利用滚环扩增放大和光散射技术的核酸检测方法技术

技术编号:10396318 阅读:320 留言:0更新日期:2014-09-07 16:36
本发明专利技术涉及一种利用滚环扩增放大和光散射技术的核酸检测方法,根据待测核酸链的序列设计成环DNA的序列,在酶的作用下,成环DNA连接成封闭环状DNA,加入扩增酶及其他扩增混合物后,在一定条件下,核酸链会以环状DNA为扩增模板进行滚环扩增,扩增所得产物为长单链DNA,溶液中核酸链的浓度将决定产物长单链DNA的浓度,以及产物溶液的光散射强度。可利用琼脂糖电泳以及原子力显微镜对产物长单链DNA进行表征和观察,此技术可实现均相溶液中目标链及单碱基错配的目标链的一步检测,可用于分子生物学和医学诊断的相关分析领域。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种利用滚环扩增和光散射技术进行核酸检测的方法,其特征在于,根据待测核酸链的序列设计成环DNA的序列,在酶的作用下,成环DNA连接成封闭环状DNA,加入扩增酶及其他扩增混合物后,在一定条件下,核酸链会以环状DNA为扩增模板进行滚环扩增,扩增所得产物为长单链DNA,溶液中核酸链的浓度将决定产物长单链DNA的浓度,以及产物溶液的光散射强度,从而可利用产物的光散射强度变化检测溶液中待测核酸链的浓度;利用琼脂糖电泳以及原子力显微镜对产物长单链DNA进行表征和观察,实现均相溶液中目标链及单碱基错配的目标链的一步检测;所述的待测核酸为碱基数为10‑20bp的DNA、RNA、mRNA、aptamer序列;所述的成环DNA序列为碱基数为60‑210个碱基、 5,端磷酸化修饰的一段DNA序列。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:何丹农颜娟胡冲娅
申请(专利权)人:上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司
类型:发明
国别省市:上海;31

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