The present invention provides a SNAP tag protein label fluorescent probe with specific fast labeling ability. The fluorescent probe takes 4-amino-1,8-naphthalimide as fluorescent group and benzyloxy group as binding site. The structure of the fluorescent probe is shown in formula (1). The probe is derived from environmental sensitive fluorescent group naphthalimide and can react specifically with SNAP tag protein and fluorescence after reaction. Strength increased 12 times. In the fluorescence enhanced SNAP-tag fluorescent probe, the reaction rate reached 14436+1189M.
【技术实现步骤摘要】
具有特异快速标记能力的SNAP-tag蛋白标签荧光探针
本专利技术属荧光成像
，特别涉及一种具有特异快速标记能力的SNAP-tag蛋白标签荧光探针。
技术介绍
荧光成像技术已经逐渐成为在细胞层次到个体水平研究蛋白质功能的强有力工具。由于具有尺寸小、荧光发射光谱宽泛、可选择荧光颜色多样等优点，在蛋白标记领域有机小分子荧光染料逐渐成为荧光蛋白的替代者。但是有机小分子染料是外源物种，存在的问题是不能够像荧光蛋白一样由细胞源生，所以无法控制在细胞中的数量以及细胞中的位置。为了解决这个问题，化学家发展了多种生物正交的方法将小分子染料共价连接到目标蛋白上，从而可以进一步跟踪研究目标蛋白的位置和功能。其中，目前应用最广泛的是蛋白标签技术，该技术通过遗传编码的方法首先将标签蛋白融合到目标蛋白上，然后这种蛋白标签与荧光底物发生专一的酶促共价连接反应，从而实现将小分子荧光染料连接到目标蛋白的目的。利用蛋白标签技术实现活细胞蛋白成像时，荧光底物需要满足多种性能要求，至少包括荧光底物具有良好的细胞透膜性、与蛋白标签意外的生物大分子无结合，与蛋白标签反应快、蛋白标记前后荧光有明显变化...
【技术保护点】
1.一种具有特异快速标记能力的SNAP‑tag蛋白标签荧光探针，其特征在于：该荧光探针以4‐氨基‐1,8‐萘酰亚胺为荧光基团，苄氧基为结合位点，该荧光探针具有如下结构：
【技术特征摘要】
1.一种具有特异快速标记能力的SNAP-tag蛋白标签荧光探针，其特征在于：该荧光探针以4‐氨基‐1,8‐萘酰亚胺为荧光基团，苄氧基为结合位点，该荧光探针具有如下结构：2.如权利要求1所述的一种具有特异快速标记能力的SNAP-tag蛋白标签荧光探针，其特征在于：该荧光探针与SNAP-tag蛋白标签标记速率达到了14436±1189M-1s-1，是目前报道的荧光增强型SNAP-tag荧光探针中标记速度最快的；该荧光探针与SNAP-tag蛋白标签反应后荧光明显增强12倍，满足活细胞免洗荧光成像的要求，实现对活细胞中细胞核和线粒体蛋白的荧光成像。3.一种如权利要求1所述的具有特异快速标记能力的SNAP-tag蛋白标签荧光探针的合成方法，其特征在于包含步骤如下：(1)中间体4-氨基基-N-(4-羟甲基苄基)1,8-萘酰亚胺的合成：将4-溴-N-(4-羟甲基苄基)1,8-萘酰亚胺溶于N,N-二甲基甲酰胺，向其中滴加叠氮化钠的水溶液，在90-110℃下搅拌6-10h；反应结束后，将...
【专利技术属性】
技术研发人员：徐兆超，乔庆龙，苗露，尹文婷，
申请(专利权)人：中国科学院大连化学物理研究所，
类型：发明
国别省市：辽宁,21
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