一种高效固氮慢生根瘤菌壳寡糖脱乙酰酶及其制备方法和应用技术

技术编号:19735037 阅读:29 留言:0更新日期:2018-12-12 03:04
本发明专利技术公开了一种高效固氮慢生根瘤菌壳寡糖脱乙酰酶及其制备方法和应用。本发明专利技术根据毕赤酵母密码子偏爱性,利用全基因合成方法获得了高效固氮慢生根瘤菌(Bradyrhizobium diazoefficiens)中的壳寡糖脱乙酰酶编码基因序列,优化后的核酸序列如SEQ ID NO.2所示。进一步利用毕赤酵母表达系统对该所述优化的壳寡糖脱乙酰酶编码基因进行分泌表达,获得高效固氮慢生根瘤菌壳寡糖脱乙酰酶,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明专利技术获得的高效固氮慢生根瘤菌壳寡糖脱乙酰酶对可对壳寡糖非还原端的乙酰基进行脱除,从而获得特定结构的壳寡糖。这些经调控后的壳寡糖与调控前相比,可具有新的或更高的生物活性。因此,该酶及其脱乙酰产物均具有良好的工业应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种高效固氮慢生根瘤菌壳寡糖脱乙酰酶及其制备方法和应用
本专利技术属于壳寡糖制备
,具体涉及一种高效固氮慢生根瘤菌(Bradyrhizobiumdiazoefficiens)壳寡糖脱乙酰酶及其制备方法和应用。
技术介绍
壳寡糖是甲壳素或者其脱乙酰产物壳聚糖经物理、化学或酶学等方法降解产生的寡聚物,由氨基葡萄糖(Glucosamine,GlcN)、N-乙酰氨基葡萄糖(N-Acetylglucosamine,GlcNAc)或者二者的组合通过β-1,4糖苷键连接而成,通常聚合度(degreeofpolymerization,DP)<20。壳寡糖具有抗炎、抗肿瘤及激活植物免疫等一系列生物活性。研究发现,壳寡糖生物活性的发挥与其结构,如DP及脱乙酰度(Degreeofdeacetylation,DDA)甚至乙酰基在寡糖链上的分布等密切相关。因此,制备结构可控壳寡糖是该领域多功能及高活性新产品研发的新方向。利用不同底物识别类型的脱乙酰酶对壳寡糖进行水解,可以获得特定脱乙酰度及乙酰基位点分布的壳寡糖,可能具有更高或新的生物活性。目前,尚缺乏工业用的壳寡糖脱乙酰酶制剂,限制了该领本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种高效固氮慢生根瘤菌壳寡糖脱乙酰酶,其特征在于:所述高效固氮慢生根瘤菌壳寡糖脱乙酰酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

【技术特征摘要】
1.一种高效固氮慢生根瘤菌壳寡糖脱乙酰酶,其特征在于:所述高效固氮慢生根瘤菌壳寡糖脱乙酰酶的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。2.一种高效固氮慢生根瘤菌壳寡糖脱乙酰酶基因,其特征在于:编码权利要求1所述的高效固氮慢生根瘤菌壳寡糖脱乙酰酶。3.根据权利要求2所述的高效固氮慢生根瘤菌壳寡糖脱乙酰酶基因,其特征在于:该基因的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示。4.包含权利要求2或3所述高效固氮慢生根瘤菌壳寡糖脱乙酰酶基因的重组表达载体。5.根据权利要求4所述的重组表达载体,其特征在于:所述表达载体为pGBG1,表达载体pGBG1通过如下方式获得:将表达载体pPIC9中的如SEQIDNO.4所示信号...

【专利技术属性】
技术研发人员:杜昱光程功焦思明张毓宸冯翠任立世李建军未金花
申请(专利权)人:中国科学院过程工程研究所
类型:发明
国别省市:北京,11

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