一种毛囊干细胞的原代分离方法技术

本发明专利技术属于干细胞领域，公开了一种毛囊干细胞的原代分离方法，取头皮组织预处理后加中性蛋白酶消化，清洗后顺毛囊生长方向拔出完整的毛囊接种到L‑多聚赖氨酸包被的培养瓶中，加入干细胞专用培养液培养，待细胞汇合度长至80‑90％时传代。实验表明本发明专利技术所述原代分离方法可分离出大量毛囊干细胞，且细胞活力好，能够后续稳定培养。

【技术实现步骤摘要】
一种毛囊干细胞的原代分离方法
本专利技术属于干细胞领域，具体涉及一种毛囊干细胞的原代分离方法，尤其是一种人源毛囊干细胞的原代分离方法。
技术介绍
皮肤作为人体最大的器官，具有感觉、调节体温、分泌与排泄、防止水分蒸发等多种作用，其中最主要的功能是作为人体与外界环境的屏障以维持内环境的稳定，同时其也是免疫系统的重要组成部分。目前临床上治疗皮肤缺损的标准治疗方法是自体皮肤移植，由于具有无免疫排斥反应，成活率高等特点，其在临床上应用极为广泛，并取得了很好的疗效。但自体皮肤移植的缺点也非常明显，由于是自体取材，其本身就是对患者的再次损伤，极大增加了患者痛苦，而且有发生供皮区感染，不愈合等并发症的风险。更为严重的是，对于上述的大面积皮肤缺损，常由于缺乏足够可供移植的自体皮肤而导致创面修复困难，严重影响了治疗进程，甚至导致死亡。毛囊干细胞(hairfolliclestemcells，HFSCs)是毛囊中的原始细胞，定位在人的毛囊外根鞘隆突部中、最外层靠近立毛肌附着点处。研究发现毛囊干细胞不仅能够分化形成毛囊，有效治疗秃发；而且还参与了表皮组织的形成过程。研究HFSCs对于秃发的发病机制、毛囊组织工本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种毛囊干细胞的原代分离方法，其特征在于，取头皮组织预处理后加中性蛋白酶消化，清洗后顺毛囊生长方向拔出完整的毛囊接种到L‑多聚赖氨酸包被的培养瓶中加入培养液培养，待细胞汇合度长至80‑90％时传代。

【技术特征摘要】
1.一种毛囊干细胞的原代分离方法，其特征在于，取头皮组织预处理后加中性蛋白酶消化，清洗后顺毛囊生长方向拔出完整的毛囊接种到L-多聚赖氨酸包被的培养瓶中加入培养液培养，待细胞汇合度长至80-90％时传代。2.根据权利要求1所述的原代分离方法，其特征在于，所述预处理为剪去头皮组织外毛发及皮下组织中的脂肪和结缔组织，剪成3～5mm宽的皮条，用氯化钠注射液清洗后置于75％乙醇中清洗，再用氯化钠注射液清洗后剪成细小组织块。3.根据权利要求1所述的原代分离方法，其特征在于，所述中性蛋白酶的浓度为0.2U/ml-0.5U/ml。4.根据权利要求1所述的原代分离方法，其特征在于，所述消化为4℃消化9-16h。5.根据权利要求1所...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈海佳，葛啸虎，王一飞，张梦晨，王小燕，
申请(专利权)人：广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44