The present invention provides a fluorescence quantitative PCR detection kit for HBV pgRNA. The kit includes upstream, downstream and reverse transcription primers amplified by fluorescence quantitative PCR. The specific reverse transcription part of the reverse transcription primer with the tail of HBV pgRNA Poly A contains 15 to 22 T. The HBV pgRNA detection kit has high sensitivity and specific detection effect.
【技术实现步骤摘要】
一种HBVpgRNA荧光定量PCR检测试剂盒
本专利技术涉及分子生物学
，特别涉及一种HBVpgRNA荧光定量PCR检测试剂盒。
技术介绍
乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus，HBV)属嗜肝DNA病毒科，基因组长约3.2kb，为部分双链环状DNA(relaxedcircularDNA，rcDNA)。HBVDNA长链为负链，位置和长度相对固定。短链为正链，其长度可变，约为负链的50％～80％。乙型肝炎病毒(HBV)感染是一个严重的公共卫生问题，世界卫生组织报告全球约有20亿人感染过HBV，其中3-4亿人为慢性HBV感染。在我国肝硬化和肝癌患者中，由HBV感染引起的比例分别高达60％和80％以上。现有的治疗药物主要为核苷酸类似物，虽然能够有效抑制病毒，但是存在长期用药、病毒耐药、病毒载量反弹等问题。对于慢性HBV感染患者，何时能够安全停药一直是困扰患者的一个问题，因此了解HBV感染肝细胞的机制能够有助于我们找到上述问题的原因。通过研究者们对慢性HBV感染患者体内HBV复制机制的不断探索，目前更全面的HBV感染复制周期如下：HBV病毒颗粒通过与肝细胞表面...
【技术保护点】
1.一种HBV pgRNA荧光定量PCR检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括荧光定量PCR扩增的上游引物、下游引物和逆转录引物，所述逆转录引物中与HBV pgRNA Poly A尾进行特异逆转录部分包含15‑22个T。
【技术特征摘要】
1.一种HBVpgRNA荧光定量PCR检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括荧光定量PCR扩增的上游引物、下游引物和逆转录引物，所述逆转录引物中与HBVpgRNAPolyA尾进行特异逆转录部分包含15-22个T。2.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述逆转录引物的PolyA与HBVpgRNA序列连接处设计有与靶标特异结合的兼并碱基GW。3.根据权利要求2所述的检测试剂盒，其特征在于，所述逆转录引物的序列依次包括HBVpgRNA荧光定量PCR的下游引物序列、15-22个T和兼并碱基GW。4.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述上游引物是针对不同基因型HBV高度保守的序列，确保不会因为HBV序列型别差异导致漏检或检测灵敏度低；所述下游引物是不同基因型HBV高度不保守的序列，以避免HBVDNA序列的干扰。5.根据权利要求4所述的检测试剂盒，其特征在于，所述上游引物序列是SEQIDNO1：GGAGGCTGTAGGCATAAATTGGTC；下游引物序列是SEQIDNO2：ATCG...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘利成，胡小许，王培培，孙娣文，冯华华，李春明，
申请(专利权)人：江苏宏微特斯医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。