鞘内施用腺伴随病毒载体用于基因治疗制造技术

描述了经配制用于鞘内递送至中枢神经系统的包含至少一种AAV载体的组合物。所述组合物包含至少一个表达盒和药学上可接受的载体，所述表达盒含有与其表达控制序列连接的编码免疫球蛋白构建体的序列。免疫球蛋白构建体可以是经修饰以对新生Fc受体(FcRn)具有降低的或不可测量的亲和力的免疫球蛋白。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】鞘内施用腺伴随病毒载体用于基因治疗以电子形式提交的材料的通过引用并入申请人在此通过引用并入随同提交的序列表材料。专利技术背景生物医学和药物研究人员已致力于设计新的且更有效的治疗剂来治疗影响中枢神经系统的疾病。然而，中枢神经系统本身的生物学特性，包括血脑屏障在保护大脑方面的有效性，对药物递送提出了严峻的挑战。这导致缺乏许多中枢神经系统疾病诸如中风、神经变性疾病和脑肿瘤的可用治疗。神经变性是神经元的结构或功能的进行性丧失(包括神经元的死亡)的涵盖性术语。许多神经变性疾病，包括肌萎缩性侧索硬化症(ALS)、帕金森氏病、阿尔茨海默氏病和亨廷顿氏病是神经变性过程的结果。已经描述了用于治疗此类神经变性疾病的各种疗法，包括单克隆抗体疗法。腺伴随病毒(AAV)是一种复制缺陷型细小病毒，其单链DNA基因组长度为约4.7kb，包括145个核苷酸反向末端重复(ITRs)。AAV血清型2(AAV2)基因组的核苷酸序列呈现于Srivastava等人,JVirol,45:555-564(1983)中，其通过Ruffing等人,JGenVirol,75:3385-3392(1994)校正。ITRs内含有指导病毒DNA复制(rep)、封装/包装和宿主细胞染色体整合的顺式作用序列。三个AAV启动子(针对它们的相对图谱位置命名为p5、p19和p40)驱动编码rep和cap基因的两个AAV内部开放阅读框的表达。两个rep启动子(p5和pi9)，连同单一AAV内含子的差异剪接(在核苷酸2107和2227处)，导致从rep基因产生四种rep蛋白(rep78、rep68、rep52和rep40)。Rep蛋白具有最终负责复制病毒基因组的多种酶促特性。cap基因由p40启动子表达并编码三种衣壳蛋白VP1、VP2和VP3。选择性剪接和非共有翻译起始位点负责产生三种相关的衣壳蛋白。单一共有聚腺苷酸化位点位于AAV基因组的图谱位置95处。AAV的生命周期和遗传学综述于Muzyczka,CurrentTopicsinMicrobiologyandImmunology,158:97-129(1992)中。AAV基因组的编码序列可以反式提供，使得可能生成携带目标基因、而不是内源病毒基因的AAV载体。这些AAV载体能够在体内进行基因转移。存在多种AAV的血清型，并且提供不同的组织嗜性。已知血清型包括例如AAVl、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、AAV10和AAV1。AAV9描述于美国专利号7,198,951和Gao等人,J.Virol,78:6381-6388(2004)。已经描述了携带靶向SOD1的单链可分泌ScFv抗体的AAV载体的鞘内施用作为ALS的潜在治疗方法。参见，例如，PPatel等人,MolecularTherapy(2014):22,3,498-510。需要用于将免疫球蛋白构建体(包括但不限于全长抗体)递送至中枢神经系统的其他方法。专利技术概述提供了经配制用于鞘内递送至中枢神经系统的包含AAV载体的组合物，其中所述组合物包含至少一个表达盒和药学上可接受的载体和/或赋形剂，所述表达盒含有与其表达控制序列可操作连接的编码用于递送至CNS的免疫球蛋白产物的序列。在一个方面，所述组合物在不存在血脑屏障的化学或物理破坏的情况下施用。在一个实例中，免疫球蛋白构建体包含经修饰以对新生Fc受体(FcRn)具有降低的或不可测量的亲和力的免疫球蛋白。在一个方面，描述了经配制用于鞘内递送用于治疗中枢神经系统的病况的包含AAV载体的组合物，其中所述组合物包含AAV载体，所述AAV载体包含靶向中枢神经系统的细胞的AAV衣壳，所述衣壳其中已经包装至少一个AAV反向末端重复序列和与其表达控制序列可操作连接的编码免疫球蛋白构建体的序列，所述组合物进一步包含药学上可接受的载体和/或赋形剂。合适地，编码的免疫球蛋白被突变或工程改造以对新生Fc受体(FcRn)具有降低的或不可测量的亲和力。本文提供了包含编码免疫球蛋白构建体的至少一种AAV载体储备物的组合物可用于治疗神经病症和/或中枢神经系统的感染性疾病的用途。在另一个方面，提供了治疗阿尔茨海默氏病的方法，其涉及向有需要的主体鞘内递送如本文所述的AAV载体组合物，其中至少一种AAV载体储备物表达对Aβ、β分泌酶和/或tau蛋白特异性的免疫球蛋白。在又另一个方面，提供了治疗ALS的方法，其涉及鞘内递送如本文所述的AAV载体组合物，其中至少一种AAV载体储备物表达对ALS酶超氧化物歧化酶1(SOD1)及其变体（条件是抗SOD1抗体不是ScFv片段）、Derlin-1-结合区域特异性的免疫球蛋白和/或针对神经突增生抑制剂的抗体构建体。在又另一个实施方案中，提供了用于治疗帕金森氏病或相关突触核蛋白病的方法，其涉及鞘内递送如本文提供的AAV载体组合物，其中至少一种AAV载体储备物编码一种或多种富含亮氨酸的重复激酶2抗体、dardarin(LRRK2)抗体、α-突触核蛋白抗体和/或DJ-1(PARK7)抗体。在又一个进一步方面，本文提供了治疗多发性硬化症的方法，其涉及鞘内递送如本文提供的AAV载体组合物，在所述组合物中，至少一种载体储备物编码针对a4-整联蛋白、CD20、CD25、IL12、p40+IL23p40、LINGO-1、CD40和rHIgM22、CD52、IL17、CD19和/或SEMA4D中的一种或多种的免疫球蛋白。在另一个方面，提供了用于治疗中枢神经系统的感染性疾病的方法，其涉及鞘内递送如本文提供的AAV载体组合物，在所述组合物中，至少一种载体储备物编码针对引起所述感染性疾病的病原体的免疫球蛋白。实例非限制性地包括一种或多种针对结核分枝杆菌(结核病)、脑膜炎奈瑟氏菌(脑膜炎)、肺炎链球菌、单核细胞增生李斯特菌(李斯特菌病)、伯氏疏螺旋体(莱姆病)、人缺陷病毒(获得性免疫缺陷综合征)、疱疹家族病毒、水痘带状疱疹病毒、EB病毒(EBV)、巨细胞病毒和/或JC病毒中的一种或多种的免疫球蛋白。免疫球蛋白靶标的其他实例在本申请中别处提供，并且通过引用并入本文。在一个方面，提供了用于治疗朊病毒相关疾病的方法，其包括鞘内递送AAV载体组合物，其中至少一种载体储备物编码针对一种或多种主要朊病毒蛋白或PrPSc的免疫球蛋白。从以下专利技术详述，本专利技术的还有其他方面和优点将是显而易见的。附图简述图1A是显示接受通过枕骨下穿刺鞘内递送的表达鸡β-肌动蛋白(CB)启动子下的免疫粘附素的AAV9载体的两只动物的脑脊液(CSF)中的恒河猴来源的免疫粘附素(201IA)的浓度的图。在载体施用后定期收集CSF，其中400天是所示的最后收集时间点。CSF的规模最高达800ng/mL。图1B是显示接受通过枕骨下穿刺鞘内递送的表达鸡β-肌动蛋白(CB)启动子下的免疫粘附素的AAV9载体的两只动物的血清中的恒河猴来源的免疫粘附素(201IA)的浓度的图。在载体施用后定期收集血清，其中400天是所示的最后收集时间点。血清的浓度规模最高达120µg/mL。专利技术详述本文所述的组合物和方案可用于将免疫球蛋白构建体递送至中枢神经系统。本文所述的组合物包含AAV，所述AAV具有用于鞘内递送至中枢神经系统(CNS)的免疫球蛋白构建体。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.经配制用于鞘内递送用于治疗神经变性病症的组合物，其包含至少一种AAV载体，所述神经变性病症选自帕金森氏病、肌萎缩性侧索硬化症(ALS)、多发性硬化症、阿尔茨海默氏病、亨廷顿病、创伤性脑损伤、脊髓损伤、偏头痛、中风和/或感染性疾病中的一种或多种，其中所述组合物包含AAV载体，所述AAV载体包含靶向中枢神经系统的细胞的AAV衣壳，所述衣壳其中已经包装至少一个AAV反向末端重复序列和与其表达控制序列可操作连接的编码免疫球蛋白构建体的序列，所述组合物进一步包含药学上可接受的载体和/或赋形剂。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.10.28 US 62/2474981.经配制用于鞘内递送用于治疗神经变性病症的组合物，其包含至少一种AAV载体，所述神经变性病症选自帕金森氏病、肌萎缩性侧索硬化症(ALS)、多发性硬化症、阿尔茨海默氏病、亨廷顿病、创伤性脑损伤、脊髓损伤、偏头痛、中风和/或感染性疾病中的一种或多种，其中所述组合物包含AAV载体，所述AAV载体包含靶向中枢神经系统的细胞的AAV衣壳，所述衣壳其中已经包装至少一个AAV反向末端重复序列和与其表达控制序列可操作连接的编码免疫球蛋白构建体的序列，所述组合物进一步包含药学上可接受的载体和/或赋形剂。2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述免疫球蛋白构建体选自单链可变片段抗体(scFv)、Fv、Fab、F(ab)2、F(ab)3、Fab'、Fab'-SH、F(ab')2、免疫粘附素、单克隆抗体、重链骆驼或鲨鱼免疫球蛋白。3.根据权利要求1所述的组合物，其中所述病症是阿尔茨海默氏病且所述组合物包含至少一种载体储备物，其表达对Aβ、β分泌酶和/或tau蛋白特异性的免疫球蛋白。4.根据权利要求3所述的组合物，其中所述免疫球蛋白是scFv。5.根据权利要求4所述的组合物，其中所述scFv具有选自SEQIDNO:8、SEQIDNO:10或SEQIDNO:12的氨基酸序列。6.根据权利要求1至5中的任一项所述的组合物，其中所述组合物包含AAV储备物，其包含至少两种不同的抗体表达盒。7.根据权利要求1至7中的任一项所述的组合物，其中所述组合物包含AAV储备物，其包含单一免疫球蛋白表达盒。8.根据权利要求1所述的组合物，其中所述组合物鞘内递送并治疗中枢神经系统中的病况和全身性病况.9.根据权利要求1所述的组合物，其中所述免疫球蛋白构建体包含经修饰以对新生Fc受体(FcRn)具有降低的或不可测量的亲和力的免疫球蛋白.10.用于治疗阿尔茨海默氏病的组合物，其包含至少一种AAV载体储备物，所述AAV载体储备物包含靶向中枢神经系统的细胞的AAV衣壳，所述衣壳其中已经包装至少一个AAV反向末端重复序列和与其表达控制序列可操作连接的编码免疫球蛋白构建体的序列，其中所述至少一种载体储备物表达对Aβ、β分泌酶和/或tau蛋白特异性的免疫球蛋白，且所述组合物进一步包含药学上可接受的载体和/或赋形剂.11.根据权利要求11所述的组合物，其中所述免疫球蛋白是scFv.12.根据权利要求12所...

【专利技术属性】
技术研发人员：JM维尔森，C辛德勒，WT罗思维尔，
申请(专利权)人：宾夕法尼亚州大学信托人，
类型：发明
国别省市：美国,US