一种生产脂肽的枯草芽孢杆菌基因工程菌及其构建方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种生产脂肽的枯草芽孢杆菌基因工程菌及其构建方法和应用。本发明专利技术利用枯草芽孢杆菌脂肽表面活性剂合成关键操纵子srfA基因和大肠杆菌‑枯草芽孢杆菌穿梭质粒构建可生产脂肽的枯草芽孢杆菌基因工程菌，并将其应用在枯草芽孢杆菌工程菌发酵生产脂肽表面活性剂中，从而获得高浓度枯草芽孢杆菌脂肽表面活性剂。构建的基因工程菌发酵生产脂肽表面活性剂产量最高可达3.78g/L，与原始菌株发酵结果对比，产量提高了47.7％。

【技术实现步骤摘要】
一种生产脂肽的枯草芽孢杆菌基因工程菌及其构建方法和应用
本专利技术属于生物基因工程
，涉及一种生产脂肽的枯草芽孢杆菌基因工程菌及其构建方法和应用。
技术介绍
枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)是一种应用于绿色生物制品生产的革兰氏阳性菌，能够分泌多种具有潜在生物医药和工业利用价值的低分子量抗菌肽和生物表面活性物质，比如通过非核糖体途径合成的低分子量抗菌脂肽表面活性剂(surfactin)、伊枯草菌素(iturin)、芬枯草菌(fengycin)等；通过核糖体途径合成的细菌素(TasA)等。近年来，随着基因工程技术的广泛应用，B.subtilis抗菌活性物质的生物合成机制也得到了深入的研究。在所有的B.subtilis分泌的抗菌物质中，抗菌脂肽是研究较多的。脂肽生物表面活性剂主要来源于芽孢杆菌、链霉菌、假单胞菌、沙雷氏菌属、曲霉菌和游动放线菌的菌属。脂肽通常是由β-氨基或β-羟基脂肪酸与肽链或肽环构成的一类生物表面活性剂，从结构上可以分为线性脂肽和环状脂肽，其中应用最多的是环状脂肽，包括脂肪酸接环环状脂肽、脂肪酸成环环状脂肽和脂肪酸离环环状脂肽，主要有surfacti本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种重组质粒，其特征在于，含有srfA基因和硫氧还蛋白A基因，能够在枯草芽孢杆菌中表达。

【技术特征摘要】
1.一种重组质粒，其特征在于，含有srfA基因和硫氧还蛋白A基因，能够在枯草芽孢杆菌中表达。2.根据权利要求1所述的重组质粒，其特征在于，所述srfA基因的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示，或与SEQIDNO.1所示序列具有90％以上同源性且表达相同功能蛋白质。3.根据权利要求1所述的重组质粒，其特征在于，含有乳糖操纵子，srfA基因和硫氧还蛋白基因受乳糖操纵子的调控表达。4.根据权利要求3所述的重组质粒，其特征在于，原始质粒载体为大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭质粒。5.一种生产脂肽的枯草芽孢杆菌基因工程菌，其特征在于，含有权利要求1～4任一项所述的重组质粒。6.根据权利要求5所述的生产脂肽的枯草芽孢杆菌基因工程菌，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：史莹飞，文昌，卡尔·汉斯，乔伊·马克斯，
申请(专利权)人：江苏龙蟠科技股份有限公司，龙蟠润滑新材料天津有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32