The present invention provides an anti-H7N9 antibody and its preparation method and application. The nucleic acid sequence of the heavy chain variable region of the antibody is shown as SEQ ID NO.1, and the nucleic acid sequence of the light chain variable region of the antigen binding fragment is shown as SEQ ID NO.2. The affinity of the antibody and H7N9 HA is at nM level, and the neutralization activity of the antibody is higher than that of the known broad-spectrum antibody FI6. The preparation method is controllable, low cost, simple and efficient, and suitable for standardized production, which provides a new idea for vaccine development.
【技术实现步骤摘要】
一种抗H7N9抗体及其制备方法和应用
本专利技术属于生物医药和免疫学
，涉及一种抗H7N9抗体及其制备方法和应用。
技术介绍
流感是威胁人类健康的主要因素之一，H7N9、H5N6和H10N8等禽流感病毒引起的人感染禽流感，发病严重、死亡率高，给人类健康、经济发展和社会稳定带来严重的影响。治疗流感的措施主要包括疫苗和抗病毒药物，其中，疫苗是预防流感病毒感染最有效的方式之一，但对突发的新亚型流感病毒株缺乏保护作用；抗病毒药物在耐药病毒株产生之前具有治疗作用，感染后期治疗效果不明显。目前的抗病毒药物包括M2离子通道蛋白抑制剂和神经氨酸酶(NA)抑制剂，例如金刚烷胺和奥司他韦，这些药物虽然能够有效地抑制病毒复制，但容易造成耐药株的出现。流感康复者的血清中含有高滴度的抗体，能够有效救治流感临床重症者，然而上述抗体获取难度大，效价不均一，难以应对大范围的流感爆发。抗体的体外生产技术十分重要，目前常用的单克隆抗体筛选方法主要有噬菌体展示技术、酵母展示技术、B细胞永生化技术和单细胞PCR技术等。噬菌体展示技术最初由美国Smith博士在1985年提出，噬菌体编码的蛋白基因通过...
【技术保护点】
1.一种抗原结合片段，其特征在于，所述抗原结合片段的重链可变区的核酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述抗原结合片段的轻链可变区的核酸序列如SEQ ID NO.2所示。
【技术特征摘要】
1.一种抗原结合片段，其特征在于，所述抗原结合片段的重链可变区的核酸序列如SEQIDNO.1所示；所述抗原结合片段的轻链可变区的核酸序列如SEQIDNO.2所示。2.一种抗H7N9抗体，其特征在于，所述抗体包括如权利要求1所述抗原结合片段；优选地，所述抗体还包括恒定区。3.一种DNA片段，其特征在于，所述DNA片段包括编码如权利要求1所述抗原结合片段和/或如权利要求2所述抗体的核苷酸序列。4.一种表达载体，其特征在于，所述表达载体包括如权利要求3所述的DNA片段。5.一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞含有如权利要求3所述的DNA片段和/或如权利要求4所述的表达载体；优选地，所述宿主细胞包括293T细胞。6.一种如权利要求2所述抗体的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)采集免疫个体的B细胞，PCR获得抗体可变区的DNA片段；(2)将步骤(1)所述DNA片段连接入表达载体，转入感受态细胞，培养后挑取单克隆细胞进行筛选；(3)将筛选后的表达载体转入宿主细胞，培养并收集上清液，分离纯化得到所述抗体。7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述免疫个体...
【专利技术属性】
技术研发人员：罗佳，陈凌，牛学锋，李正锋，
申请(专利权)人：中国科学院广州生物医药与健康研究院，
类型：发明
国别省市：广东,44
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