本发明专利技术涉及萜类化合物技术领域，提供的二倍半萜类化合物peniroquesines其结构如下式所示。该类化合物属于二倍半萜类化合物，具有显著的抗炎活性。本发明专利技术提供的抗炎及抗肿瘤活性化合物peniroquesines是9个具有新颖的5/6/5/6/5五环系新骨架结构的二倍半萜类化合物，丰富了二倍半萜类化合物的多样性。本发明专利技术还提供了一类抗炎及抗肿瘤活性化合物peniroquesine的制备方法，由娄地青霉发酵制备得到，该方法简单、快速、成本低，适宜大规模工业化生产。
A two sesquiterpenoid compound peniroquesines and its preparation method and Application
The present invention relates to the technical field of terpenoids. The structure of peniroquesines, a diterpenoid compound, is provided as follows. The compounds belong to two sesquiterpenoids, and have significant anti-inflammatory activity. The anti-inflammatory and anti-tumor active compound peniroquesines provided by the present invention is nine diterpenoids with novel 5/6/5/6/5 pentacyclic new skeleton structure, which enriches the diversity of diterpenoids. The invention also provides a preparation method of peniroquesine, an anti-inflammatory and anti-tumor active compound, which is prepared by fermentation of Penicillium Loudi. The method is simple, rapid and low cost, and is suitable for large-scale industrial production.
【技术实现步骤摘要】
一种二倍半萜类化合物peniroquesines及其制备方法和应用
本专利技术涉及萜类化合物
，特别涉及一种二倍半萜类化合物peniroquesinesB、C、D、H和J及其制备方法和应用。
技术介绍
萜类化合物(terpenes)-分子式为异戊二烯单位的倍数的烃类及其含氧衍生物，是具有高度多样性的一天然产物，包括单萜、倍半萜、二萜、二倍半萜、三萜等。许多萜类衍生物已被发展为治疗癌症、细菌感染、疟疾和其他各种人类疾病的重要药物，因此萜类的合成就显得非常的重要。但由于生源合成途径仍未完全阐明、萜类化合物具有非模块化的结构、没有普适的统一的合成策略等因素，因而萜类化合物的来源途径依赖于天然产物的提取。二倍半萜类化合物(sesterterpenes)大部分属于海洋中各种海绵和藻类植物及其内生真菌的次级代谢产物，在陆生植物中极为罕见，以往的研究发现有极少数的微生物能够产生此类化合物。据文献报道，二倍半萜类化合物具有抗炎、抗细胞毒、抗肿瘤以及抗菌等多种生物活性。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供可以通过微生物发酵得到的、新的具有抗炎及抗肿瘤活性的二倍半萜类化合物。本专利技术提供了二倍半萜类化合物peniroquesines，具有式I所示的结构：本专利技术还提供了上述技术方案所述二倍半萜类化合物peniroquesines、C、D、H和J的制备方法，包括以下步骤：(1)将娄地青霉接种于发酵培养基中发酵，得到娄地青霉发酵物；所述娄地青霉的保藏编号为CGMCCNO.14140；(2)将所述步骤(1)得到的娄地青霉发酵物与醇混合后超声提取，得到peniroquesines粗提物；(3)以体积比在100:0～20:1范围内的多组氯仿-甲醇溶液为洗脱溶剂，硅胶柱色谱洗脱所述步骤(2)得到的peniroquesines粗提物，得到的多组洗脱液再分别经硅胶柱色谱纯化，得到二倍半萜类化合物peniroquesines，所述硅胶柱色谱洗脱为：用氯仿-甲醇溶液将所述peniroquesines粗提物溶解，得到粗提物溶液；将所述粗提物溶液与peniroquesines粗提物干重质量0.8～1.5倍的硅胶混合，去除溶剂，装柱，依次用体积比为100:0、100:1、50:1、10:1、5:1的氯仿-甲醇溶液进行梯度洗脱，分别得到体积比为100:0、100:1、50:1、10:1、5:1的氯仿-甲醇溶液洗脱液；取体积比为100:0的氯仿-甲醇溶液洗脱部分，以体积比100:1的石油醚-丙酮为溶剂过硅胶柱层析洗脱，得到peniroquesineD洗脱液；取体积比为100:1的氯仿-甲醇溶液洗脱部分，以体积比60:1的石油醚-丙酮为溶剂过硅胶柱层析洗脱，得到含有peniroquesineB洗脱液；取体积比为50:1的氯仿-甲醇溶液洗脱部分，以体积比25:1～10:1的石油醚-丙酮为溶剂过硅胶柱层析洗脱，分别得到含有peniroquesineC和peniroquesineH洗脱液；取体积比为10:1的氯仿-甲醇溶液洗脱部分，以体积比200:1的氯仿-甲醇为溶剂过硅胶柱层析洗脱，得到peniroquesineJ洗脱液；以甲醇为溶剂，将含有各化合物的洗脱液经葡聚糖凝胶纯化，分别得到各二倍半萜类化合物peniroquesinesB、C、D、H和J。优选地，所述步骤(1)中发酵培养基的制作原料中含有马铃薯或大米，所述发酵的方式为固体发酵。优选地，所述步骤(1)中发酵的温度为20～28℃，发酵的时间为25～32d。优选地，所述步骤(2)中，娄地青霉发酵物与醇的质量体积比为(30～80)g:(50～150)mL。本专利技术还提供了所述的二倍半萜类化合物peniroquesines中的至少一种在制备抗炎药物中应用。本专利技术还提供了所述的二倍半萜类化合物peniroquesines中的至少一种在制备抗肿瘤药物中应用。本专利技术提供的二倍半萜类化合物peniroquesines是具有新颖的5/6/5/6/5五环系新骨架结构，丰富了二倍半萜类化合物的多样性。同时，对化合物peniroquesinesB、C、D、H和J的NO(一氧化氮)抑制活性及对5种肿瘤细胞抑制活性筛选试验表明，化合物peniroquesinesB,D和H对NO的生成表现出了明显的抑制活性，化合物peniroquesinesB-D及H对5种肿瘤细胞表现出了明显的抑制活性。进一步地，本专利技术提供的二倍半萜类化合物peniroquesines为娄地青霉的代谢产物，可以通过微生物发酵制备得到，制备方法周期短、培养条件温和、副产物少、立体选择性强、成本低。本专利技术提供的二倍半萜类化合物peniroquesines制备方法简单易行，易于实现工业化，不仅符合现代环保和低碳经济的需求，还能够为二倍半萜类化合物的量产提供新途径。本专利技术提供的二倍半萜类化合物peniroquesines能够应用于制备抗炎及抗肿瘤药物，为开发抗炎和抗肿瘤药物提供新的选择。生物保藏说明：娄地青霉(Penicilliumroqueforti)，于2017年8月4日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所；生物保藏编号为CGMCCNo.14140。附图说明图1为peniroquesineB的1H-1HCOSY谱；图2为peniroquesineB的HMBC谱；图3为peniroquesineB的HSQC碳谱；图4为peniroquesineB的HR-ESI-MS谱；图5为peniroquesineC的1H-1HCOSY谱；图6为peniroquesineC的HMBC谱；图7为peniroquesineC的HSQC碳谱；图8为peniroquesineC的HR-ESI-MS谱；图9为peniroquesineD的1H-1HCOSY谱；图10为peniroquesineD的HMBC谱；图11为peniroquesineD的HSQC碳谱；图12为peniroquesineD的HR-ESI-MS谱；图13为peniroquesineH的1H-1HCOSY谱；图14为peniroquesineH的HMBC谱；图15为peniroquesineH的HSQC碳谱；图16为peniroquesineH的HR-ESI-MS谱；图17为peniroquesineJ的1H-1HCOSY谱；图18为peniroquesineJ的HMBC谱；图19为peniroquesineJ的HSQC碳谱；图20为peniroquesineJ的HR-ESI-MS谱。具体实施方式本专利技术提供了二倍半萜类化合物peniroquesines，具有式I所示的结构：本专利技术中二倍半萜类化合物peniroquesinesB、C、D、H和J的化学名称分别为：peniroquesineB：(1S,3aR,5aS,5cS,8aS,10R,10aS,11bR)-1,6,6,8a,10a,11b-六甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,5c,6,7,8,8a,9,10,10a,11b-十六氢-1H-双环戊[a,g]芴-10-醇；peniroquesineC：(1S,3aR,5aS,5cS,8aR,10R,10aS,11bR)-8a-(羟甲基)-1本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.二倍半萜类化合物peniroquesines，具有式I所示的结构：
【技术特征摘要】
1.二倍半萜类化合物peniroquesines，具有式I所示的结构：2.权利要求1所述二倍半萜类化合物peniroquesines的制备方法，包括以下步骤：(1)将娄地青霉接种于发酵培养基中发酵，得到娄地青霉发酵物；所述娄地青霉的保藏编号为CGMCCNO.14140；(2)将所述步骤(1)得到的娄地青霉发酵物与醇混合后超声提取，得到peniroquesines粗提物；(3)以体积比在100:0～20:1范围内的多组氯仿-甲醇溶液为洗脱溶剂，硅胶柱色谱洗脱所述步骤(2)得到的peniroquesines粗提物，得到的多组洗脱液再分别经硅胶柱色谱纯化，得到二倍半萜类化合物peniroquesines，所述硅胶柱色谱洗脱为：用氯仿-甲醇溶液将所述peniroquesines粗提物溶解，得到粗提物溶液；将所述粗提物溶液与peniroquesines粗提物干重质量0.8～1.5倍的硅胶混合，去除溶剂，装柱，依次用体积比为100:0、100:1、50:1、10:1、5:1的氯仿-甲醇溶液进行梯度洗脱，分别得到体积比为100:0、100:1、50:1、10:1、5:1的氯仿-甲醇溶液洗脱液；取体积比为100:0的氯仿-甲醇溶液洗脱部分，以体积比100:1的石油醚-丙酮为溶剂过硅胶柱层析洗脱，得到peniroquesineD洗脱液；取体积比为100:1的...
【专利技术属性】
技术研发人员：丁中涛，蔡乐，王家鹏，
申请(专利权)人：云南大学，
类型：发明
国别省市：云南,53
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