正常肝干细胞向肝癌干细胞恶性转化的诱导方法技术

本发明专利技术属于肝干细胞恶性转化技术领域，公开了一种正常肝干细胞向肝癌干细胞恶性转化的诱导方法，所述诱导方法包括在正常肝干细胞中同时失调四种转录因子联合诱导出肝癌干细胞的步骤；所述四种转录因子分别为TG737、miR10b、miR200a和CD44。本发明专利技术通过沉默TG737、过表达MiR‑10b、沉默miR‑200a和过表达CD44，实现了将正常肝干细胞向肝癌干细胞的恶性转化，从而利用本发明专利技术的诱导方法可以为肝癌的研究提供实验模型，利于肝癌疾病的研究。

【技术实现步骤摘要】
正常肝干细胞向肝癌干细胞恶性转化的诱导方法
本专利技术属于生物
，具体涉及一种正常肝干细胞向肝癌干细胞恶性转化的诱导方法。
技术介绍
肝细胞癌(hepatocelluarcarcinoma，HCC)是最常见的原发性肝癌类型，也是占全球癌症相关死亡原因的第三位。HCC是一个复杂、多步骤的过程与各种遗传因素改变的累积有关。HCC患者虽然可以经过手术切除、消融、化疗栓塞、索拉菲尼等方案治疗，但是由于肿瘤侵袭性高，肝内扩散及肝内转移频繁导致预后效果极差，5年内生存率低于5％。因此，提高对HCC复杂的分子机制的理解对于开发新的治疗策略至关重要。肝干/祖细胞(liverstem/progenitorcells,LSPCs)具有很高的增殖潜能，可能是唯一能在积累一定突变后转化为启动HCC的细胞。LSPCs还可能维持这些突变并将它们传递给子代肝细胞，导致LSPCs的恶性转化为肝癌干细胞(livercancerstemcells,LCSCs)，从而导致HCC启动。大多数癌症是通过基因中突变的积累来实现的，这些基因决定着细胞的增殖、细胞周期、细胞分化和侵袭。可以想象，改变调控细胞周期、细胞增殖、细本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种正常肝干细胞向肝癌干细胞恶性转化的诱导方法，其特征在于：所述诱导方法包括在正常肝干细胞中同时失调四种转录因子联合诱导出肝癌干细胞的步骤；所述四种转录因子分别为TG737、miR10b、miR200a和CD44。

【技术特征摘要】
1.一种正常肝干细胞向肝癌干细胞恶性转化的诱导方法，其特征在于：所述诱导方法包括在正常肝干细胞中同时失调四种转录因子联合诱导出肝癌干细胞的步骤；所述四种转录因子分别为TG737、miR10b、miR200a和CD44。2.根据权利要求1所述的正常肝干细胞向肝癌干细胞恶性转化的诱导方法，其特征在于：四种转录因子的具体失调方式分别为沉默TG737、过表达MiR-10b、沉默miR-200a和过表达CD44。3.根据权利要求2所述的正常肝干细胞向肝癌干细胞恶性转化的诱导方法，其特征在于：所述正常肝干细胞为WB-F344。4.根据权利要求3所述的正常肝干细胞向肝癌干细胞恶性转化的诱导方法，其特征在于：所述诱导方法的具体步骤包括：A、构建可诱导慢病毒载体系统，得到慢病毒载体；A1、构建短发夹shRNA可诱导慢病毒载体系统，转录因子为TG737和miR200a，得到短发夹shRNA可诱导慢病毒载体；A2、构建真核表达载体pcDNA3.1可诱导慢病毒载体系统，转录因子为miR10b和CD44，得到真核表达载体pcDNA3.1可诱导慢病毒载体；B、将步骤A1和A2得到的慢病毒载体以组合形式感染正常肝干细胞，挑选形态类似肝癌干细胞的克隆传代培养，通过筛选符合肝癌干细胞特性的细胞克隆，得到肝癌干细胞。5.根据权利要求4所述的正常肝干细胞向肝癌干细胞恶性转化的诱导方法，其特征在于：所述步骤B中，步骤A1和A2得到的慢病毒载体以组合形式携带的转录因子包括：TG737、miR10b、miR200a和CD44。6.根据权利要求5所述的正常肝干细胞向肝癌干细胞恶性转化的...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘卫辉，冯亚星，任丽娜，温旭东，王涛，
申请(专利权)人：刘卫辉，
类型：发明
国别省市：四川,51