一种抗体包被方法及化学发光检测试剂盒技术

本发明专利技术实施例提供了一种抗体包被方法及化学发光检测试剂盒，步骤一、将抗体与荧光微球按照4‑6:300的质量比在pH为8.0‑8.5的反应缓冲液中反应1‑2h，获得抗体标记微球；吸附法包被96孔板：将FITC‑anti‑PSA或anti‑FITC的PBS溶液100μL加入微孔板，4℃保存12小时后，用BSA封闭液封闭后干燥，密封备用；间接法包被96孔板：先以吸附法包被anti‑FITC微孔板，1.5μg/孔，预制anti‑FITC微孔板；然后每孔加入FITC‑anti‑PSA的PBS溶液100μL，37℃温育50min后以BSA封闭液封闭后干燥，密封。成本较低，可以提高抗体的利用率，改善试剂性能，提高试剂在用于检测时的灵敏度。

【技术实现步骤摘要】
一种抗体包被方法及化学发光检测试剂盒
本专利技术实施例涉及免疫学检测方法
，更具体地，涉及一种抗体包被方法及化学发光检测试剂盒。
技术介绍
在现代生物技术中，以荧光类物质标记蛋白质、核酸等生物分子作为示踪、微量定量方法具有广泛的用途。免疫反应一般需要一种标记方案，一种分离方案。96孔微孔板上预包被固相抗体是一种常规、经济、方便的分离方案。96孔微孔板用于化学发光试验时，一般以辣根酶催化鲁米诺发光最为常用。96孔微孔板材质为聚苯乙烯，其包被蛋白有两种具体的操作办法，一种是直接物理吸附，即通过疏水作用将IgG分子吸咐于聚苯乙烯材质上，包括将IgG分子进行疏水预处理。第二种是共价结合，通过引入氨基、羧基等通过共价反应将IgG结合在聚苯乙烯板上，目的是提高吸附量。目前商品化的试剂以第一种为主。直接物理除了包被抗体外，还有一种变通思路就是制备通用性预包被板如第二抗体板、亲和素板、荧光素抗体板等，在免疫反应时将抗体作为一种反应组份加入，这样可以实现统一的预包被板，从而节约研发周期及成本等。免疫试纸快速检测技术是基于免疫层析原理建立起来的一种适用于现场检测的技术，典型的免疫试纸包括样品垫、标本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗体包被方法，其特征在于，包括：步骤一、将FITC‑anti‑PSA抗体或anti‑FITC抗体与荧光微球按照4‑6:300的质量比在pH为8.0‑8.5的反应缓冲液中反应1‑2h，获得抗体标记微球；其中，所述荧光微球表面具有羟基官能团；步骤二、将含有FITC‑anti‑PSA，碳二亚胺EDC，磁微粒的100μL PBS溶液室温混合并震荡3h；PBS溶液洗涤后保存在3mL含1g/LBSA的PBS溶液中，置于4℃备用；吸附法包被96孔板：将FITC‑anti‑PSA或anti‑FITC的PBS溶液100μL加入微孔板，4℃保存12小时后，用BSA封闭液封闭后干燥，密封备用；间接法包被96...

【技术特征摘要】
1.一种抗体包被方法，其特征在于，包括：步骤一、将FITC-anti-PSA抗体或anti-FITC抗体与荧光微球按照4-6:300的质量比在pH为8.0-8.5的反应缓冲液中反应1-2h，获得抗体标记微球；其中，所述荧光微球表面具有羟基官能团；步骤二、将含有FITC-anti-PSA，碳二亚胺EDC，磁微粒的100μLPBS溶液室温混合并震荡3h；PBS溶液洗涤后保存在3mL含1g/LBSA的PBS溶液中，置于4℃备用；吸附法包被96孔板：将FITC-anti-PSA或anti-FITC的PBS溶液100μL加入微孔板，4℃保存12小时后，用BSA封闭液封闭后干燥，密封备用；间接法包被96孔板：先以吸附法包被anti-FITC微孔板，1.5μg/孔，预制anti-FITC微孔板；然后每孔加入FITC-anti-PSA的PBS溶液100μL，37℃温育50min后以BSA封闭液封闭后干燥，密封。2.根据权利要求1所述的抗体包被方法，其特征在于，所述反应缓冲液为含有质量体积百分比为0.8-1.2％的带氨基基团的烷基硅氧烷和质量体积百分比为9-11％的BSA的蹦酸盐缓冲液。3.根据权利要求1所述的抗体包被方法，其特征在于，所述96孔板为96孔不透明微孔板，...

【专利技术属性】
技术研发人员：冷毅斌，王长乐，
申请(专利权)人：武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北,42