基于液质联用法检测动物源性食品中亲水性胶体的方法技术

本发明专利技术提供一种基于液质联用法检测动物源性食品中亲水性胶体的方法，所述方法包括：比较待测样品溶液的液相色谱串联质谱信息与基质加标工作液的液相色谱串联质谱信息中定性离子的保留时间、定性离子的相对离子丰度以及允许的偏差，若满足规定则判定待测样品中存在亲水性胶体；其中，待测样品溶液的制备方法为向样品中加入去离子水均质，再加入硝酸于85℃下水解30min，水解液冷却后进行离心，取上清液用乙腈稀释；基质加标工作液的制备方法为向不含待测亲水性胶体的样品中加入已知浓度的待测亲水性胶体的水溶液，再进行与待测样品一样的前处理过程。本发明专利技术的方法能够更快速、准确地检测动物源性食品中的亲水性胶体。

Detection of Hydrophilic Colloids in Animal-derived Foods by LC-MS

The invention provides a method for detecting hydrophilic colloids in animal-derived food based on liquid chromatography-mass spectrometry. The method includes: comparing the liquid chromatography tandem mass spectrometry information of the sample solution to be tested with the liquid chromatography tandem mass spectrometry information of the working liquid of the matrix standard addition, the retention time of the qualitative ions, the relative ion abundance of the qualitative ions and the allowable deviation, and determining the pending if the stipulations are met. There are hydrophilic colloids in the sample; among them, the preparation method of the sample solution to be tested is adding deionized water homogeneity to the sample, adding nitric acid to hydrolyze at 85 C for 30 minutes, centrifuging the hydrolysate after cooling, and diluting the supernatant with acetonitrile; the preparation method of the matrix standard-adding working fluid is adding the known concentration of hydrophilic colloids to the sample without the hydrophilic colloids to be measured. The water solution is then pretreated in the same way as the sample to be tested. The method of the invention can detect hydrophilic colloids in animal-derived food more quickly and accurately.

【技术实现步骤摘要】
基于液质联用法检测动物源性食品中亲水性胶体的方法
本专利技术涉及食品检测领域，尤其涉及一种基于液质联用法检测动物源性食品中亲水性胶体的方法。
技术介绍
近年来，随着消费者对“注水肉”现象的日益警觉，不法商贩的注水手段也日益隐蔽，在给畜类及水产品体内注入的水中添加卡拉胶等具有保水作用的亲水性胶体，使得动物被宰杀后水分不易流失，在保水增重的同时还可使肉的颜色更为鲜艳，这一现象已成为全国消费者广泛关注的食品安全问题。注胶肉的出现不但会损害消费者的经济利益，还由于其容易滋生大量对人体有害的微生物，从而对人的健康造成伤害，严重侵犯了消费者的合法权益。但是，卡拉胶、魔芋胶、琼脂、瓜尔胶等也被用作增稠剂、胶凝剂、悬浮剂、乳化剂和稳定剂等而广泛应用于肉制品及水产制品的生产工艺中，目前我国对各种胶体的添加量没有限量值限定，并且没有标准的定量检测方法，不利于监管部门对市场中流通的肉制品及水产品的质量进行监管，因此建立准确、高效的卡拉胶、魔芋胶、琼脂及瓜尔胶的定量检测方法不论是对于生鲜产品还是肉制品的质量监管都具有重要的现实意义。目前，国内外开展的卡拉胶等胶体检测方法较少，主要包括近红外光谱技术与液相色谱串联质谱法等，其中近红外光谱法由于要对每类动物源性样本都进行大量的样本数据采集，在此基础上进行数学建模，因此使用难度较大，并且无法进行准确的定量检测；相比之下，液相色谱串联质谱法更具有普适性，但卡拉胶等胶体分子量普遍在几十万以上，液相色谱串联质谱法很难对其进行直接检测。故本专利技术旨在通过将胶体水解后，利用液相色谱串联质谱仪对特定分子量的小分子进行检测，从而提供一种针对动物源性食品中亲水性胶体快速、准确的检测方法。
技术实现思路
针对现有技术存在的问题，本专利技术提供一种基于液质联用法检测动物源性食品中亲水性胶体的方法。本专利技术提供一种基于液质联用法检测动物源性食品中亲水性胶体的方法，包括：比较待测样品溶液的液相色谱串联质谱信息与基质加标工作液的液相色谱串联质谱信息中定性离子的保留时间、定性离子的相对离子丰度以及允许的偏差，若定性离子的保留时间相对偏差在±2.5％以内，且满足下表规定，则判定待测样品中存在亲水性胶体；相对离子丰度/％>50>20～50>10～20≤10允许的相对偏差/％±20±25±30±50其中，所述待测样品溶液的制备方法为：向样品中加入去离子水均质，再加入硝酸于85℃下水解30min，水解液冷却后进行离心，取上清液用乙腈稀释；所述基质加标工作液的制备方法为：向不含待测亲水性胶体的样品中加入已知浓度的待测亲水性胶体的水溶液，再进行与待测样品一样的前处理过程。上述技术方案中，利用液质联用法即液相色谱串联质谱技术建立了一种检测动物源性食品中亲水性胶体的方法，该方法中将待测样品溶液与基质加标工作液的液相色谱串联质谱信息进行比对，而非现有技术中直接与亲水性胶体水解产物的液相色谱串联质谱信息进行比对，使检测结果更准确，排除水解程度不同对结果的影响；而且该方法中水解时间较短，可以快速地得出结果。因此，该方法能够更快速、准确地检测动物源性食品中的亲水性胶体，应用范围更广。进一步地，所述方法还包括：绘制基质标准曲线并对待测样品结果进行校正，外标法计算待测样品中亲水性胶体的含量。进一步地，所述绘制基质标准曲线具体为：以基质加标工作液中亲水性胶体的含量为横坐标，定量离子的峰面积为纵坐标进行绘制。上述技术方案中，以基质加标工作液为基准绘制基质标准曲线，能够进一步增进定量检测结果的准确性，为人们食用到安全食品提供保障。进一步地，所述动物源性食品包括畜肉、禽肉、水产品和加工肉制品。进一步地，所述亲水性胶体包括但不限于卡拉胶、魔芋胶、琼脂和瓜尔胶。进一步地，进行液相色谱串联质谱检测时，流动相A为纯水，流动相B为乙腈。进一步地，所述亲水性胶体为卡拉胶，母离子为403，定性离子为241，定量离子为97。进一步地，所述亲水性胶体为魔芋胶，母离子为539.2，定性离子为179.1，定量离子为160.8。进一步地，所述亲水性胶体为琼脂，母离子为325，定性离子为196.8，定量离子为182.9。本专利技术利用液质联用法建立了一种检测动物源性食品中亲水性胶体的方法，该方法中将待测样品溶液与基质加标工作液的液相色谱串联质谱信息进行比对，而非现有技术中直接与亲水性胶体水解产物的液相色谱串联质谱信息进行比对，使检测结果更准确，排除水解程度不同对结果的影响；而且该方法中水解时间较短，可以快速地得出结论。因此，该方法能够更快速、准确地检测动物源性食品中的亲水性胶体，应用范围更广，为人们食用到安全食品提供保障。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1为卡拉胶水解产物MRM质谱图；图2为魔芋胶水解产物MRM质谱图；图3为琼脂水解产物MRM质谱图。具体实施方式为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例1本实施例提供一种基于液质联用法检测香肠中卡拉胶的方法，具体包括以下步骤：(1)配制标准溶液：取卡拉胶0.1g，用水溶解后，转移至100mL容量瓶中，用水定容至刻度，得浓度为1.0mg/mL的标准溶液；(2)制备基质加标工作液：分别称取5份不含卡拉胶的空白基质香肠样品(每份5g)于离心管中，分别加入0.25mL、0.5mL、1.0mL、2.5mL、5mL的标准溶液，再每份加入去离子水使液体总体积为23mL，均质后加入2mL硝酸(优级纯)，涡旋1min，置于85℃水浴30min进行水解，水解液冷却至室温后以12000r/min离心5min，取上清液与乙腈1:1稀释后，过滤膜(有机相0.22μm)，得基质加标工作液；另外，不添加标准溶液，以相同方法制备一份空白基质工作液；(3)样品前处理：分别称取3份待测香肠样品(每份5g)于离心管中，每份加入23mL去离子水均质，再加入2mL硝酸(优级纯)，涡旋1min，置于85℃水浴30min进行水解，水解液冷却至室温后以12000r/min离心5min，取上清液与乙腈1:20稀释后(由于上机浓度过大，故在此步骤增大稀释倍数)，过滤膜(有机相0.22μm)，得样品待测液；(4)液相色谱串联质谱检测：检测条件：负离子模式，离子源温度为300℃，毛细管电压为-3500V，喷雾器流量为9L/min，雾化器压力为40psi；流动相A为一级水，流动相B为乙腈，流动相梯度：0-3min，流动相A的体积分数为20％，流动相B的体积分数为80％；3.01-5min，流动相A的体积分数为80％，流动相B的体积分数为20％；5.01-5.5min，流动相A的体积分数为20％，流动相B的体积分数为80％；流动相流速为0.4mL/min，进样体积为5μL，色谱柱本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于液质联用法检测动物源性食品中亲水性胶体的方法，其特征在于，包括：比较待测样品溶液的液相色谱串联质谱信息与基质加标工作液的液相色谱串联质谱信息中定性离子的保留时间、定性离子的相对离子丰度以及允许的偏差，若定性离子的保留时间相对偏差在±2.5％以内，且满足下表规定，则判定待测样品中存在亲水性胶体；

【技术特征摘要】
1.一种基于液质联用法检测动物源性食品中亲水性胶体的方法，其特征在于，包括：比较待测样品溶液的液相色谱串联质谱信息与基质加标工作液的液相色谱串联质谱信息中定性离子的保留时间、定性离子的相对离子丰度以及允许的偏差，若定性离子的保留时间相对偏差在±2.5％以内，且满足下表规定，则判定待测样品中存在亲水性胶体；相对离子丰度/％>50>20～50>10～20≤10允许的相对偏差/％±20±25±30±50其中，所述待测样品溶液的制备方法为：向样品中加入去离子水均质，再加入硝酸于85℃下水解30min，水解液冷却后进行离心，取上清液用乙腈稀释；所述基质加标工作液的制备方法为：向不含待测亲水性胶体的样品中加入已知浓度的待测亲水性胶体的水溶液，再进行与待测样品一样的前处理过程。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括：绘制基质标准曲线并对待测样品结果进行校正，外标法计算待测样品中亲水性胶体的含量。3...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵文涛，李莹莹，李志刚，王守伟，郭文萍，李石磊，张颖颖，马燕红，陈超，任南，尹燕亭，
申请(专利权)人：中国肉类食品综合研究中心，
类型：发明
国别省市：北京,11