一种组织工程化体外三维口腔黏膜实验模型制造技术

本发明专利技术涉及到一种组织工程化体外三维口腔黏膜实验模型，主要包括以下步骤：步骤1：提取小鼠肉瘤细胞中的外基质蛋白做细胞支架；步骤2：将成纤维及上皮细胞分批种植于细胞支架中；步骤3：将步骤2中的基质胶与细胞混合物分批置于Transwell上室和下室中；步骤4：向Transwell上室、下室分别添加上皮专用培养基和普通的DMEM培养基；步骤5：利用气液平面形成角化上皮层，完成体外三维口腔黏膜的建模。既能够形成稳定的细胞分布均匀的体外口腔黏膜模型，且该模型具有良好的可复制性及稳定性，另外降低了建模的技术敏感性，简化了培养材料的种类，节约了资金，缩短了建模周期。

A tissue-engineered three-dimensional oral mucosa model in vitro

The present invention relates to a tissue-engineered three-dimensional oral mucosa experimental model in vitro, which mainly includes the following steps: step 1: extracting extracellular matrix proteins from mouse sarcoma cells as cell scaffolds; step 2: planting fibroblasts and epithelial cells in cell scaffolds in batches; step 3: placing matrix glue and cell mixture in batches in Transwell upper and lower chambers; 4: Adding special epithelial culture medium and common DMEM culture medium to Transwell's upper and lower chambers respectively; Step 5: Using gas-liquid plane to form keratinized epithelial layer, complete three-dimensional oral mucosa modeling in vitro. It can not only form a stable and uniform cell distribution model of oral mucosa in vitro, but also has good reproducibility and stability. In addition, it reduces the technical sensitivity of modeling, simplifies the types of culture materials, saves funds and shortens the modeling cycle.

【技术实现步骤摘要】
一种组织工程化体外三维口腔黏膜实验模型
本专利技术涉及一种实验模型，特别涉及一种组织工程化体外三维口腔黏膜实验模型。
技术介绍
口腔粘膜是覆盖在口腔表面的粘膜，组织学上由上皮和固有层组成，并借粘膜下层与深部组织相连。口腔粘膜的前方与唇部皮肤相连，后面与咽部粘膜相延续，是消化道的最前端，因此其结构和功能具有皮肤和消化道粘膜的某些特点。口腔粘膜的上皮为复层扁平上皮，除少数部位的皮脂腺外，没有其他的皮肤附属器。口腔粘膜的主要功能是屏障保护功能和感觉功能。不同部位口腔粘膜的形态与结构依其功能特点而有所差异。当在进行口腔黏膜实验时，为了便于实验和观察，往往会建立口腔黏膜体外三维培养模型，方法为分别培养牙龈上皮细胞及成纤维细胞备用，胶原溶液与成纤维细胞按比例混合后置于Transwell小室培养两天或，于胶原-细胞混合体表面接种上皮细胞，共同增殖培养三天后，升至液气平面继续培养十天，可得三维模型的组织学结构。但这种方式步骤繁琐。且复制率不高、材料复杂、技术敏感性高、成本高昂，不利于大样本实验研究，并且整个建模周期花费时间较长。因而在此我们提供一种制备步骤简单的体外三维口腔黏膜实验模型。
技术实现思路
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【技术保护点】
1.一种组织工程化体外三维口腔黏膜实验模型，其特征在于，主要包括以下步骤：步骤1：提取小鼠肉瘤细胞中的外基质蛋白做细胞支架；步骤2：将成纤维及上皮细胞分批种植于细胞支架中；步骤3：将步骤2中的基质胶与细胞混合物分批置于Transwell上室和下室中；步骤4：向Transwell上室、下室分别添加上皮专用培养基和普通的DMEM培养基；步骤5：利用气液平面形成角化上皮层，完成体外三维口腔黏膜的建模。

【技术特征摘要】
1.一种组织工程化体外三维口腔黏膜实验模型，其特征在于，主要包括以下步骤：步骤1：提取小鼠肉瘤细胞中的外基质蛋白做细胞支架；步骤2：将成纤维及上皮细胞分批种植于细胞支架中；步骤3：将步骤2中的基质胶与细胞混合物分批置于Transwell上室和下室中；步骤4：向Transwell上室、下室分别添加上皮专用培养基和普通的DMEM培养基；步骤5：利用气液平面形成角化上皮层，完成体外三维口腔黏膜的建模。2.根据权利要求1所述的一种组织工程化体外三维口腔黏膜实验模型，其特征在于：所述步骤4中，分别添加培养基和普通的DMEM培养基后放置在细胞培养箱中培养6-8天。3.根据权利要求2所述的一种组织工程化体外三维口腔黏膜实验模型，其特征在于：所述步骤5中，...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡勤，刘苑，潘宇，林泓磊，江磊，
申请(专利权)人：程辉，
类型：发明
国别省市：福建,35