The invention relates to an exosome active preparation for promoting endothelial cell angiogenesis and its preparation method and application. The preparation method comprises the following steps: isolating primary umbilical vein endothelial cells and carrying out cell culture and passage; adding anisodamine to the culture medium of endothelial cells for treatment, and then treating endothelial cells. Replacement of new endothelial cell culture medium to continue to culture endothelial cells; extraction of exosomes from endothelial cell culture medium obtained after endothelial cell culture; identification of exosomes. The exosome active preparation for promoting endothelial cell angiogenesis prepared by the preparation method of the invention and its application in preparing medicines for treating microvascular injury, microcirculation disturbance and myocardial and cerebral infarction. The preparation method is simple, and the prepared exocrine can promote the vascular formation of endothelial cells.
【技术实现步骤摘要】
促内皮细胞成血管的外泌体活性制剂及其制备方法和应用
本专利技术涉及生物医药领域,具体涉及促内皮细胞成血管的外泌体活性制剂及其制备方法和应用。
技术介绍
微循环是微动脉与微静脉之间毛细血管中的血液循环,是循环系统中最基层的结构和功能单位,它包括微动脉,微静脉,毛细淋巴管和组织管道内的体液循环。人体每个器官,每个组织细胞均要由微循环提供氧气,养料,传递能量,交流信息,排除二氧化碳及代谢废物,一旦人体的微循环发生障碍,其相应的组织系统或内脏器官就会受到影响而不能发挥正常功能,就容易导致人体的衰老,免疫功能的紊乱以及疾病的发生。微循环障碍是疾病发生和发展的重要病理生理学基础。微循环功能是保证人体脏器发挥正常功能的首要前提,医学已证明:微循环发生障碍会使很多人处于亚健康状态,肿瘤、高血压、糖尿病及许多心脑血管等重大慢病均与微循环障碍有关,因此微循环功能也是人体是否健康的重要标志。故此,改善微循环能够从机体整体的角度提高对疾病治疗的疗效,以及能够通过改善微循环纠正微循环障碍达到辅助治疗疾病的目的。微循环障碍治疗法能迅速改善全身组织的供血供氧功能,降低血脂和血粘度,增加新陈代谢,提高机体免疫力,对心脑血管病、高脂血症等多种疾病有显著的疗效。治疗心梗和脑卒中的基本原则又在于梗死后的侧支通路再建,而侧支的再建主要取决于血管的新生。随着细胞外泌体的研究日益深入,外泌体药物制剂越来越成为疾病治疗研究的热点,外泌体(exosomes)是一种由活细胞分泌并释放到胞外环境中、大小在60--100nm的运输膜泡。外泌体以其天然的物质转运特性、相对较小的分子结构和优良的生物相容性,可递送 ...
【技术保护点】
1.促内皮细胞成血管的外泌体活性制剂的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)分离原代脐带静脉内皮细胞并进行细胞培养及传代;(2)向传代培养的内皮细胞培养液中加入山莨菪碱对内皮细胞进行处理,然后更换新的内皮细胞培养液继续培养内皮细胞;(3)自内皮细胞培养后得到的的内皮细胞培养液中提取外泌体;(4)外泌体鉴定。
【技术特征摘要】
1.促内皮细胞成血管的外泌体活性制剂的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)分离原代脐带静脉内皮细胞并进行细胞培养及传代;(2)向传代培养的内皮细胞培养液中加入山莨菪碱对内皮细胞进行处理,然后更换新的内皮细胞培养液继续培养内皮细胞;(3)自内皮细胞培养后得到的的内皮细胞培养液中提取外泌体;(4)外泌体鉴定。2.根据权利要求1所述的促内皮细胞成血管的外泌体活性制剂的制备方法,其特征在于,所述传代培养的内皮细胞为3-5代内皮细胞。3.根据权利要求1所述的促内皮细胞成血管的外泌体活性制剂的制备方法,其特征在于,所述内皮细胞培养液为基础培养基中添加无外泌体胎牛血清、青霉素、链霉素和内皮生长因子至终浓度分别为0.05mg/mL、0.01mg/mL、0.01mg/mL和0.01mg/mL。4.根据权利要求1所述的促内皮细胞成血管的外泌体活性制剂的制备方法,其特征在于,步骤(2)中加入山莨菪碱后的内皮细胞培养液中,所述山莨菪碱的浓度为1.5×10-2―1.5×10...
【专利技术属性】
技术研发人员:仉红刚,张秋菊,李炳蔚,修瑞娟,
申请(专利权)人:中国医学科学院微循环研究所,
类型:发明
国别省市:北京,11
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。