抗人CD38抗体及其用途制造技术

本申请公开了结合人CD38的抗体或其抗原结合部分，编码所述抗体或其抗原结合部分的多核苷酸、包含所述多核苷酸的载体、包含所述多核苷酸或载体的宿主细胞、制备和纯化该抗体的方法及所述抗体或其抗原结合部分的应用。

Anti human CD38 antibodies and their uses

This application discloses an antibody or its antigen binding portion that binds to human CD38, a polynucleotide encoding the antibody or its antigen binding portion, a carrier containing the polynucleotide, a host cell containing the polynucleotide or carrier, a method for preparing and purifying the antibody, and an application of the antibody or its antigen binding portion.

【技术实现步骤摘要】
抗人CD38抗体及其用途
本申请大体涉及基因工程和抗体药物领域；具体而言，涉及抗人CD38抗体领域及其用途。本申请开发了新的抗人CD38抗体，并提供了该抗体在治疗CD38介导的疾病中的用途。
技术介绍
CD38是一种分子量大小为46KD的II型跨膜蛋白，其包括一个长C端胞外区(258个氨基酸)、一个跨膜区(21个氨基酸)和一个短的N端(21个氨基酸)。CD38的C端胞外区在跨膜信号传导过程中起重要作用，同时还具有糖苷水解酶活性[1]。当CD38作为一种ADP核糖基环化酶存在时，可以将烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)转化为烟酰胺、腺苷二磷酸核糖(ADPR)，还可以将NAD+环化为环腺苷二磷酸核糖(cADPR)。这一系列生化过程被认为和胞外钙离子迁移有关，钙离子从内质网迁移需要cADPR作为二级信使[2]。关于CD38敲除小鼠的研究表明，CD38在NAD糖水解酶发挥活性功能的过程中是必不可少的[3]。另外CD38还可以通过T细胞受体(TCR)传导信号并参与细胞应答，启动免疫蛋白的转换分泌[4]。CD38主要表达于淋巴细胞和髓系来源的细胞上。在部分非造血细胞中有较低的表达。CD38在造血细胞中的表达与细胞的分化状态和活化状态有关系，如大部分的骨髓胸腺细胞表达CD38，血液中循环流通的T细胞不产生CD38，当T细胞被活化时CD38表达产生。CD38表达于B细胞发育的各个阶段，其中在浆细胞中的表达量较高[5,6]。虽然CD38广泛表达于造血细胞中，但是CD38敲除后小鼠的造血功能并没有发生改变，这一结果表明CD38对小鼠的造血系统和淋巴系统来说并不是必需的[3]。CD38的表达和多种疾病有关，如HIV感染[7]、系统红斑狼疮[8]和肿瘤。CD38在多种血液肿瘤中的表达量上调，如多发性骨髓瘤(MM)[9]、急性淋巴性白血病(ALL)[10]、慢性淋巴性白血病(CLL)[11]等。CD38的表达及其与疾病发展进展中的关联使其成为抗体治疗中的一个靶点。多发性骨髓瘤(Multiplemyeloma(MM))是一种浆细胞异常增生导致的恶性血液肿瘤，骨髓中增长异常的浆细胞不断累积并挤压正常造血细胞，症状显示为骨破坏。多发性骨髓瘤在血液肿瘤中占比约为10％，在所有肿瘤中的比率约为1％[12]。统计显示在2012年全球共有114,252例新增病例和80,119例死亡病例[13]。多发性骨髓瘤的发病率有一定的人种差异性，东亚地区的发病率要低于欧美地区，其中美国发病率为3.6/10万，中国发病率为0.6/10万(GLOBOCAN2012)。近年来由于老年化程度升高和环境变化，国内的多发性骨髓瘤发病呈上升趋势[14]。多发性骨髓瘤目前的主要治疗方法有干细胞移植、免疫调节剂(如来那度胺、泊马度胺等)和蛋白酶体抑制剂(如硼替佐米、卡非佐米等)治疗。这些已有治疗方法的缺陷在于对耐受复发型骨髓瘤的治疗效果差，并且对基因突变的病例或者髓外疾病的治疗不尽如人意。因此，寻求一种新的不同机制的治疗方法是非常有必要的。在文献中已经描述了许多抗CD38抗体可用于血液肿瘤如骨髓瘤的治疗的实例，并且它们效果显著。如靶向CD38的全人源抗体daratumumab已经被证实可以通过抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用(ADCC)、补体依赖的细胞毒性作用(CDC)、抗体依赖的细胞介导的吞噬作用(ADCP)等机制在体外杀死CD38+骨髓瘤细胞[15]，此抗体是首个上市的抗CD38抗体。另一人源化抗CD38抗体SAR650984在骨髓瘤细胞和CD38+的其他血液瘤细胞中也表现出了明显的杀伤作用，其通过ADCC、CDC、ADCP和直接诱导细胞凋亡的机制不仅在体外杀伤了肿瘤细胞，而且在重症联合免疫缺陷(SCID)鼠体内也能明显的抑制移植肿瘤Molp-8的生长[16]。新的抗CD38抗体的开发和应用是本领域所需要的。专利技术概述第一方面，本申请提供了一种结合人CD38的抗体，其包含含HCDR1、HCDR2和HCDR3氨基酸序列的重链可变区及含LCDR1、LCDR2和LCDR3氨基酸序列的轻链可变区，其中所述HCDR1氨基酸序列为NSWMH，所述HCDR2氨基酸序列为EIHPQSGRTNYNEKFKG，所述HCDR3氨基酸序列为DLLQFGNQYYYAMDY，所述LCDR1氨基酸序列为RSSQSLVHSNGNTYLH，所述LCDR2氨基酸序列为KVSNRFS，所述LCDR3氨基酸序列为SQSTHVPLT；或者所述HCDR1氨基酸序列为SYTIH，所述HCDR2氨基酸序列为YINPSNGYTNYNQKFKD，所述HCDR3氨基酸序列为KYGNFYAMDY，所述LCDR1氨基酸序列为RASENIYSYLA，所述LCDR2氨基酸序列为NAKTLAE，所述LCDR3氨基酸序列为QHHYGTPYT；其中HCDR和LCDR氨基酸序列根据Kabat定义。在一些实施方案中，所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO：27、28、31、33或者35所示。在一些实施方案中，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO：29、30、32、34或者36所示。在一些实施方案中，所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO：27所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO：29所示；或者所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO：27所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO：30所示；或者所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO：28所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO：29所示；或者所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO：28所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO：30所示；或者所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO：31所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO：32所示；或者所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO：33所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO：34所示；或者所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO：35所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO：36所示。第二方面，本申请提供了一种结合人CD38的抗体，所述抗体的重链可变区的氨基酸序列与SEQIDNO：27、28、31、33或者35中任一项具有至少90％的一致性，并且所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列与SEQIDNO：29、30、32、34或者36中任一项具有至少90％的一致性。在第一方面和第二方面的一些实施方案中，所述抗体为单克隆抗体。在第一方面和第二方面的一些实施方案中，所述抗体能结合人CD38，并能通过抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用、补体依赖的细胞毒性作用、抗体依赖的细胞介导的吞噬作用中的至少一种机制杀死CD38阳性细胞。在一些实施方案中，所述抗体能抑制肿瘤细胞的体内生长。在第一方面和第二方面的一些实施方案中，所述抗体为全抗体、Fab片段、F(ab’)2片段或单链Fv片段(scFv)。在第一方面和第二方面的一些实施方案中，所述抗体为全人源抗体。在第一方面和第二方面的一些实施方案中，所述抗体还包含选自IgG1亚型、IgG2亚型或IgG4亚型的重链恒定区和/或本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种结合人CD38的抗体，其包含含HCDR1、HCDR2和HCDR3氨基酸序列的重链可变区及含LCDR1、LCDR2和LCDR3氨基酸序列的轻链可变区，其中所述HCDR1氨基酸序列为NSWMH，所述HCDR2氨基酸序列为EIHPQSGRTNYNEKFKG，所述HCDR3氨基酸序列为DLLQFGNQYYYAMDY，所述LCDR1氨基酸序列为RSSQSLVHSNGNTYLH，所述LCDR2氨基酸序列为KVSNRFS，所述LCDR3氨基酸序列为SQSTHVPLT；或者所述HCDR1氨基酸序列为SYTIH，所述HCDR2氨基酸序列为YINPSNGYTNYNQKFKD，所述HCDR3氨基酸序列为KYGNFYAMDY，所述LCDR1氨基酸序列为RASENIYSYLA，所述LCDR2氨基酸序列为NAKTLAE，所述LCDR3氨基酸序列为QHHYGTPYT；其中HCDR和LCDR氨基酸序列根据Kabat定义。

【技术特征摘要】
1.一种结合人CD38的抗体，其包含含HCDR1、HCDR2和HCDR3氨基酸序列的重链可变区及含LCDR1、LCDR2和LCDR3氨基酸序列的轻链可变区，其中所述HCDR1氨基酸序列为NSWMH，所述HCDR2氨基酸序列为EIHPQSGRTNYNEKFKG，所述HCDR3氨基酸序列为DLLQFGNQYYYAMDY，所述LCDR1氨基酸序列为RSSQSLVHSNGNTYLH，所述LCDR2氨基酸序列为KVSNRFS，所述LCDR3氨基酸序列为SQSTHVPLT；或者所述HCDR1氨基酸序列为SYTIH，所述HCDR2氨基酸序列为YINPSNGYTNYNQKFKD，所述HCDR3氨基酸序列为KYGNFYAMDY，所述LCDR1氨基酸序列为RASENIYSYLA，所述LCDR2氨基酸序列为NAKTLAE，所述LCDR3氨基酸序列为QHHYGTPYT；其中HCDR和LCDR氨基酸序列根据Kabat定义。2.根据权利要求1所述的抗体，所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO：27、28、31、33或者35所示。3.根据权利要求1所述的抗体，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO：29、30、32、34或者36所示。4.根据权利要求1所述的抗体，其中所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO：27所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO：29所示；或者所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO：27所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO：30所示；或者所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO：28所示，所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO：29所示；或者所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO：28所示，所述抗...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘志刚，刘玉兰，郝小勃，万姝南，胡俊杰，郭晶晶，
申请(专利权)人：北京智仁美博生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11