与阴离子表面活性剂的混合物或者为非离子表面活性剂与阳离子表面活性剂的混合物。

【技术特征摘要】
1.一种化学发光底物液，其特征在于，所述化学发光底物液包括如下组分：150mg/L的(4-氯苯巯基)(10-甲基-9,10-二氢化吖啶亚甲基)磷酸二钠盐、10mmol/L-500mmol/L的缓冲基质、0.1mg/L-20mg/L的荧光增强物质、10mg/L-5000mg/L的本底发光抑制物质及0.1g/L-10g/L的表面活性剂；所述化学发光底物液的pH为8-11，所述本底发光抑制物质为具有弱还原性的无机还原剂或者具有弱还原性的有机还原剂，所述表面活性剂为非离子表面活性剂与阴离子表面活性剂的混合物或者为非离子表面活性剂与阳离子表面活性剂的混合物。2.根据权利要求1所述的化学发光底物液，其特征在于，所述缓冲基质选自三羟甲基氨基甲烷、2-氨基-2-甲基-1-丙醇及4-羟乙基哌嗪乙磺酸中的一种。3.根据权利要求1所述的化学发光底物液，其特征在于，所述荧光增强物质为含有多个碳环及至少一个阳离子取代基的芳香族化合物。4.根据权利要求3所述的化学发...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘挺，邓月月，姚天成，
申请(专利权)人：深圳天深医疗器械有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44