一种基于生物条形码与滚环扩增技术检测T-2毒素的试剂盒及方法技术

本发明专利技术属于食品安全检测及免疫竞争技术领域，涉及一种基于生物条形码与滚环扩增技术检测T‑2毒素的试剂盒及方法。该试剂盒包括以下组分：(1)磁珠；(2)抗T‑2单克隆抗体；(3)抗T‑2抗原；(4)金纳米粒子；(5)捕获DNA，能够与金纳米粒子形成共价连接；(6)条形码DNA；(7)环状DNA；(8)引物DNA，与环状DNA两端互补配对；其中，所述捕获DNA中的至少一部分与条形码DNA中的至少一部分互补配对；所述条形码DNA与环状DNA中的至少一部分相同。利用该试剂盒和方法能够高灵敏的检测T‑2毒素。

【技术实现步骤摘要】
一种基于生物条形码与滚环扩增技术检测T-2毒素的试剂盒及方法
本专利技术属于食品安全检测及免疫竞争
，更具体地，涉及一种基于生物条形码与滚环扩增技术检测T-2毒素试剂盒及基于生物条形码与滚环扩增技术检测T-2毒素的方法。
技术介绍
T-2毒素是由镰刀菌病原体产生的霉菌毒素，霉菌样小分子毒素也是自然界中污染最严重的天然毒素之一，主要存在于发霉的玉米，大麦，小麦，大豆和其他谷类作物和食品中。这些产品对人类健康和畜牧业发展构成极大的威胁。1973年，在日内瓦的联合国粮食及农业组织(粮农组织)和世界卫生组织(卫生组织)的联合会议上，这些毒素如黄曲霉毒素被列为食品污染最天然的来源。T-2毒素对人和动物消化系统，神经系统，生殖器真皮有毒，并且是致畸和致癌的。此外，T-2毒素还增加食物中毒，大骨病，DNA损伤和诱导细胞凋亡的风险。近年来，研究人员发现食管癌，地方性肾病，食物中毒性白血球减少症(ATA)，克山病和大骨节病可能与单端孢菌毒素污染密切相关。目前我国国家标准中T-2毒素的检测方法主要采用免疫亲和层析纯化高效液相色谱法和酶联免疫吸附法。同时，国外已有竞争性免疫测定法，包括荧光偏振，基于本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于生物条形码与滚环扩增技术检测T‑2毒素的试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括以下组分：(1)磁珠；(2)抗T‑2单克隆抗体；(3)抗T‑2抗原；(4)金纳米粒子；(5)捕获DNA，能够与金纳米粒子形成共价连接；(6)条形码DNA；(7)环状DNA；(8)引物DNA，与环状DNA两端互补配对；其中，所述捕获DNA中的至少一部分与条形码DNA中的至少一部分互补配对；所述条形码DNA与环状DNA中的至少一部分相同。

【技术特征摘要】
1.一种基于生物条形码与滚环扩增技术检测T-2毒素的试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括以下组分：(1)磁珠；(2)抗T-2单克隆抗体；(3)抗T-2抗原；(4)金纳米粒子；(5)捕获DNA，能够与金纳米粒子形成共价连接；(6)条形码DNA；(7)环状DNA；(8)引物DNA，与环状DNA两端互补配对；其中，所述捕获DNA中的至少一部分与条形码DNA中的至少一部分互补配对；所述条形码DNA与环状DNA中的至少一部分相同。2.根据权利要求1所述的试剂盒，其中，所述捕获DNA具有SEQIDNO：1所示的碱基序列，并且，5’端修饰有-SH基团；所述条形码DNA具有SEQIDNO：2所示的碱基序列。3.根据权利要求1所述的试剂盒，其中，所述环状DNA的长度为75-85bp，优选具有SEQIDNO：3所示的碱基序列，且5’端修饰有磷酸基团；所述引物DNA具有SEQIDNO：4所示的碱基序列。4.根据权利要求1所述的试剂盒，其中，所述磁珠的直径为2.5-3.0μm，所述金纳米粒子的直径为13-15nm。5.根据权利要求1所述的试剂盒，其中，所述磁珠和所述抗T-2抗原以磁珠偶联抗T-2抗原的形式提供。6.一种基于生物条形码与滚环扩增技术检测T-2毒素的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：(1)获取磁珠偶联抗T-2抗原；(2)获取金纳米粒子检测探针：所述金纳米粒子检测探针包括金纳米粒子、与所述金纳米粒子连接的抗T-2单克隆抗体以及与所述金纳米粒子连接的双链DNA；所述双链DNA包括捕获DNA和条形码DNA，所述捕获DNA与金纳米粒子共价连接；所述捕获DNA中的至少一部分与条形码DNA中的至少一部分互补配对；所述条...

【专利技术属性】
技术研发人员：王江，高志贤，宁保安，白家磊，李双，彭媛，张曼，
申请(专利权)人：军事科学院军事医学研究院环境医学与作业医学研究所，
类型：发明
国别省市：天津,12