The invention discloses a fluorescent probe for detecting nitroreductase, a preparation method thereof and an application of enzymatic reaction, belonging to the technical field of industrial analysis and detection. The fluorescent probe is 3 quinoline 1 bromopropane 1 sulfonate (4 (diphenylamine)((4 nitrobenzyl) oxy) [1,1'biphenyl] 4 vinyl). The probe compound of the present invention enhances its hydrophilicity by introducing hydrophilic group sulfonate and quinoline salts, undergoes 1,6_rearrangement and elimination reaction under the catalysis of nitroreductase (NTR), generates hydroxyl groups, and realizes the detection and analysis of NTR in enzymatic reaction by fluorescence changes induced by intramolecular charge transfer effect (ICT). This method has the advantages of simple preparation, high yield and suitable for detecting high concentration enzymes in enzymatic reaction. It has shown great application prospects in the field of enzymatic reaction system enzymatic detection in chemical industry.
【技术实现步骤摘要】
一种检测硝基还原酶的荧光探针及其制备方法与酶促反应的应用
本专利技术属于工业分析检测
,具体涉及一种检测硝基还原酶的荧光探针及其制备方法与酶促反应的应用。
技术介绍
硝基化合物广泛应用于医药、染料、农药和炸药等行业,但是它们大多数对人类有致癌作用,会引起诸多疾病,危害人类健康。而胺类化合物在农药、医药、染料、合成树脂、表面活性剂等诸多精细化工产品和中间体的合成中至关重要,因为,氨基的引入使得精细化学品功能的变化成为可能,例如氨基的引入可以使化合物的吸收和发射光谱红移,在染料生色基团的邻位引入氨基可以导致染料的颜色变化,氨基的引入可以改变染料的印染性能;更重要的是,和硝基化合物相比,胺类化合物毒性较小。目前,工业上大部分芳胺化合物都是经由芳香族硝基化合物还原制得,所以,硝基还原成氨基这一类反应在工业生产中有重要作用。通常,工业上的主要还原方法是铁粉还原、硫化碱还原和催化加氢还原法等。但这些方法存在工艺流程复杂、后处理麻烦、过程中产生诸多废弃物、制备费用高昂等缺点。近年来,用生物方法将硝基化合物还原成氨基化合物发展迅速,成为构建环境友好的绿色化学的方法之一。酶,又称为酵素,是具有生物催化功能的生物大分子,是一类生物催化剂。绝大多数酶都是蛋白质,其具有较好的生物相容性和环境友好性。酶催化可以看作是介于均相和非均相催化反应之间的一种催化,既具有一般催化剂的特征,也具有不同于一般催化剂的特殊性。相比于一般催化剂,酶催化剂具有诸多优点:1)酶促反应具有很高的效率;2)酶促反应具有高度的专一性;3)酶促反应较为温和;4)酶的种类的多样性,使得酶促反应的多样性;5) ...
【技术保护点】
1.一种检测硝基还原酶的荧光探针,其特征在于,所述荧光探针为3‑(4‑(2‑(4'‑(二苯胺基)‑3‑((4‑硝基苄基)氧基)‑[1,1'‑联苯基]‑4‑基)乙烯基)喹啉‑1‑溴)丙烷‑1‑磺酸盐,结构式如下:
【技术特征摘要】
1.一种检测硝基还原酶的荧光探针,其特征在于,所述荧光探针为3-(4-(2-(4'-(二苯胺基)-3-((4-硝基苄基)氧基)-[1,1'-联苯基]-4-基)乙烯基)喹啉-1-溴)丙烷-1-磺酸盐,结构式如下:2.制备权利要求1所述的一种检测硝基还原酶的荧光探针的方法,其特征在于,包括如下制备步骤:(1)将4'-(二苯基胺基)-3-羟基-[1,1'-联苯]-4-甲醛溶于二甲基亚砜中,将对硝基苄溴溶于四氢呋喃中,分别超声后混合在一起,并加入碳酸铯,控制反应温度为50-150℃,反应产物经分离纯化,得到黄色固体粉末4'-(二苯基胺基)-3-((4-硝基苄基)氧基)-[1,1'-联苯基]-4-甲醛;(2)将3-(4-甲基喹啉-1-溴)丙烷-1-磺酸盐溶于吡啶中,再加入乙酸,充分混合后加入步骤(1)所得到的4'-(二苯基胺基)-3-((4-硝基苄基)氧基)-[1,1'-联苯基]-4-甲醛,搅拌加热至25-80℃反应,反应产物经分离纯化,得到紫红色固体粉末3-(4-(2-(4'-(二苯胺基)-3-((4-硝基苄基)氧基)-[1,1'-联苯基]-4-基)乙烯基)喹啉-1-溴)丙烷-1-磺酸盐。3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)中所述的4'-(二苯基胺基)-3-羟基-[1,1'-联苯]-4-甲醛和对硝基苄溴用量的摩尔比为...
【专利技术属性】
技术研发人员:吴水珠,徐灵峰,倪凌,曾钫,
申请(专利权)人:华南理工大学,
类型:发明
国别省市:广东,44
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