一种用于生产AFG1的培养基及其制备AFG1标准品的方法技术

本发明专利技术提出了一种用于生产AFG1的培养基及其制备AFG1标准品的方法，包括一级PDA液体培养基和二级培养基；本发明专利技术通过变温培养提高了次级代谢产物真菌毒素的产量；原料易得，生产成本低，工艺操作更安全；通过密封袋的引入，模拟了自然微氧潮湿条件，提高了毒素的转化率，减少了转接过程污染风险；提取方法简单；溶剂回收利用成本迪；通过氮气吹干AFG1结晶，加己烷重结晶纯度提高到99％以上。

A culture medium for producing AFG1 and method for preparing AFG1 standard product

The invention provides a culture medium for producing AFG1 and a method for preparing AFG1 standard, including a first-level PDA liquid culture medium and a second-level culture medium; the invention improves the production of mycotoxin, a secondary metabolite, by means of variable temperature culture; the raw material is easy to obtain, the production cost is low, and the process operation is safer; and the introduction of sealed bags. The natural micro-oxygen humidity conditions were simulated to improve the conversion rate of toxin and reduce the risk of contamination during the transfer process; the extraction method was simple; the cost of solvent recovery was high; AFG1 crystallization was dried by nitrogen gas, and the purity of recrystallization with hexane was increased to more than 99%.

【技术实现步骤摘要】
一种用于生产AFG1的培养基及其制备AFG1标准品的方法
本专利技术涉及生物制备
，尤其是涉及一种用于生产AFG1的培养基及其制备AFG1标准品的方法。
技术介绍
黄曲霉毒素污染是农作物、食品和饲料中主要的质量安全问题之一，是全世界共同关注和需要攻克的难题，因此对于黄曲霉毒素标准物质的需求十分广泛。其中，AFG1被认为是一种致癌力最强的天然物质。世界各国都制定了严格的限量标准，然而黄曲霉毒素产生条件受地域、气候、种植作物、储存条件等一系列因素的影响，其特性使防控成为世界性的难题。黄曲霉毒素属于霉菌次级代谢产物，不是其繁殖必须的代谢物，产量少，基质复杂，培养和提取纯化有较高的工艺要求，造成其价格昂贵。我国对真菌毒素的研究自上世纪80年代，起步较晚，随着检测技术的发展和食品安全意识的不断提高，我国政府监管部门高度重视真菌毒素防控工作，于2016年6月在北京召开了第一届中国真菌毒素大会，并由中国农业科学院农产品加工研究所在北京牵头成立了国家真菌毒素防控科技创新联盟。联盟主题是“合作研究、联合攻关、成果共享”构建长效合作机制，为农产品质量安全真菌毒素防控科技交流提供开放的平台。虽然我国本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于生产AFG1的培养基，其特征在于，包括一级PDA液体培养基和二级培养基；其中，所述一级PDA液体培养基的制备包括如下步骤：将土豆削皮切丁，每195g‑205g土豆加入495‑505mL的水，煮沸30min；双层纱布过滤至烧杯中，加入15‑25g蔗糖，加水至1L，每50mL溶液分装入250mL三角瓶，121℃高压灭菌20min；所述二级培养基的成份按照重量份包括：玉米粉975‑985g，鸡蛋175‑185g，酵母粉10‑20g，蛋白胨30‑40g，蔗糖180‑190g，玉米浆575‑585g，氯化钠3‑7g，花生饼粉75‑85g，水575‑585g；所述二级培养基的制备包括如下步骤：...

【技术特征摘要】
1.一种用于生产AFG1的培养基，其特征在于，包括一级PDA液体培养基和二级培养基；其中，所述一级PDA液体培养基的制备包括如下步骤：将土豆削皮切丁，每195g-205g土豆加入495-505mL的水，煮沸30min；双层纱布过滤至烧杯中，加入15-25g蔗糖，加水至1L，每50mL溶液分装入250mL三角瓶，121℃高压灭菌20min；所述二级培养基的成份按照重量份包括：玉米粉975-985g，鸡蛋175-185g，酵母粉10-20g，蛋白胨30-40g，蔗糖180-190g，玉米浆575-585g，氯化钠3-7g，花生饼粉75-85g，水575-585g；所述二级培养基的制备包括如下步骤：S1、成分一的制备：将975-985g玉米粉、175-185g鸡蛋、5-10g蔗糖和10-20g酵母粉加水搅拌均匀，室温静置2小时，分装入5个500mL烧杯中，用8层纱布包扎；S2、成分二的制备：将30-40g蛋白胨，175-180g蔗糖，575-585g玉米浆，3-7g氯化钠，75-85g花生饼粉搅拌均匀，再加适量水搅成馅状，分装入5个500mL烧杯中，用8层纱布包扎；成分一和成分二在121℃高压灭菌25min；S3、灭菌结束后，在灭菌温度降低到80℃时，直接转移至超净工作台，将成分一和成分二进行一一对应，放入研磨仪打碎，搅匀后重新转移至烧杯中。2.一种利用权利要求1所述培养基制备AFG1标准品的方法，其特征在于，包括如下...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭礼强，刘永强，张金玲，丁葵英，张立，许燕，
申请(专利权)人：郭礼强，
类型：发明
国别省市：山东,37