癌症制造技术

本发明专利技术涉及癌症，特别涉及用来治疗、预防或缓解癌症，特别是转移性疾病的新颖药物组合物、疗法和方法。本发明专利技术还涉及癌症和转移性疾病的诊断和预后方法，以及用于这些病情的生物标记。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】癌症
本专利技术涉及癌症，特别涉及用来治疗、预防或缓解癌症，特别是转移性疾病的新颖药物组合物、疗法和方法。本专利技术还涉及癌症和转移性疾病的诊断和预后方法，以及用于这些病情的生物标记。
技术介绍
癌症和恶性肿瘤是涉及异常细胞生长的一类疾病，其具有侵入或扩散至身体其它部位(即转移)的潜力。在2012年，全球出现了大约1400万新的癌症病例。因此对于癌症和转移的治疗需要提供改进的诊断和疗法。乙酰胆碱酯酶(AChE)在不同的发展阶段被表达为不同的形式，其全部具有相同的酶活性，但是具有非常不同的分子组成。‘有尾的’(T-AChE-SEQIDNo：1)在突触处被表达，并且专利技术人在以前已经确认了两种可从C-端切割的肽，一种称作“T14”(SEQIDNo：3)，其位于称作“T30”(SEQIDNo：2)的另一种内，“T14”和“T30”均与β-淀粉样蛋白类似区域具有强烈的序列同源性。AChE的C-端肽“T14”已经被确认为是导致它的一系列非水解作用的AChE分子的突出部分。合成的14种氨基酸的肽类似物(即“T14”)，以及随后其被嵌入其中的更大、更稳定、并且更有效力的氨基酸序列(即“T30”-SEQIDNo：3)显示出与对于‘非类胆碱功能的’AchE报道的那些类似的作用，而T30序列内的惰性残基(即“T15”-SEQIDNo：4)则没有作用。T14肽与α7烟碱受体上的变构部位结合，所述α7烟碱受体本身没有作用。但是，在像乙酰胆碱或饮食胆碱这样的主要配体的存在下，T14增强由这些主要药剂引起的钙流入。过量的钙可被吸收到线粒体中，在其中它破坏氧化磷酸化，并且引起电子泄露。结果形成自由基，然后它会使细胞膜不稳定，然后细胞死亡。
技术实现思路
专利技术人使用蛋白免疫印迹研究了7个癌细胞系(MEC-1、KG1a、H929、MCF-7、MDA-MB231、CLL、以及JJN3)的细胞裂解物和细胞培养基中毒性T14肽、α7烟碱受体和乙酰胆碱酯酶蛋白的水平。他们发现，仅毒性T14肽从癌细胞释放，并且细胞外的T14浓度比癌细胞内的T14水平更高。然后专利技术人继续研究癌细胞系的细胞膜和细胞液部分中已知的具有毒性T14肽的转移性标记CD44、AchE和α7烟碱受体之间的关系。他们惊讶地观察到，CD44显著地与毒性分子T14正相关。总之，这些数据强烈表明，毒性T14肽，包括其生物合成和代谢途径，代表用来治疗癌症和转移的良好靶点，此外，T14本身充当鲁棒的癌转移生物标记。因此，在本专利技术的第一方面，提供了SEQIDNo：3的肽的合成和/或活性的抑制剂，其用于治疗、缓解或预防癌症或转移性疾病。在第二方面，提供了治疗、缓解或预防受试者的癌症或转移性疾病的方法，所述方法包含给需要这种治疗的受试者施用治疗有效量的SEQIDNo：3的肽的合成和/或活性的抑制剂。如实例1所述，专利技术人在7个癌细胞系(MEC-1、KG1a、H929、MCF-7、MDA-MB231、CLL、以及JJN3)和充当对照的正常B淋巴细胞的细胞裂解物和细胞培养基中使用蛋白免疫印迹检测了毒性T14肽(SEQIDNo：3)、烟碱α-7受体以及乙酰胆碱酯酶(AChE)蛋白的水平。MDA-MB-231、KG1a、以及MEC-1细胞是高度迁移性的癌细胞系，而H929、JJN3、CLL以及MCF-7则是迁移性较低的癌细胞系，B淋巴细胞是正常的非癌性细胞。T14、α7受体以及AChE均在癌细胞内被检测到。令人惊讶的是，所有三种蛋白均具有类似的机动性，并且其水平彼此正相关，表明它们彼此复合在一起。但是，在癌细胞外(即细胞培养基内)，仅检测到毒性T14肽。更加令人惊讶的是，在7个癌细胞系的6个中，细胞外的T14水平比细胞内的T14水平更高，表明产生T14并从细胞释放。专利技术人还惊讶地看到，癌细胞外的T14水平与癌细胞内的α-7受体水平显著负相关。实例2描述使用蛋白免疫印迹来显示6个癌细胞系(JJN3、MDA-MB231、MCF-7、KG1a、MEC-1、以及H929)以及另外一个源自癌症的细胞系(PC12)的细胞膜和细胞液部分中众所周知的具有毒性T14肽的转移性标记CD44、AchE和α-7受体之间的关系。在所有癌细胞系中，转移性标记(CD44)与毒性分子T14显著正相关，并且这种相关在癌细胞膜内以及在癌细胞的细胞液内同样适用。这些发现强烈地表明，T14是癌症和转移(即肿瘤细胞迁移)的程度的良好预示物。根据第一方面或第二方面治疗的癌症可以是白血病。例如，癌症可以是淋巴细胞性白血病或慢性淋巴细胞性白血病(CLL)。癌症可以是骨髓性白血病或急性骨髓性白血病。癌症可以是多发性骨髓瘤。癌症可以是乳腺癌。癌症可以是浆细胞瘤。最优选地，T14肽(SEQIDNo：3)的合成和/或活性的抑制剂用于治疗、缓解或预防转移性疾病或转移。乙酰胆碱酯酶是水解乙酰胆碱的一种丝氨酸蛋白酶，对于技术人员而言是众所周知的。主要形式的乙酰胆碱酯酶在脑中发现，称作有尾乙酰胆碱酯酶(T-AChE)。人类有尾乙酰胆碱酯酶的一个实施例的蛋白序列(GenBank：AAA68151.1)具有614个氨基酸的长度，在本文中作为SEQIDNo：1提供如下：应理解，SEQIDNo：1的前31个氨基酸残基在该蛋白被释放时被除去，从而留下583个氨基酸序列。T30(其对应于SEQIDNo：1的最后30个氨基酸残基)的氨基酸序列在本文中作为SEQIDNo：2提供如下：-KAEFHRWSSYMVHWKNQFDHYSKQDRCSDL[SEQIDNo：2]毒性T14肽(其对应于靠近SEQIDNo：1端部的14个氨基酸残基，并且缺乏T30中存在的最后15个氨基酸)的氨基酸序列在本文中作为SEQIDNo：3提供如下：-AEFHRWSSYMVHWK[SEQIDNo：3]T15(其对应于SEQIDNo：1的最后15个氨基酸残基)的氨基酸序列在本文中作为SEQIDNo：4提供如下：-NQFDHYSKQDRCSDL[SEQIDNo：4]专利技术人发现，需要对毒性T14肽进行抑制以有效治疗癌症或转移。本专利技术的抑制剂可用来预防癌症的发展或转移的发展和扩散。例如，所述抑制剂可给予面临癌症或转移发展的风险(例如具有遗传倾向性或曝露于有害环境)的受试者。所述抑制剂还可在外科手术、放疗或化疗之后使用，以预防癌症在受试者中重新出现。专利技术人已经显示，毒性T14肽与α7烟碱受体上的变构部位结合，所述α7烟碱受体本身对细胞没有作用。但是，在像乙酰胆碱或饮食胆碱这样的主要配体的存在下，T14增强由这些主要药剂引起的钙向细胞中流入。过量的钙被吸收到线粒体中，在其中它破坏氧化磷酸化，并引起电子泄露。于是形成自由基，其然后使细胞膜不稳定，然后细胞死亡。基于以上理解，专利技术人设计了能够降低毒性T14肽的合成或生物活性的抑制剂，其可通过许多生物合成和/或新陈代谢途径实现其作用。优选地，抑制剂可与T14结合，并防止它与α7烟碱受体结合。专利技术人发现，设法达到变构部位的任何T14肽保持与受体的相互作用，并且该相互作用可在24小时内引起更多受体的上调，即T14能增加其本身的靶点。因此，预防T14与变构部位的相互作用是最优选的。例如，这种抑制剂可：(a)减小T14肽与α-7受体上的变构部位之间的相互作用；(b)与内源性T14肽竞争本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于诊断患有癌症或转移性疾病、或易患癌症或转移性疾病的个体、或用于提供对个体病情的预后的方法，所述方法包含在从所述个体获得的样本中检测SEQ ID No：3的肽、或其片段或变体的存在，其中所述SEQ ID No：3的肽、或其片段或变体的存在意味着所述个体患有癌症或转移性疾病、或易患癌症或转移性疾病，或所述个体的病情具有不良预后。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.01.28 GB 1601585.11.一种用于诊断患有癌症或转移性疾病、或易患癌症或转移性疾病的个体、或用于提供对个体病情的预后的方法，所述方法包含在从所述个体获得的样本中检测SEQIDNo：3的肽、或其片段或变体的存在，其中所述SEQIDNo：3的肽、或其片段或变体的存在意味着所述个体患有癌症或转移性疾病、或易患癌症或转移性疾病，或所述个体的病情具有不良预后。2.一种用于诊断患有癌症或转移性疾病、或易患癌症或转移性疾病的受试者、或用于提供对所述受试者的病情的预后的试剂盒，所述试剂盒包含用于确定测试受试者的样本中存在的SEQIDNo：3的肽、或其片段或变体的浓度的检测工具，其中所述样本中存在所述SEQIDNo：3的肽、或其片段或变体表明所述受试者患有癌症或转移性疾病、或易患癌症或转移性疾病。3.根据权利要求1所述的方法或根据权利要求2所述的试剂盒，其中所述样本为血液、血浆、血清、脊髓液、尿、汗液、唾液、泪液、乳抽吸液、前列腺液、精液、阴道液、粪便、宫颈刮片、细胞、羊水、眼内流体、粘液、呼气中的湿气、动物组织、细胞裂解物、肿瘤组织、头发、皮肤、口腔刮片、淋巴、间质液、指甲、骨髓、软骨、朊病毒、骨粉、耳垢、或其组合，优选地其中所述样本包含血液样本。4.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述检测工具包含适合检测所述样本中存在和/或不存在T14阳性细胞的化验，优选免疫化验测试，更优选地其中所述化验包含抗体。5.根据权利要求4所述的方法或试剂盒，其中所述化验包含使用蛋白免疫印迹。6.一种SEQIDNo：3的肽、或其片段或变体的用途，其用作癌症或转移性疾病的诊断或预后生物标记。7.一种SEQIDNo：3的肽的合成和/或活性的抑制剂，其用于治疗、缓解或预防癌症或转移性疾病。8.一种根据权利要求7使用的抑制剂，其中所述癌症为白血病、淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、骨髓性白血病、或急性骨髓性白血病。9.一种根据权利要求7使用的抑制剂，其中所述癌症为多发性骨髓瘤、乳腺癌、或浆细胞瘤。10.一种根据权利要求7使用的抑制剂，其中所述抑制剂用于治疗、缓解或预防转移性疾病或转移。11.一种根据权利要求7至10中任一项使用的抑制剂，其中所述抑制剂包含式(I)的化合物：其中：R1为-NR9R10或-OH；R2为R3为-H或C1-5直链或支链烷基或烯基；R4为R5为-H或C1-5直链或支链烷基或烯基；R6为R7为-H或C1-5直链或支链烷基或烯基；R8为-H；C1-5直链或支链烷基或烯基或X1为-NR9R10、-OH或所述或每个R9和R10独立地为-H或C1-5直链或支链烷基或烯基；R11为-NH2、-OH或芳基；所述或每个m独立地在0与5之间；并且每个n独立地在0与10之间；或其药学上可接受的盐、溶剂化物、互变异构体形式、或多晶形式。12.一种根据权利要求11使用的抑制剂，其中所述抑制剂包含式(I)的化合物，其中：R2为R3为H或C1-5直链或支链烷基或烯基；R4为R5为H或C1-5直链或支链烷基或烯基；R6为并且R7为H或C1-5直链或支链烷基或烯基。13.一种根据权利要求11或权利要求12使用的抑制剂，其中所述抑制剂包含式(I)的化合物，其中：R2为R3为H或C1-5直链或支链烷基或烯基；R4为R5为H或C1-5直链或支链烷基或烯基；R6为并且R7为H或C1-5直链或支链烷基或烯基。14.一种根据权利要求11至13中任一项使用的抑制剂，其中所述抑制剂包含式(101)或(103)的化合物：15.一种根据权利要求11至14中任一项...

【专利技术属性】
技术研发人员：苏珊·格林菲尔德，亨利·图，保罗·莫里尔，萨拉·加西亚拉特斯，克里斯·佩珀，克里斯·费根，
申请(专利权)人：神经生物有限公司，
类型：发明
国别省市：英国,GB