The invention discloses a method for determining the enzyme activity of millet, and relates to the field of agricultural biotechnology. The method of the invention includes: setting the twelfth day of the flowering period of millet as the first day of sampling, collecting the young ears as the samples to be tested on the third, fifth, tenth, fifteenth, twentieth, twenty-fifth and thirty days of sampling in turn; using liquid nitrogen to grind the samples to be tested, weighing the samples to be measured by the preset weight, and purifying the samples to be tested by the kit. The enzyme activity of the tested enzyme was determined by ultraviolet spectrophotometer, and the enzyme activity data of the millet were obtained. The method has the advantages of accurate results of enzyme activity determination and simple operation, and can provide material basis for transcriptome sequence analysis during endosperm formation stage of Japonica glutinous millet and screening differentially expressed genes of Japonica glutinous millet through starch synthesis pathway.
【技术实现步骤摘要】
谷子酶活性的测定方法
本专利技术涉及农业生物
,尤其涉及一种谷子酶活性的测定方法。
技术介绍
测定稻谷酶活性的方法很多,如在开花后的多个时间段内分别采取稻穗样品,然后液氮冷冻和低温保存;或者在稻穗中上部采取籽粒同样液氮冷冻和低温保存,然后再进行酶活性测定。在上述测量酶活性方法中,均需要将玉米、水稻等作物外壳麸皮剥掉,在剥离过程中,速冻样品会融化,对酶活性会造成影响,最终会导致测量误差。而且,在水稻和玉米等禾本科作物测定酶活性时主要参照Nakamura(1989)等方法,此方法操作难度大,受外界影响因素过多,测定结果误差较大。对于上述影响测定结果的各种问题,还未有相对详细可行且科学的解决方法。
技术实现思路
有鉴于此,本专利技术实施例提供了一种谷子酶活性的测定方法,主要解决测定方法不准确的问题。为达到上述目的,本专利技术主要提供了如下技术方案:一方面,本专利技术实施例提供了一种谷子酶活性的测定方法,包括如下步骤:将谷子开花期第12天设为取样第1天,依次在取样第3天、第5天、第10天、第15天、第20天、第25天及第30天分别采集幼穗作为待测样品;利用液氮研磨所述待测样品,称取预设重量的待测样品,利用试剂盒提纯待测酶;利用紫外分光光度计测定所述待测酶的酶活性,得到所述谷子的酶活性数据。作为优选,所述酶为颗粒型淀粉合成酶、淀粉分支酶及可溶性淀粉合成酶。作为优选,所述采集幼穗具体方式为:利用剪刀剪取谷穗的穗中部穗码作为待测样品,先将所述待测样品置于液氮罐中保存2小时后再转入-80℃冰箱中保存。作为优选,所述谷子为粳性品种赤谷4号和糯性品种公谷68号。作为优选,所 ...
【技术保护点】
1.谷子酶活性的测定方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:将谷子开花期第12天设为取样第1天,依次在取样第3天、第5天、第10天、第15天、第20天、第25天及第30天分别采集幼穗作为待测样品;利用液氮研磨所述待测样品,称取预设重量的待测样品,利用试剂盒提纯待测酶;利用紫外分光光度计测定所述待测酶的酶活性,得到所述谷子的酶活性数据。
【技术特征摘要】
1.谷子酶活性的测定方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:将谷子开花期第12天设为取样第1天,依次在取样第3天、第5天、第10天、第15天、第20天、第25天及第30天分别采集幼穗作为待测样品;利用液氮研磨所述待测样品,称取预设重量的待测样品,利用试剂盒提纯待测酶;利用紫外分光光度计测定所述待测酶的酶活性,得到所述谷子的酶活性数据。2.如权利要求2所述的谷子酶活性的测定方法,其特征在于,所述酶为颗粒型淀粉合成酶、淀粉分支酶及可溶性淀粉合成酶。3.如权利要求1所述的谷子酶活性的测定方法,...
【专利技术属性】
技术研发人员:郭世华,李强,李涛,白玉婷,任芹勇,高媛,李星聪,王参观,
申请(专利权)人:内蒙古农业大学,
类型:发明
国别省市:内蒙古,15
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