The invention relates to the technical field of cell differentiation, in particular to a serum-free medium for improving the transformation of monocytes into multipotential cells, including inorganic salts, organic compounds, amino acids, amino acid salts, plant lectins, insulin, carbon sources, growth factors, vitamins and antioxidants, proteins, trace elements and indicators of pH value. The present invention provides a serum-free medium for improving the transformation of monocytes into multi-potential cells. Under the induction of various skin growth factors, the serum-free medium can improve the transformation of monocytes into multi-potential cells such as vascular endothelial cells, which provides experimental data and theoretical basis for more rational clinical use of monocytes for treatment.
【技术实现步骤摘要】
一种提高单核细胞向多潜能细胞转化的无血清培养基
本专利技术涉及细胞的诱导分化
,特别涉及一种提高单核细胞向多潜能细胞转化的无血清培养基。
技术介绍
传统的观点认为,单核细胞仅是吞噬细胞的前体细胞,在体内不同环境下能分化为巨噬细胞、树突状细胞、Kupffer细胞、小胶质细胞。但近几年的研究发现,单核细胞经诱导具有多向性的分化潜能。比如现在研究较多的有单核细胞向淋巴管内皮细胞转分化潜能的,在生长因子在内的多种因子诱导下,单核细胞能够转化成血管内皮细胞,比如采用Ficoll密度梯度离心法分离成人新鲜外周血单核细胞,用细胞培养基培养,然后分别用纤维连接蛋白、肿瘤坏死因子α诱导24h。但是目前的单核细胞向多潜能细胞转化率较低。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种提高单核细胞向多潜能细胞转化的无血清培养基,通过该培养基,将提高单核细胞诱导分化为成熟多潜能细胞。本专利技术的目的可以通过以下技术方案来实现:一种提高单核细胞向多潜能细胞转化的无血清培养基,包括以下物质:无机盐、有机物、氨基酸、氨基酸盐、植物凝集素、胰岛素、碳源、细胞生长因子、维生素及抗氧化剂、蛋白质、微量元素和pH值的指示剂。其中,所述的无机盐包括的各物质的浓度为,2000-3000mg/L的CaCl2,3000-4000mg/L的MgSO4,500-800mg/L的KCl,150-200mg/L的NaHCO3,1500-2000mg/L的NaCl,500-800mg/L的MgCl2,400-600mg/L的NaH2PO4,0.01-0.03mg/L的CoCl2-6H2O,0.01-0.02mg/L ...
【技术保护点】
1.一种提高单核细胞向多潜能细胞转化的无血清培养基,其特征在于,包括以下物质:无机盐、有机物、氨基酸、氨基酸盐、植物凝集素、胰岛素、碳源、细胞生长因子、维生素及抗氧化剂、蛋白质、微量元素和pH值的指示剂。
【技术特征摘要】
1.一种提高单核细胞向多潜能细胞转化的无血清培养基,其特征在于,包括以下物质:无机盐、有机物、氨基酸、氨基酸盐、植物凝集素、胰岛素、碳源、细胞生长因子、维生素及抗氧化剂、蛋白质、微量元素和pH值的指示剂。2.根据权利要求1所述的一种提高单核细胞向多潜能细胞转化的无血清培养基,其特征在于,所述的无机盐包括的各物质的浓度为,2000-3000mg/L的CaCl2,3000-4000mg/L的MgSO4,500-800mg/L的KCl,150-200mg/L的NaHCO3,1500-2000mg/L的NaCl,500-800mg/L的MgCl2,400-600mg/L的NaH2PO4,0.01-0.03mg/L的CoCl2-6H2O,0.01-0.02mg/L的MnCl2-4H2O,0.02-0.20mg/L的ZnCl2。3.根据权利要求1所述的一种提高单核细胞向多潜能细胞转化的无血清培养基,其特征在于,所述的有机物包括的各物质的浓度为,50-90mg/L的4-丁二胺二盐酸盐、200-400mg/L的盐酸吡哆醛、4000-6000mg/L的丙酮酸钠。4.根据权利要求1所述的一种提高单核细胞向多潜能细胞转化的无血清培养基,其特征在于,所述的氨基酸包括的各物质的浓度为,氨基酸包括的各物质的浓度为,100-300mg/L的L-丝氨酸,100-150mg/L的甘氨酸,100-150mg/L的L-色氨酸,160-260mg/L的胱氨酸,180-220mg/L的L-羟脯氨酸,200-300mg/L的L-谷氨酸,200-600mg/L的L-苏氨酸,300-400mg/L的L-酪氨酸,300-500mg/L的L-天门冬氨酸,300-500mg/L的L-异亮氨酸,300-600mg/L的L-蛋氨酸,400-600mg/L的L-丙氨酸,400-700mg/L的组氨酸,450-600mg/L的L-谷氨酰胺,700-1000mg/L的L-亮氨酸,900-1200mg/L的L-脯氨酸,1000-1500mg/L的缬氨酸,1200-1800mg/L的赖氨酸,1200-1800mg/L的精氨酸,1800-3200mg/L的L-天门冬酰胺,2500-3000mg/L的L-苯丙氨酸;所述的氨基酸盐包括的各物质的浓度为,300-400mg/L的L-赖氨酸盐酸盐、300-500mg/L的L-胱氨酸盐酸盐、300-500mg/L的L-半胱氨酸盐酸盐、700-900mg/L的L-精氨酸盐酸盐、700-1000mg/L的L-酪氨酸盐酸盐,1000-1500mg/L的L-组氨酸盐酸盐。5.根据权利要求1所述的一种提高单核细胞向多潜能细胞转化的无血清培养基,其特征在于,植物凝集素的浓度为10-20mg/L,植物凝集素由以下方法制备所得,在45-50℃温度下,将豆类的种子粉碎到100目过筛,粉碎后的粉末加入浸泡液中,浸泡液为质量浓度1%的氯化钠水溶液,或pH=6.5-7.2的磷酸缓冲盐溶液,料水比例为1∶5;浸泡过程中还施加超声波进行辅助提取,声强为20-40W/cm2;或者施加微波进行辅助提取,微波强度为10-20W/...
【专利技术属性】
技术研发人员:马亚东,黄宗堂,曹娜,
申请(专利权)人:丰泽康生物医药深圳有限公司,
类型:发明
国别省市:广东,44
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