一种嗜热真菌角质酶及其编码基因与应用制造技术

本发明专利技术公开了一种嗜热真菌角质酶及其编码基因与应用。该角质酶是如下1)或2)或3)的蛋白质：1)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；2)序列表序列2自氨基末端第17至215位所示的氨基酸序列组成的蛋白质；3)将1)或2)所示的蛋白质经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有角质酶活性的蛋白质。将该蛋白质的编码基因导入巴斯德毕赤酵母中构成的重组菌在5L发酵罐中进行高密度发酵，发酵液的酶活力可达12536U/mL，蛋白质含量为10.8mg/mL。该角质酶能够水解黄油制备奶味香精；催化短碳链醇和酸的酯化反应合成风味酯。该角质酶热稳定性好，产酶水平高，具有工业化生产及应用的潜力。

A thermophilic fungal keratinase and its coding genes and Application

The invention discloses a thermophilic fungal cutin enzyme and its coding gene and application. The keratinase is the following 1) or 2) or 3) protein: 1) a protein consisting of the amino acid sequence shown in sequence 2 of the sequence table; 2) a protein consisting of the amino acid sequence shown at positions 17 to 215 of the amino acid terminal; 3) a protein represented by 1) or 2 that is substituted and/or deleted by one or more amino acid residues And / or proteins that are added and have horniness. The recombinant yeast strain composed of the gene encoding the protein was transfected into Pichia pastoris for high-density fermentation in a 5L fermentor. The enzyme activity and protein content of the fermentation broth reached 125 36U/mL and 10.8mg/mL respectively. The keratinase can hydrolyze butter to prepare milk flavor and catalyze esterification of short chain alcohols and acids to synthesize flavor esters. The cutin enzyme has good thermal stability and high enzyme production, and has potential for industrial production and application.

【技术实现步骤摘要】
一种嗜热真菌角质酶及其编码基因与应用
本专利技术涉及一种嗜热真菌樟绒枝霉角质酶及其编码基因与应用，属于生物

技术介绍
角质酶(EC3.1.1.74)是一种能够降解角质的水解酶，是α/β水解酶家族中分子量较小的成员。角质酶具有广泛的底物特异性，能够水解可溶性酯、不溶性甘油三酯和天然聚酯等；此外，角质酶还可以催化酯化反应和转酯化反应。因此，角质酶在食品工业、纺织工业、生物降解、洗涤剂、合成生物柴油等诸多领域都有广泛的应用(张效宁等.角质酶的研究与应用进展,中国酿造,2013,32(11):11-17)。在食品工业中，角质酶可以催化酯化和转酯化反应合成风味酯(Dutta&Dasu,SynthesisofshortchainalkylestersusingcutinasefromBurkholderiacepaciaNRRLB2320.JournalofMolecularCatalysisB:Enzymatic,2011,72:150-156；Xuetal.,Characterizationofanacidiccold-adaptedcutinasefromThielavi本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种蛋白质，是如下1)或2)或3)所述的蛋白质：1)序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；2)序列表中序列2自氨基末端第17至215位所示的氨基酸序列组成的蛋白质；3)将1)或2)所述的蛋白质经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有角质酶活性的蛋白质。

【技术特征摘要】
1.一种蛋白质，是如下1)或2)或3)所述的蛋白质：1)序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；2)序列表中序列2自氨基末端第17至215位所示的氨基酸序列组成的蛋白质；3)将1)或2)所述的蛋白质经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有角质酶活性的蛋白质。2.编码权利要求1所述蛋白质的核酸分子。3.如权利要求2所述的核酸分子，其特征在于：所述核酸分子为DNA分子或RNA分子；所述DNA为cDNA、基因组DNA或重组DNA；所述RNA为mRNA或hnRNA。4.如权利要求3所述的核酸分子，其特征在于：所述DNA分子为如下1)或2)或3)所述的DNA分子：1)序列表中序列1所示的核苷酸序列组成的DNA分子；2)与1)限定的核苷酸序列具有75％或75％以上同一性，且编码权利要求1所述蛋白质的DNA分子；3)在严格条件下与1)或2)限定的核苷酸序列杂交，且编码权利要求1所述蛋白质的DNA分子。5.含有权利要求2或3或4所述核酸分子的表达盒、重组载体、重组菌或转基因植物。6.如权利要求5所述的核酸分子的表达盒、重组载体、重组菌或转基因植物，其特征在于：所述重组载体是在pPIC9K的多克隆位点插入序列表中序列1所示的核苷酸序列得到的重组质粒pPIC9K-McCut；所述重组菌通...

【专利技术属性】
技术研发人员：江正强，段晓杰，闫巧娟，刘瑜，杨绍青，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：北京,11