【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物处理，具体是一种适用于紫色土中paes降解的细菌、真菌选择方法。
技术介绍
1、邻苯二甲酸酯又名酞酸酯(paes)，是一类普遍使用的化学工业品，主要用作增塑剂，也应用于涂料、油漆、医疗产品、汽车玻璃、化妆品、杀虫剂等产品的生产过程中。近年来，由于paes类化合物的大量生产与广泛应用，导致其大量进入环境，在水、大气、土壤及生物体等各种环境介质中均有检出，现已成为最普遍的全球性污染物之一。paes类化合物具有环境雌激素效应，长期接触可对人类与动物的行为和生殖能力产生不良影响，部分paes类化合物(如邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯，dehp)还具有“三致”效应，对人体健康和生态系统安全构成极大威胁。
2、目前，paes降解菌主要获取方式是研究的重点。现有技术中已经有如何能够快速的培养出paes降解菌的方法，但是现有的方法均为为paes降解菌搭建最合适的生长环境，快速培育，导致培育出的微生物投入环境后，其对生存环境较为敏感，容易受到其它菌的污染和抑制，难以在复杂的环境中正常生长和发挥作用，从而难以成功应用于环境治理和修复，因此如何培养paes高适应性降解菌群，对建立筛选与培养方法对于paes污染环境的修复治理具有重要意义。
技术实现思路
1、本专利技术目的是提供一种适用于紫色土中paes降解的细菌、真菌选择方法，以解决现有技术中取样方法取得的细菌、真菌不能适应紫色土的自然环境。
2、为了实现上述目的，本专利技术的技术方案是：
3、一种适用
4、步骤s1：样本采集、处理；从紫色土区域中选取土壤样品，将土壤样品分离，去除土壤样品种的动植物残留去除，然后再对土壤样品进行粉碎，装入培养皿中，使用无菌水将土壤样品润湿，封存；
5、步骤s2：将土壤样品放置到若干个环境模拟箱内；
6、步骤s3：环境模拟；收集样本采集处的土壤环境，并将样本采集处的土壤环境同步到所有的环境模拟箱内；
7、步骤s4：若干个环境模拟箱内加入不同分量的含paes的无机盐，再加入无菌水，随后将锥形瓶置于摇床中，在模拟的环境下振荡培养9-24h，得到上清液；
8、步骤s5：将上清液转接不含paes的无机盐培养基中，在模拟环境下振荡培养7d-10d，相同条件下培养至少5代，获得稳定的适用于紫色土中paes降解的细菌、真菌。
9、进一步的，所述无机盐培养基为以paes为唯一碳源的无机盐培养基。
10、进一步的，步骤s5中不含paes的无机盐培养基由1.5g/l的(nh4)2so4、0.5g/l的kh2po4、1.91g/l的k2hpo4·3h2o、0.5g/l的nacl以及0.2g/l的mgso4·7h2o组成；ph与取样环境保持一致。
11、进一步的，所述paes为邻苯二甲酸二甲酯和/或邻苯二甲酸二乙酯和/或邻苯二甲酸二丁酯和/或邻苯二甲酸丁基苄酯和/或邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯和/或邻苯二甲酸二正辛酯。
12、进一步的，所述紫色土区域中选取土壤样品的至少有2处。
13、进一步的，步骤s4中，paes的无机盐加入无菌水后，上清液中paes终浓度为50mg·l-150mg·l，土壤样品浓度为0.04～0.06g/ml。
14、进一步的，步骤s5中，上清液与不含paes的无机盐培养基的体积比为1～6:80～90.
15、进一步的，环境模拟箱内的环境与紫色土区域的取样处的环境一致，环境保持一致的方法为，监测紫色土区域的取样处的温度、湿度，监测时间为1～3d，温度、湿度、有机物含量均取时间段内的平均值，按照温度、湿度含量时间段内的平均值调整环境模拟箱内的温度、湿度。
16、与现有技术相比，本专利技术具有的优点和积极效果是：
17、本专利技术的环境模拟箱内的环境与紫色土区域的尽量的与取样处的天然环境保持一致，通过监测紫色土区域的取样处的温度、湿度等天然条件，调整环境模拟箱内的温度、湿度等模拟条件，并且环境模拟箱内的土壤样品的ph与取样环境保持一致，尽可能的模拟紫色土的自然环境，进而优选出可适应紫色土自然环境的细菌、真菌，使得优选出的细菌、真菌可以存活的时间更长，能够更长时间的降解污染源，提高实用性。
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1.一种适用于紫色土中PAEs降解的细菌、真菌选择方法，其特征在于：包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的适用于紫色土中PAEs降解的细菌、真菌选择方法，其特征在于：所述无机盐培养基为以PAEs为唯一碳源的无机盐培养基。
3.根据权利要求2所述的适用于紫色土中PAEs降解的细菌、真菌选择方法，其特征在于：步骤S5中不含PAEs的无机盐培养基由1.5g/L的(NH4)2SO4、0.5g/L的KH2PO4、1.91g/L的K2HPO4·3H2O、0.5g/L的NaCl以及0.2g/L的MgSO4·7H2O组成；pH与取样环境保持一致。
4.根据权利要求1所述的适用于紫色土中PAEs降解的细菌、真菌选择方法，其特征在于：所述PAEs为邻苯二甲酸二甲酯和/或邻苯二甲酸二乙酯和/或邻苯二甲酸二丁酯和/或邻苯二甲酸丁基苄酯和/或邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯和/或邻苯二甲酸二正辛酯。
5.根据权利要求1所述的适用于紫色土中PAEs降解的细菌、真菌选择方法，其特征在于：所述紫色土区域中选取土壤样品的至少有2处。
6.根据权利要求1所述
7.根据权利要求1所述的适用于紫色土中PAEs降解的细菌、真菌选择方法，其特征在于：步骤S5中，上清液与不含PAEs的无机盐培养基的体积比为1～6:80～90。
8.根据权利要求1所述的适用于紫色土中PAEs降解的细菌、真菌选择方法，其特征在于：环境模拟箱内的环境与紫色土区域的取样处的环境一致，环境保持一致的方法为，监测紫色土区域的取样处的温度、湿度，监测时间为1～3d，温度、湿度、有机物含量均取时间段内的平均值，按照温度、湿度含量时间段内的平均值调整环境模拟箱内的温度、湿度。
...【技术特征摘要】
1.一种适用于紫色土中paes降解的细菌、真菌选择方法，其特征在于：包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的适用于紫色土中paes降解的细菌、真菌选择方法，其特征在于：所述无机盐培养基为以paes为唯一碳源的无机盐培养基。
3.根据权利要求2所述的适用于紫色土中paes降解的细菌、真菌选择方法，其特征在于：步骤s5中不含paes的无机盐培养基由1.5g/l的(nh4)2so4、0.5g/l的kh2po4、1.91g/l的k2hpo4·3h2o、0.5g/l的nacl以及0.2g/l的mgso4·7h2o组成；ph与取样环境保持一致。
4.根据权利要求1所述的适用于紫色土中paes降解的细菌、真菌选择方法，其特征在于：所述paes为邻苯二甲酸二甲酯和/或邻苯二甲酸二乙酯和/或邻苯二甲酸二丁酯和/或邻苯二甲酸丁基苄酯和/或邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯和/或邻苯二甲酸二正辛酯。
5.根据权利要求1所...
【专利技术属性】
技术研发人员：李雨桐，柏宏成，余海，曹俊，刘智梅，王娟，赖力，郭宇，
申请(专利权)人：重庆市生态环境科学研究院，
类型：发明
国别省市：
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