PARP抑制剂在促进定向内胚层产生中的作用制造技术

本发明专利技术涉及化合物在制备药物中的用途，该化合物用于抑制PARP的催化活性，该药物用于促进胚胎干细胞向内胚层细胞的分化或促进拟胚体向内胚层的分化。该药物可以有效提高胚胎干细胞向内胚层细胞或拟胚体向内胚层定向分化的效率。

【技术实现步骤摘要】
PARP抑制剂在促进定向内胚层产生中的作用
本专利技术涉及生物医药领域，具体地，本专利技术涉及化合物在制备药物中的用途，更具体地，本专利技术涉及化合物在制备药物中的用途、促进胚胎干细胞向内胚层细胞分化的方法以及筛选药物的方法。
技术介绍
胚胎干细胞(embryonicstemcell，ESCs，简称ES细胞)是早期胚胎(原肠胚期之前)或原始性腺中分离出来的一类细胞，它具有体外培养无限增殖、自我更新和多向分化的特性。无论在体外还是体内环境，胚胎干细胞都能被诱导分化为机体几乎所有的细胞类型，因此，胚胎干细胞具有应用于再生性治疗的巨大潜力。内胚层细胞是形成身体内部器官(包括肺部、胰腺和肝脏等)的三个主要胚层之一。胚胎干细胞是否能够高效定向分化为内胚层细胞是针对这些器官开发再生性治疗方法的关键性一步。因此，提高胚胎干细胞定向分化为内胚层细胞的效率的方法急需研究。
技术实现思路
本申请是基于专利技术人对以下事实和问题的发现和认识做出的：如何促进胚胎干细胞向内胚层细胞进行定向分化或促进拟胚体向内胚层分化，或者如何简便地筛选获得能够促进胚胎干细胞向内胚层细胞进行定向分化的药物，是一直以来困扰无数研究人员的难题。基于上述问题，专利技术人经过无数实验探索后发现，PARP的催化活性在胚胎干细胞向内胚层细胞分化的过程中发挥着重要的作用，通过抑制该蛋白酶的催化活性能够有效提高胚胎干细胞向内胚层细胞定向分化的效率。为此，在本专利技术的第一方面，本专利技术提出了化合物在制备药物中的用途，所述化合物用于抑制PARP的催化活性，所述药物用于促进胚胎干细胞向内胚层细胞的定向分化或促进拟胚体向内胚层的定向分化，提高胚胎干细胞向内胚层细胞定向分化或拟胚体向内胚层定向分化的效率。其中，PARP是poly(ADP-ribose)polymerase的缩写，指的是聚(ADP-核糖)聚合酶，是一种蛋白酶的统称。根据本专利技术的实施例，上述用途还可进一步包括如下附加技术特征至少之一：根据本专利技术的实施例，所述促进胚胎干细胞向内胚层细胞的分化或促进拟胚体向内胚层的分化是通过下述的至少之一实现的：提高内胚层细胞分子标记物的表达效率和/或表达量；提高内胚层转录因子的表达水平。根据本专利技术的实施例，所述内胚层细胞分子标记物包括选自CXCR4+和C-KIT+。根据本专利技术的实施例，所述内胚层转录因子包括选自FOXA2+和SOX17+。根据本专利技术的实施例，所述PARP包括选自PARP1、PARP2的至少之一，即所述化合物抑制PARP的催化活性是通过抑制PARP1、PARP2的至少之一的催化活性实现的。根据本专利技术的实施例，所述化合物为式1所示化合物或式1所示化合物的立体异构体、几何异构体、互变异构体、氮氧化物、水合物、溶剂化物、代谢产物、药学上可接受的盐或前药，其中：A环为3-12个原子组成的碳环、5-12个原子组成的杂环、苯环或5-12个原子组成的杂芳环，或A环不存在；m为0、1、2、3、4、5或6；n为0、1、2、3或4；X和Y分别独立地为CH或N；各R1和R2分别独立地为H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-OH、-NH2、氧代、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6烯硫基、R4R4a-C(＝O)-、R4R4aN-、R4R4aN-C(＝O)-、R4a-C(＝O)-R4N-、C6-10芳基、C6-10芳氨基、5-12个原子组成的杂芳基或3-12个原子组成的杂环基，或相邻的两个R1或相邻的两个R2和与它们相连的原子一起形成取代或未取代的3-12个原子组成的碳环、3-12个原子组成的杂环、苯环或5-12个原子组成的杂芳环，所述各R1和R2独立任选地被一个或多个R3所取代；各R4和R4a分别独立地为H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-OH、-NH2、氧代、NH2-C(＝O)-、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6烯硫基、C6-10芳基、C6-10芳氨基、5-12个原子组成的杂芳基或3-12个原子组成的杂环基；各R3分别独立地为H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-OH、-NH2、氧代、NH2-C(＝O)-、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6烯硫基、C6-10芳基、C6-10芳氨基、5-12个原子组成的杂芳基或3-12个原子组成的杂环基。根据本专利技术的实施例，所述化合物为式2～4至少之一所示化合物或式2～4至少之一所示化合物的立体异构体、几何异构体、互变异构体、氮氧化物、水合物、溶剂化物、代谢产物、药学上可接受的盐或前药，根据本专利技术的实施例，各被R3取代的R1和R2分别独立地为H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-OH、-NH2、氧代、NH2-C(＝O)-、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基或叔丁氧基。根据本专利技术的实施例，各被R3取代的R1和R2分别独立地为H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-OH、-NH2、氧代、NH2-C(＝O)-、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基或叔丁氧基。根据本专利技术的实施例，各R3分别独立地为H、D、-CN、-NO2、-OH、-NH2、F、Cl、Br、I、氧代、NH2-C(＝O)-、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基或叔丁氧基。根据本专利技术的实施例，所述化合物为式(1)～(8)至少之一所示化合物或式(1)～(8)至少之一所示化合物的立体异构体、几何异构体、互变异构体、氮氧化物、水合物、溶剂化物、代谢产物、药学上可接受的盐或前药，在本专利技术的第二方面，本专利技术提出了一种促进胚胎干细胞向内胚层细胞分化或促进拟胚体向内胚层分化的方法。根据本专利技术的实施例，所述方法包括：在适宜细胞分化的条件下，将胚胎干细胞或拟胚体与PARP抑制剂进行接触，以便促进所述胚胎干细胞向内胚层细胞进行分化或促进拟胚体向内胚层进行分化。需要说明的是，所述适宜细胞分化的条件是指适宜细胞生长、增殖和/或分化的各种条件，如根据本专利技术实施例的PARP抑制剂的各作用浓度、处理时间或细胞的培养环境(包括培养基、温度或O2氧气浓度等)等。根据本专利技术实施例的方法，可以有效提高胚胎干细胞定向分化为内胚层细胞或拟胚体分化为内胚层的效率。根据本专利技术的实施例，上述方法还可进一步包括如下附加技术特征至少之一：根据本专利技术的实施例，所述PARP抑制剂为将所述胚胎干细胞与浓度为5～50μM的所述PARP抑制剂进行接触不少于1天。专利技术人发现，所述浓度过低，促进效果不明显，所述浓度过高，内胚层细胞产生CXCR4+和C-KIT+的效率呈下降的趋势；所述接触时间过短，促进效果不明显。由此，在所述浓度和接触时间下，根据本专利技术实施例的方法可以有效提高胚胎干细胞定向分化为内胚层细胞或拟胚体分化为内本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.化合物在制备药物中的用途，所述化合物用于抑制PARP的催化活性，所述药物用于促进胚胎干细胞向内胚层细胞的分化或促进拟胚体向内胚层的分化。

【技术特征摘要】
1.化合物在制备药物中的用途，所述化合物用于抑制PARP的催化活性，所述药物用于促进胚胎干细胞向内胚层细胞的分化或促进拟胚体向内胚层的分化。2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述促进胚胎干细胞向内胚层细胞的分化或促进拟胚体向内胚层的分化是通过下述的至少之一实现的：提高内胚层细胞分子标记物的表达效率和/或表达量，以及提高内胚层转录因子的表达水平；任选地，所述PARP包括选自PARP1、PARP2的至少之一。3.根据权利要求2所述的用途，其特征在于，所述内胚层细胞分子标记物包括选自CXCR4+、C-KIT+的至少之一；任选地，所述内胚层转录因子包括选自FOXA2+、SOX17+的至少之一。4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述化合物为式1所示化合物或式1所示化合物的立体异构体、几何异构体、互变异构体、氮氧化物、水合物、溶剂化物、代谢产物、药学上可接受的盐或前药，其中：A环为3-12个原子组成的碳环、5-12个原子组成的杂环、苯环或5-12个原子组成的杂芳环，或A环不存在；m为0、1、2、3、4、5或6；n为0、1、2、3或4；X和Y分别独立地为CH或N；各R1和R2分别独立地为H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-OH、-NH2、氧代、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6烯硫基、R4R4a-C(＝O)-、R4R4aN-、R4R4aN-C(＝O)-、R4a-C(＝O)-R4N-、C6-10芳基、C6-10芳氨基、5-12个原子组成的杂芳基或3-12个原子组成的杂环基，或相邻的两个R1或相邻的两个R2和与它们相连的原子一起形成取代或未取代的3-12个原子组成的碳环、3-12个原子组成的杂环、苯环或5-12个原子组成的杂芳环，所述各R1和R2独立任选地被一个或多个R3所取代；各R4和R4a分别独立地为H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-OH、-NH2、氧代、NH2-C(＝O)-、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6烯硫基、C6-10芳基、C6-10芳氨基、5-12个原子组成的杂芳基或3-12个原子组成的杂环基；各R3分别独立地为H、D、F、Cl、Br、I、-CN、-NO2、-OH、-NH2、氧代、NH2-C(＝O)-、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6烯硫基、C6-10芳基、C6-10芳氨基、5-12个原子组成的杂芳基或3-12个原子组成的杂环基。5.根据权利要求4所述的用途，其特征在于，所述化合物为式2～4至少之一所示化合物或式2～4...

【专利技术属性】
技术研发人员：杜媛媛，江勇，
申请(专利权)人：杭州瑞普晨创科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33