一种富微量元素低氘水提取小分子菌菇多糖的方法技术

本发明专利技术提供了一种富微量元素低氘水提取小分子菌菇多糖的方法，利用冰川水低氘的特性，作为提取溶剂，由于冰川水富含微量元素，有利于菌菇多糖的溶解和提取。提取过程中，加热低氘水，配合微波提取，有利于提高多糖的提取效率，多糖的提取率更高。在提取后，先反复冻融，除去蛋白质和其他杂质，再利用胰蛋白酶进一步除去蛋白质，提高多糖的获得率，而且，最后醇沉降一次，即可高效率的除去蛋白质。最后，加入三氟乙酸，将菌菇多糖切割为小分子多糖，有利于人体吸收，提高其保健价值。具有抑制癌细胞，降血脂、降血糖等作用。与现有技术相比，本发明专利技术提供的方法，多糖提取率高，杂质少，而且，多糖分子小，有利于人体吸收。

A Method for Extracting Polysaccharide from Mushroom with Microelement Rich and Low Deuterium Water

The invention provides a method for extracting small molecular mushroom polysaccharides from low-deuterium water rich in trace elements. The low-deuterium characteristic of glacial water is used as extracting solvent. Because glacial water is rich in trace elements, it is beneficial to the dissolution and extraction of mushroom polysaccharides. In the extraction process, heating low deuterium water and microwave assisted extraction can improve the extraction efficiency of polysaccharides, and the extraction rate of polysaccharides is higher. After extraction, the protein and other impurities were removed by repeated freezing and thawing, and then the protein was further removed by trypsinase to improve the yield of polysaccharides. Moreover, the protein could be efficiently removed by alcohol precipitation once at last. Finally, adding trifluoroacetic acid, the mushroom polysaccharide was cut into small molecular polysaccharides, which was conducive to human absorption and improved its health value. It can inhibit cancer cells, reduce blood lipid and blood sugar. Compared with the prior art, the method provided by the invention has the advantages of high extraction rate of polysaccharide, less impurities, and small polysaccharide molecule, which is beneficial to human absorption.

【技术实现步骤摘要】
一种富微量元素低氘水提取小分子菌菇多糖的方法
本专利技术属于菌菇多糖的提取领域，具体涉及一种富微量元素低氘水提取小分子菌菇多糖的方法。
技术介绍
自然界里存在的水一般由2个氢原子和1个氧原子组成，但氢原子有质量不同的3个同位素，原子量分别为1，2，3的氢(H)、氘(D,重氢)、氚(超重氢)。氘含量较低的为低氘水。自然界的水中，重氢的含量约为150ppm，天然低氘水(冰川水)的氘含量在130ppm-145ppm之间。由D代替H结合的水就是重水。地球上一切自然水体中都含有氢的同位素氘，氘会抑制细胞的生长，使DNA遗传信息产生扭曲或断裂，进入生命体后很难代谢出去。高含量的氘对生命体的代谢、遗传、酶素等都有不良影响，是一种导致生物衰老、病变、癌变及至死亡。国内外研究表明，低氘水对人体健康有诸多好处，更有益于生命体的生存和繁衍，对于人类的健康具有重要意义。氘对生命体的生存和繁衍有害，而含氘量偏低的低氘水，具有特殊的分子结构，分子因直径比普通水小一半，进入生命体后具有吸收快、渗透力高、溶解力强的特点，能有效代谢生命体的物质，吸纳有益营养，排除有害物质。这些情况对动物如此，对植物如此，对人类也是如此。因此，含氘量偏高的重水被称做“死亡之水”，而含氘量较低的低氘水则被称做“生命之水”。菌菇多糖是提高人体免疫力的首先营养品。其有较强的抗癌活性，尤其是胃癌和腹水癌，能抑制肿瘤细胞的生长，对致癌物质有吸收、排泄的作用；能降血糖、血脂、胆固醇，改善糖尿病和动脉硬化。大分子的菌菇多糖分子量大，还含有可溶性纤维素等，人体难吸收，消化利用率低。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种富微量元素低氘水提取小分子菌菇多糖的方法，利用低氘水作为提取剂，利用微波提取的方法，经过分解、去除杂质后，得到小分子菌菇多糖，多糖提取率高，杂质少，保健价值更高，更容易被人体吸收。本专利技术具体技术方案如下：本专利技术提供的一种富微量元素低氘水提取小分子菌菇多糖的方法，包括以下步骤：1)将菌菇切碎过筛后，置于低氘水中浸泡，然后加热至85-95℃，微波提取；2)将步骤1)提取体系离心，收集提取液，反复冻融，离心后，收集上层清液；3)向步骤2)得到的上层清液中加入碳酸氢钠，调节pH至6-7，然后，加入胰蛋白酶，水浴加热至35-37℃，反应0.5-1h；然后加热使酶失活，离心，过滤，收集滤液，得到多糖粗提取液；4)将步骤3)制备的多糖粗提取液减压浓缩后，加入无水乙醇沉降，离心，过滤，收集沉淀；5)沉淀加入低氘水溶解后，加入三氟乙酸，加热水解，40-60℃真空回收三氟乙酸，得到小分子多糖提取液；6)将小分子多糖提取液浓缩，真空干燥，得小分子菌菇多糖。进一步的，步骤1)中所述过筛是指过80-200目筛。步骤1)中所述菌菇选自灵芝、猴头菇或香菇。步骤1)中所述浸泡是指置于10-15倍低氘水中浸泡2-5h；步骤1)中所述微波提取，是指微波功率400-500W条件下，微波提取1-2h。步骤1)所述低氘水选自冰川水，或者，将冰川水利用公开号101481088A，申请号为200910046130.8，申请名称为“一种超轻水的制备装置及超轻水的制备方法”公开的方法制备得2-60ppm的低氘水。步骤2)中所述反复冻融是指：收集提取液后，待提取液冷却至室温后，置于-18～-20℃条件下冷冻4-8h后，置于室温下溶解，然后离心，收集上层清液，再置于-18～-20℃条件下冷冻4-8h后，置于室温下溶解，然后离心，收集上层清液，重复3-5次。步骤3)中胰蛋白酶的加入量为上清液质量的3-8％。步骤3)中所述加热使酶失活是指加热至90-95℃，保温1-2h。步骤4)中所述减压浓缩是指浓缩至原来体积的1/4-1/3。步骤4)中所述加入无水乙醇沉降具体为：加入浓缩液体积2-5倍的乙醇，静置4-8h，离心，收集沉淀。步骤5)所述低氘水选自冰川水，或者，将冰川水利用公开号101481088A，申请号为200910046130.8，申请名称为“一种超轻水的制备装置及超轻水的制备方法”公开的方法制备得2-60ppm的低氘水。步骤5)中沉淀加入5-10倍质量的低氘水溶解。步骤5)中三氟乙酸的用量为处理的溶液的质量的1-2％。步骤5)中所述加热水解是指加热至80-95℃条件下，水解15-25min。本专利技术中，利用冰川水低氘的特性，作为提取溶剂，或者，利用冰川水制备氘含量更低的低氘水，由于冰川水富含微量元素，有利于菌菇多糖的溶解和提取。提取过程中，加热低氘水，配合微波提取，有利于提高多糖的提取效率，多糖的提取率更高。在提取后，先反复冻融，除去蛋白质和其他杂质，再利用胰蛋白酶进一步除去蛋白质，提高多糖的获得率，而且，最后醇沉降一次，即可高效率的除去蛋白质。最后，加入三氟乙酸，将菌菇多糖切割为小分子多糖，有利于人体吸收，提高其保健价值。具有抑制癌细胞，降血脂、降血糖等作用。与现有技术相比，本专利技术提供的方法，多糖提取率高，杂质少，而且，多糖分子小，有利于人体吸收。具体实施方式实施例1一种富微量元素低氘水提取小分子菌菇多糖的方法，包括以下步骤：1)将干香菇切碎过100目筛后，置于12倍质量的冰川水(低氘水)中浸泡5h，然后加热至90℃，微波功率500W条件下，微波提取1h。2)将步骤1)提取体系离心，收集提取液，置于-18℃条件下冷冻8h后，置于室温下溶解，然后离心，收集上层清液，再置于-18℃条件下冷冻6h后，置于室温下溶解，然后离心，收集上层清液，再置于-18℃条件下冷冻4h后，置于室温下溶解，然后离心，收集上层清液，；3)向步骤2)得到的上层清液中加入碳酸氢钠，调节pH至7，然后，加入上清液质量的4％的胰蛋白酶，水浴加热至37℃，反应0.6h；然后加热至92℃，保温1.5h使酶失活，离心，过滤，收集滤液，得到多糖粗提取液；4)将步骤3)制备的多糖粗提取液减压浓缩至原来体积的1/3后，加入浓缩液体积3倍的乙醇沉降，静置8h，离心，过滤，收集沉淀；5)沉淀加入8倍质量的冰川水溶解后，加入溶液质量1.5％的三氟乙酸，85℃条件下加热水解20min，60℃真空回收三氟乙酸，得到小分子多糖提取液；6)将小分子多糖提取液浓缩，真空干燥，得小分子菌菇多糖。香菇多糖提取率19.23％。实施例2利用冰川水，按照公开号101481088A，申请号为200910046130.8，申请名称为“一种超轻水的制备装置及超轻水的制备方法”公开的方法制备得氘丰度35ppm的低氘水。一种富微量元素低氘水提取小分子菌菇多糖的方法，包括以下步骤：1)将干香菇切碎过200目筛后，置于12倍质量的氘丰度35ppm的低氘水中浸泡4h，然后加热至95℃，微波功率450W条件下，微波提取2h。2)将步骤1)提取体系离心，收集提取液，置于-20℃条件下冷冻5h后，置于室温下溶解，然后离心，收集上层清液，再置于-20℃条件下冷冻6h后，置于室温下溶解，然后离心，收集上层清液，再置于-20℃条件下冷冻4h后，置于室温下溶解，然后离心，收集上层清液，再置于-20℃条件下冷冻6h后，置于室温下溶解，然后离心，收集上层清液，最后，再置于-20℃条件下冷冻6h后，置于室温下溶解，然后离心，收集上层清液；3)向步骤2)得到的上层清液中加入碳酸氢钠，调节pH至7，然后，加入本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种富微量元素低氘水提取小分子菌菇多糖的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：1)将菌菇切碎过筛后，置于低氘水中浸泡，然后加热至85‑95℃，微波提取；2)将步骤1)提取体系离心，收集提取液，反复冻融，离心后，收集上层清液；3)向步骤2)得到的上层清液中加入碳酸氢钠，调节pH至6‑7，然后，加入胰蛋白酶，水浴加热至35‑37℃，反应0.5‑1h；然后加热使酶失活，离心，过滤，收集滤液，得到多糖粗提取液；4)将步骤3)制备的多糖粗提取液减压浓缩后，加入无水乙醇沉降，离心，过滤，收集沉淀；5)沉淀加入低氘水溶解后，加入三氟乙酸，加热水解，40‑60℃真空回收三氟乙酸，得到小分子多糖提取液；6)将小分子多糖提取液浓缩，真空干燥，得小分子菌菇多糖。

【技术特征摘要】
1.一种富微量元素低氘水提取小分子菌菇多糖的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：1)将菌菇切碎过筛后，置于低氘水中浸泡，然后加热至85-95℃，微波提取；2)将步骤1)提取体系离心，收集提取液，反复冻融，离心后，收集上层清液；3)向步骤2)得到的上层清液中加入碳酸氢钠，调节pH至6-7，然后，加入胰蛋白酶，水浴加热至35-37℃，反应0.5-1h；然后加热使酶失活，离心，过滤，收集滤液，得到多糖粗提取液；4)将步骤3)制备的多糖粗提取液减压浓缩后，加入无水乙醇沉降，离心，过滤，收集沉淀；5)沉淀加入低氘水溶解后，加入三氟乙酸，加热水解，40-60℃真空回收三氟乙酸，得到小分子多糖提取液；6)将小分子多糖提取液浓缩，真空干燥，得小分子菌菇多糖。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)中所述菌菇选自灵芝、猴头菇或香菇。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)中所述浸泡是指置于10-15倍低氘水中浸泡2-5h。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)...

【专利技术属性】
技术研发人员：张斌，徐伟，凌中鑫，
申请(专利权)人：安徽国科生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：安徽,34