从血清中提取载脂蛋白B的方法及载脂蛋白B技术

本发明专利技术提供了一种从血清中提取载脂蛋白B的方法及载脂蛋白B，涉及生物化学技术领域，本发明专利技术提供的从血清中提取载脂蛋白B的方法，包括将血清预处理后得到的载脂蛋白B粗样品经疏水层析，洗脱得到所述载脂蛋白B。本发明专利技术选用疏水层析的方法提取载脂蛋白B，显著提高了载脂蛋白B的纯化效率，既缓解了现有技术中应用化学沉淀法提取蛋白纯度低的问题，又避免了超速离心法成本高的问题，还能够大大提高提取得到的载脂蛋白B的浓度和纯度。并且，该方法操作简单，成本低廉，对设备及技术人员要求不高，易于推广应用。此外，还具有提取效果明显，回收率高，可处理量大的优点，为实现工业化大生产提供基础。

【技术实现步骤摘要】
从血清中提取载脂蛋白B的方法及载脂蛋白B
本专利技术涉及生物化学
，尤其是涉及一种从血清中提取载脂蛋白B的方法及载脂蛋白B。
技术介绍
载脂蛋白B(ApoB)是人血清中低密度脂蛋白(LDL)的主要结构蛋白，约占LDL蛋白质含量的97％，其含量可反应LDL水平，血清中ApoB增高是心脑血管病的危险因素。临床上ApoB测定常作为心脑血管病的风险度估计。所有ApoB的免疫测定技术均需用ApoB抗血清，日前国际和国内通用的ApoB测定试剂盒均采用免疫比浊法(Immunoturbidimetricassay，ITA)，因其快速、准确、精密并适用于各种类型的自动生化分析仪，特别适用大批量标本的测定。为了满足临床检验需要，大批量制备高纯度ApoB抗血清显得非常重要。常规从血清中提取ApoB一般通过化学沉淀和超速离心两种方法。化学沉淀法一般经过硫酸葡聚糖(DS)和二价金属离子进行沉淀，富集血清中的脂蛋白。然后经过细化分离条件，如改变沉淀剂或缓冲条件等，进行二次分离，得到富含ApoB的低密度脂蛋白样品。化学沉淀法工艺简单、成本低，但所得样品纯度很低。超速离心法借助于不同的密度梯度溶液，经过多次的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种从血清中提取载脂蛋白B的方法，其特征在于，所述方法包括将血清预处理后得到的载脂蛋白B粗样品经疏水层析，洗脱得到所述载脂蛋白B。

【技术特征摘要】
1.一种从血清中提取载脂蛋白B的方法，其特征在于，所述方法包括将血清预处理后得到的载脂蛋白B粗样品经疏水层析，洗脱得到所述载脂蛋白B。2.根据权利要求1所述的从血清中提取载脂蛋白B的方法，其特征在于，所述预处理包括从血清中获取低密度脂蛋白并透析得到载脂蛋白B粗样品。3.根据权利要求2所述的从血清中提取载脂蛋白B的方法，其特征在于，将血清经高分子化合物和二价金属离子处理后，得到所述低密度脂蛋白。4.根据权利要求3所述的从血清中提取载脂蛋白B的方法，其特征在于，所述高分子化合物包括硫酸葡聚糖、聚乙二醇或聚乙烯吡咯烷酮中的一种或多种；优选地，所述高分子化合物的用量为0.01％-0.2％(W/V)，优选用量为0.05％-0.15％(W/V)；优选地，所述二价金属离子包括硫酸锰、氯化钙或氯化锰中的一种或多种；优选地，所述二价金属离子的浓度为0.1-1M，优选用量为0.3-0.7M。5.根据权利要求2所述的从血清中提取载脂蛋白B的方法，其特征在于，将所述低密度脂蛋白在高盐缓冲液中进行透析，并经还原剂处理后，固液分离得到所述载脂蛋白B粗样品；优选地，所述高盐缓冲液中无机盐的浓度为0.5-2M，优选浓度为0.8-1.8M；优选地，所述高盐缓冲液中无机盐包括氯化钠、硫酸铵或硫...

【专利技术属性】
技术研发人员：柯拓，
申请(专利权)人：广东菲鹏生物有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44