一种多能干细胞来源的胰岛β细胞分离纯化方法技术

技术编号:40094547 阅读:28 留言:0更新日期:2024-01-23 16:44
本发明专利技术公开了一种多能干细胞来源的胰岛β细胞分离纯化方法:将多能干细胞来源的胰岛β细胞,以CD142作为细胞表面标志物,分选得到纯化后的胰岛β细胞。本发明专利技术采用单抗体磁珠分选,操作简便、对细胞没有损伤,分离效率高。磁珠分选通量高,速度快,利于工业化生产,所分离到的胰岛β细胞纯度高,而且双阴比例非常低,降低了未纯化的诱导分化胰岛β细胞致瘤的安全隐患,在临床研究中有较大的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物,涉及一种多能干细胞来源的胰岛β细胞分离纯化方法


技术介绍

1、多能干细胞(hipsc)是一类具有自我更新、无限增值的多潜能细胞,而且无相关的伦理和道德问题争议。在一定条件下多能干细胞能诱导分化为人体各个器官和组织所需要的各种细胞类型,为整个干细胞生物学领域和临床再生医学提供了新的研究方向。

2、2000年,加拿大埃德蒙特(edmonton)团队将胰岛移植成功应用于临床,标志着胰岛移植技术的成熟。但由于缺乏供体来源,免疫排斥和伦理问题等因素限制了其临床发展。

3、多能干细胞在细胞替代疗法、疾病建模和药物开发领域均具有极大潜力。利用多能干细胞无限增殖的潜能,可以解决胰岛移植中供体缺乏的问题。在特定条件下,将多能干细胞诱导分化为胰岛β细胞,植入糖尿病患者体内,以替代其受损的胰岛β细胞,恢复正常分泌胰岛素功能,可以从根本上治愈糖尿病。

4、然而在多能干细胞分化胰岛β细胞领域中,因现有的基础理论知识不完善和诱导分化技术不成熟等原因导致多能干细胞不能完全分化为胰岛β细胞,使得终末分化胰岛β细胞可能存在一定比例分本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种多能干细胞来源的胰岛β细胞分离纯化方法,其特征在于所述方法为:

2.如权利要求1所述的方法,其特征在于所述分选方法为磁珠分选。

3.如权利要求2所述的方法,其特征在于所述磁珠分选的方法为:

4.如权利要求3所述的方法,其特征在于所述消化成单细胞使利用Accutase酶消化多能干细胞来源的胰岛细胞,得到单细胞悬液。

5.如权利要求3所述的方法,其特征在于所述多能干细胞来源的胰岛细胞消化成单细胞的步骤包括:

6.如权利要求3所述的方法,其特征在于所述PE-CD142抗体与单细胞悬液的体积比为1:10~20

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【技术特征摘要】

1.一种多能干细胞来源的胰岛β细胞分离纯化方法,其特征在于所述方法为:

2.如权利要求1所述的方法,其特征在于所述分选方法为磁珠分选。

3.如权利要求2所述的方法,其特征在于所述磁珠分选的方法为:

4.如权利要求3所述的方法,其特征在于所述消化成单细胞使利用accutase酶消化多能干细胞来源的胰岛细胞,得到单细胞悬液。

5.如权利要求3所述的方法,其特征在于所述多能干细胞来源的胰岛细胞消化成单细胞的步骤包括:

6.如权利要求3所述的方法,其特征在于所述pe-cd142抗体与单细胞悬液的体积...

【专利技术属性】
技术研发人员:王小丰吴双双张云
申请(专利权)人:杭州瑞普晨创科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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