The invention belongs to the field of biotechnology. The invention discloses a group of RING-mediated isothermal amplification detection primers for chicken type II stellate virus. According to the conservative sequence of chicken type II stellate virus genome, the primers are designed as follows: external primers F 3 and B3, SEQ ID NO.1, SEQ ID NO.2; internal primers FIP and BIP, SEQ ID NO.3, SEQ ID NO.4. The invention also discloses a chicken stellate virus type II detection kit, including the primers mentioned above. The invention also discloses a RING-mediated isothermal amplification detection method for chicken type II stellate virus: a RING-mediated isothermal amplification method for detecting chicken type II stellate virus is established according to the designed primers. The detection method of the invention has the advantages of fast, high efficiency, strong specificity, good accuracy, high sensitivity, no expensive instrument and equipment, and is convenient for field use at the grass-roots level, and is convenient and fast.
【技术实现步骤摘要】
鸡Ⅱ型星状病毒环介导等温扩增检测引物组、试剂盒及其检测方法
本专利技术涉及一种鸡星状病毒环介导等温扩增检测引物组、试剂盒及其检测方法,属于生物
技术介绍
星状病毒科(Astroviridae)分为哺乳动物星状病毒属(Mamastrovirus)和禽星状病毒属(Avastrovirus),其中禽星状病毒属分为3个种,分别为禽星状病毒GI.A型、禽星状病毒GI.B型和禽星状病毒GII.A型。根据不同来源和基因型,在家禽中鉴定出来6种不同的星状病毒,包括两种鸡源星状病毒(禽肾炎病毒(ANV)和鸡星状病毒(CAstV))、两种火鸡源星状病毒(TAstV-1和TAstV-2)和两种鸭源星状病毒(DAstV-1和DAstV-2)。星状病毒是单股正链、无囊膜的小RNA病毒,其基因组长度为6.5-7.5kb,有3个开放阅读框(ORF),包括阅读框编码的无囊膜蛋白(ORF1a)、病毒RNA依赖的RNA聚合酶(ORF1b)和衣壳蛋白(ORF2)。其复制方式与其他肠道病毒在合成次基因组时是截然不同的,在ORF1与ORF2之间存在一个含有丝氨酸蛋白酶的反转录移框信号序列,ORF1a和ORF1b之间有一个移动框结构,ORF1编码一种蛋白酶和RNA依赖的RNA聚合酶,ORF2表达亚基因组RNA,编码病毒的衣壳蛋白,不同血清型之间的结构长短不一。鸡星状病毒(CAstV)是一种极易在1-5周龄幼禽中流行的肠道病毒,常与其他肠道病毒发生混合感染。对鸡群肠道病毒感染情况进行持续监测,发现检测到的首个阳性样本往往就是星状病毒或星状病毒与其他病毒的混合感染。检测该病毒的感染情况对于疾病 ...
【技术保护点】
1.一种鸡Ⅱ型星状病毒环介导等温扩增检测引物组,其特征在于:所述的引物组由1对外引物F3和B3、1对内引物FIP和BIP组成,F3、 B3、FIP、BIP引物序列如下:CAstV Ⅱ‑F3:5’‑CTGTGGCATGACGATTACGA‑3’;CAstV Ⅱ‑B3:5’‑TCGACGCAATTGATCTGCTT‑3’;CAstV Ⅱ‑FIP:5’‑GAGCGCTTTGTAGGACCTCGCATGGTCTTATGTCGGA‑3’;CAstV Ⅱ‑BIP:5’‑ATCGAGCACTGGGGGTAAGTAGTCCTTTACGTCGGATCT‑3。
【技术特征摘要】
1.一种鸡Ⅱ型星状病毒环介导等温扩增检测引物组,其特征在于:所述的引物组由1对外引物F3和B3、1对内引物FIP和BIP组成,F3、B3、FIP、BIP引物序列如下:CAstVⅡ-F3:5’-CTGTGGCATGACGATTACGA-3’;CAstVⅡ-B3:5’-TCGACGCAATTGATCTGCTT-3’;CAstVⅡ-FIP:5’-GAGCGCTTTGTAGGACCTCGCATGGTCTTATGTCGGA-3’;CAstVⅡ-BIP:5’-ATCGAGCACTGGGGGTAAGTAGTCCTTTACGTCGGATCT-3。2.鸡Ⅱ型星状病毒检测试剂盒,包括权利要求1所述的鸡Ⅱ型星状病毒环介导等温扩增检测引物组、SYBRGreenⅠ荧光染料、2×反应缓冲液、BstDNA聚合酶、超纯水。3.如权利要求2所述的鸡Ⅱ型星状病毒检测试剂盒的LAMP检测方法,其特...
【专利技术属性】
技术研发人员:钱琨,乔丹丹,武宗仪,秦爱建,邵红霞,叶建强,金文杰,
申请(专利权)人:扬州大学,
类型:发明
国别省市:江苏,32
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