一种利用共养生孢菌属细菌产果胶酶的方法技术

一种利用共养生孢菌属细菌产果胶酶的方法，它涉及一种果胶酶的生产方法。本发明专利技术提供了一种利用共养生孢菌属细菌产果胶酶的方法，该方法与现有技术相比具有工艺要求低、周期短、生产成本低的优势。产果胶酶的方法：一、将共养生孢菌属细菌HDYM‑13接种于魔芋粉培养基中；二、发酵培养、离心，取上清液即获得果胶酶。本发明专利技术魔芋粉培养基成分简单，只有魔芋粉、冰乙酸、硫酸铵和氯化钠，均为工业级原料，成本低廉。

A method of pectinase production from the genus conidia

A method for producing Pectinase from a bacterium belonging to the genus conidia belongs to a production method of pectinase. The invention provides a method for producing Pectinase from the bacteria of the genus conidia. Compared with the existing technology, the method has the advantages of low process requirement, short cycle and low production cost. The methods of producing pectinase: 1. Inoculating HDYM 13 of the bacteria of the genus conidia in the medium of konjac powder; two, fermentation and centrifugation, and extracting the supernatant to obtain pectinase. The konjac flour culture medium is simple in composition, and only konjac flour, glacial acetic acid, ammonium sulfate and sodium chloride are industrial grade raw materials, and the cost is low.

【技术实现步骤摘要】
一种利用共养生孢菌属细菌产果胶酶的方法
本专利技术涉及一种果胶酶的生产方法。
技术介绍
果胶酶，英文名pectinase，是降解植物细胞壁胶质主要成分果胶质的酶类。果胶酶在食品加工领域有极其重要的用途，如果汁澄清和植物中天然活性组分提取。此外，果胶酶在造纸业中可用于制浆，在纺织业中则能用于植物原茎和纤维的脱胶，随着果胶酶应用领域的拓展和使用量的增加，果胶酶需求量越来越大。目前采用微生物发酵制备果胶酶的技术也已经很成熟。
技术实现思路
本专利技术提供了一种利用共养生孢菌属细菌产果胶酶的方法，该方法与现有技术相比具有工艺要求低、周期短、生产成本低的优势。本专利技术利用共养生孢菌属细菌产果胶酶的方法按以下步骤进行：一、将共养生孢菌属细菌HDYM-13接种于魔芋粉培养基中，使培养基中初始细菌HDYM-13浓度为1.0×106～2.0×106个/mL；二、在温度为30～38℃的条件下，发酵培养30～60h，然后离心，取上清液即获得果胶酶；其中，步骤一魔芋粉培养基按1.5～2g魔芋粉、0.3～1mL冰乙酸、0.2～0.5g硫酸铵、0.5g氯化钠和100mL自来水的比例制成。本专利技术中使用的共养生孢菌属(Syntrophosporasp.)细菌HDYM-13(于“黑龙江省不同地区亚麻沤麻液中功能菌生物多样性的研究”一文中公开，保藏于黑龙江大学生命科学学院省高校微生物重点实验室中)为化能异养型细菌，分离自巴彦县亚麻温水沤麻液。本专利技术中共养生孢菌属(Syntrophosporasp.)细菌HDYM-13在魔芋粉、冰乙酸、硫酸铵、氯化钠的底物诱导作用下产生胞外果胶酶。发酵培养过程中魔芋粉被降解为小分子还原糖，可被细菌HDYM-13利用；冰乙酸作为小分子羧酸，是共养生孢菌属(Syntrophosporasp.)细菌易于利用的碳源；硫酸铵和氯化钠中的硫酸根、铵根和钠离子均可被细菌HDYM-13利用。因此，该发酵液不但成分简单，果胶酶易于分离；并且对环境几乎没有污染。本专利技术魔芋粉培养基成分简单，只有魔芋粉、冰乙酸、硫酸铵和氯化钠，均为工业级原料，成本低廉；而且魔芋粉培养基用水仅为自来水。本专利技术发酵温度范围为30～38℃，温度参数宽泛，易于实现。培养30～60h后上清液中果胶酶活力即可达到2500～3500U/mL，发酵周期短，酶活高。具体实施方式本专利技术技术方案不局限于以下所列举具体实施方式，还包括各具体实施方式间的任意组合。具体实施方式一：本实施方式利用共养生孢菌属细菌产果胶酶的方法按以下步骤进行：一、将共养生孢菌属细菌HDYM-13接种于魔芋粉培养基中，使培养基中初始细菌HDYM-13浓度为1.0×106～2.0×106个/mL；二、在温度为30～38℃的条件下，发酵培养30～60h，然后离心，取上清液即获得果胶酶；其中，步骤一魔芋粉培养基按1.5～2g魔芋粉、0.3～1mL冰乙酸、0.2～0.5g硫酸铵、0.5g氯化钠和100mL自来水的比例制成。本实施方式发酵培养基中无纤维素酶活性。具体实施方式二：本实施方式与具体实施方式一的不同点是：所述魔芋粉培养基的pH值为5.5～6.5。其它步骤及参数与实施方式一相同。具体实施方式三：本实施方式与具体实施方式一或二的不同点是：步骤二离心的转速为3500～5000r/min。其它步骤及参数与实施方式一或二相同。具体实施方式四：本实施方式与具体实施方式一、二或三的不同点是：步骤二在温度为34～36℃的条件下，培养35～50h。其它步骤及参数与实施方式一、二或三相同。具体实施方式五：本实施方式与具体实施方式一、二或三的不同点是：步骤二在温度为35℃的条件下，培养40～45h。其它步骤及参数与实施方式一、二或三相同。实施例1共养生孢菌属细菌产果胶酶的方法，按以下步骤进行：一、将共养生孢菌属(Syntrophosporasp.)细菌HDYM-13接种于魔芋粉培养基中，使培养基中初始细菌HDYM-13浓度为1.5×106个/mL；所述魔芋粉培养基按2g魔芋粉、1mL冰乙酸、0.5g硫酸铵、0.5g氯化钠和100mL自来水比例混合制成，魔芋粉培养基的pH值为6.0；二、在温度为35℃的条件下，发酵培养35h，然后3500r/min离心，取上清即获得果胶酶。本实施例获得的上清液中果胶酶活力为3400U/mL，纤维素酶活力＜10U/mL。实施例2共养生孢菌属细菌产果胶酶的方法，按以下步骤进行：一、将共养生孢菌属(Syntrophosporasp.)细菌HDYM-13接种于魔芋粉培养基中，使培养基中初始细菌HDYM-13浓度为1.5×106个/mL；所述魔芋粉培养基按2g魔芋粉、0.5mL冰乙酸、0.2g硫酸铵、0.5g氯化钠和100mL自来水比例混合制成，魔芋粉培养基的pH值为6.0；二、在温度为35℃的条件下，发酵培养35h，然后5000r/min离心，取上清即获得果胶酶。本实施例获得的上清液中果胶酶活力为2600U/mL。实施例3共养生孢菌属细菌产果胶酶的方法，按以下步骤进行：一、将共养生孢菌属(Syntrophosporasp.)细菌HDYM-13接种于魔芋粉培养基中，使培养基中初始细菌HDYM-13浓度为1.5×106个/mL；所述魔芋粉培养基按1.5g魔芋粉、0.3mL冰乙酸、0.5g硫酸铵、0.5g氯化钠和100mL自来水比例混合制成，魔芋粉培养基的pH值为6.0；二、在温度为35℃的条件下，发酵培养35h，然后4000r/min离心，取上清即获得果胶酶。本实施例获得的上清液中果胶酶活力为2500U/mL。实施例4实验1，果胶培养基：一、将共养生孢菌属(Syntrophosporasp.)细菌HDYM-13接种于果胶培养基中，使培养基中初始细菌HDYM-13浓度为1.5×106个/mL；所述果胶培养基按4g果胶、3g蛋白胨、15～20g琼脂、5g氯化钠和1000mL蒸馏水比例混合制成，果胶培养基的pH值为7.0～7.2；二、在温度为37℃的条件下，发酵培养48h，然后4000r/min离心，取上清液。本实施例获得的上清液中果胶酶活力＜10U/mL。实验2，营养琼脂培养基：一、将共养生孢菌属(Syntrophosporasp.)细菌HDYM-13接种于营养琼脂培养基中，使培养基中初始细菌HDYM-13浓度为1.5×106个/mL；所述营养琼脂培养基按3g牛肉膏、5g蛋白胨、18g琼脂、5g氯化钠和1000mL蒸馏水比例混合制成，营养琼脂培养基的pH值为7.0～7.2；二、在温度为37℃的条件下，发酵培养48h，然后4000r/min离心，取上清液。本实施例获得的上清液中果胶酶活力＜10U/mL。实验3，富集培养基：一、将共养生孢菌属(Syntrophosporasp.)细菌HDYM-13接种于富集培养基中，使培养基中初始细菌HDYM-13浓度为1.5×106个/mL；所述富集培养基按3g牛肉膏、3g蛋白胨、2～4g果胶、15～18g琼脂、5g氯化钠和1000mL蒸馏水比例混合制成，富集培养基的pH值为7.0～7.2；二、在温度为37℃的条件下，发酵培养48h，4000r/min然后离心，取上清液。本实施例获得的上清液中果胶酶活力＜10U/mL。实验4，发酵培养基：一、将共养生孢菌属(Syntr本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种利用共养生孢菌属细菌产果胶酶的方法，其特征在于利用共养生孢菌属细菌产果胶酶的方法按以下步骤进行：一、将共养生孢菌属细菌HDYM‑13接种于魔芋粉培养基中，使培养基中初始细菌HDYM‑13浓度为1.0×106～2.0×106个/mL；二、在温度为30～38℃的条件下，发酵培养30～60h，然后离心，取上清液即获得果胶酶；其中，步骤一魔芋粉培养基按1.5～2g魔芋粉、0.3～1mL冰乙酸、0.2～0.5g硫酸铵、0.5g氯化钠和100mL自来水的比例制成。

【技术特征摘要】
1.一种利用共养生孢菌属细菌产果胶酶的方法，其特征在于利用共养生孢菌属细菌产果胶酶的方法按以下步骤进行：一、将共养生孢菌属细菌HDYM-13接种于魔芋粉培养基中，使培养基中初始细菌HDYM-13浓度为1.0×106～2.0×106个/mL；二、在温度为30～38℃的条件下，发酵培养30～60h，然后离心，取上清液即获得果胶酶；其中，步骤一魔芋粉培养基按1.5～2g魔芋粉、0.3～1mL冰乙酸、0.2～0.5g...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵丹，葛菁萍，平文祥，凌宏志，宋刚，冯永刚，
申请(专利权)人：黑龙江大学，
类型：发明
国别省市：黑龙江,23