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一种非柱状上皮干细胞培养基及培养方法技术

技术编号:19875045 阅读:42 留言:0更新日期:2018-12-22 16:45
本发明专利技术公开了一种非柱状上皮干细胞培养基,包含以下组分:cFAD培养液、TGFβ通路抑制剂和ROCK抑制剂。本发明专利技术还公开了利用所述培养基进行非柱状上皮干细胞培养的方法。本发明专利技术所述非柱状上皮干细胞培养基突破现有技术瓶颈,使得长时间单克隆培养成为可能,能够支持层状/假层状/移型上皮等多种非柱状上皮干细胞在体外分离后以细胞池或单细胞形式高效地、稳定地扩增,是实现干细胞病理缺陷鉴定及进行后续功能修复的技术前提,可服务于细胞精准医疗产品的开发和制备。

【技术实现步骤摘要】
一种非柱状上皮干细胞培养基及培养方法
本专利技术属于干细胞培养
,具体涉及一种非柱状上皮干细胞培养基及培养方法。
技术介绍
干细胞研究是再生医学发展的重要基础和核心推动力。胚胎干细胞、诱导性干细胞和组织成体干细胞是干细胞研究领域的三大分支。凭借细胞安全性高、易于获取的显著优势,组织成体干细胞越来越多的受到干细胞医学行业的关注。组织成体干细胞进一步下分为间充质干细胞与上皮组织干细胞两大类。其中来源于骨髓、脂肪、脐带等组织的间充质干细胞由于分离培养相对简单,被广泛用于治疗移植抗宿主病、神经系统疾病及关节炎症等方面研究。然而,实质器官疾病的发生与组织修复与其上皮组织干细胞戚戚相关,治疗手段直接依赖于对相应上皮组织干细胞的认知和利用。不同上皮类型的组织干细胞,例如层状/假层状、移型、柱状上皮干细胞等,具有很高的组织忠实度,即专能分化能力,能在体外自觉定向分化为与来源组织细胞组成类型相一致的各类细胞。然而,不同上皮类型的组织干细胞在体外克隆、增殖阶段对培养微环境有不同的喜好与需求。如何营造最契合的体外微环境以支持稳定、高效、便捷的组织干细胞扩增是急需深入探索有待开发的关键
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【技术保护点】
1.一种非柱状上皮干细胞培养基,其特征在于,包含以下组分:cFAD培养液、TGFβ通路抑制剂和ROCK抑制剂。

【技术特征摘要】
1.一种非柱状上皮干细胞培养基,其特征在于,包含以下组分:cFAD培养液、TGFβ通路抑制剂和ROCK抑制剂。2.根据权利要求1所述的非柱状上皮干细胞培养基,其特征在于,所述TGFβ通路抑制剂包含以下浓度的组分:1-10μMTGFβ1-4抑制剂和1-10μMALK抑制剂。3.根据权利要求1所述的非柱状上皮干细胞培养基,其特征在于,所述ROCK抑制剂浓度为0.01-5μM。4.根据权利要求1~3任一项所述的非柱状上皮干细胞培养基,其特征在于,还包含以下组分:Wnt通路激活剂和FGF蛋白。5.根据权利要求4所述的非柱状上皮干细胞培养基,其特征在于,所述Wnt通路激活剂包含Wnt激活蛋白和/或GSK-3抑制剂;所述Wnt激活剂浓度为0.05-2μg/ml,所述GSK-3抑制剂浓度为0.1-1μg/ml。6.根据权利要求4所述的非柱状上皮干细胞培养基,其特征在于,所述FGF蛋白浓度为0.05-2μ...

【专利技术属性】
技术研发人员:洪玥
申请(专利权)人:洪玥
类型:发明
国别省市:广东,44

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