一种嵌合抗原受体免疫细胞及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种嵌合抗原受体免疫细胞及其制备方法和应用，所述嵌合抗原受体免疫细胞表面表达抗PD‑L1嵌合抗原受体，所述抗PD‑L1嵌合抗原受体的胞外抗原结合区包括PD‑1胞外段及PD‑1信号肽。本发明专利技术通过在嵌合抗原受体免疫细胞表面表达抗PD‑L1嵌合抗原受体，避免了因免疫细胞表面PD‑1与肿瘤细胞表面PD‑L1结合而引发的免疫细胞枯竭，实现了将PD‑1通路引发的抑制信号转变为免疫细胞激活信号，显著增强了嵌合抗原受体免疫细胞对肿瘤细胞的杀伤能力。

Chimeric antigen receptor immunoreactive cell and preparation method and application thereof

The invention provides a chimeric antigen receptor immune cell, a preparation method and an application thereof. The chimeric antigen receptor immune cell expresses an anti-PD_L1 chimeric antigen receptor on the surface of the chimeric antigen receptor immune cell. The extracellular antigen binding region of the anti-PD_L1 chimeric antigen receptor includes the extracellular segment of PD_1 and the PD_1 signal peptide. By expressing the anti-PD_L1 chimeric antigen receptor on the surface of the immune cells of the chimeric antigen receptor, the invention avoids the exhaustion of the immune cells caused by the binding of the immune cell surface PD_1 with the tumor cell surface PD_L1, and realizes the transformation of the inhibition signal induced by the PD_1 pathway into the activation signal of the immune cells, thereby significantly enhancing the chimeric anti-PD_1. The ability of the original receptor immune cells to kill tumor cells.

【技术实现步骤摘要】
一种嵌合抗原受体免疫细胞及其制备方法和应用
本专利技术属于生物
，涉及一种嵌合抗原受体免疫细胞及其制备方法和应用。
技术介绍
嵌合抗原受体T细胞(ChimericAntigenReceptorT-CellImmunotherapy，CAR-T)免疫疗法是近年来热门的血液性肿瘤的免疫治疗方法，主要通过嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)进行癌细胞抗原的识别和杀伤。近年来，CAR-T免疫疗法在多个临床试验中取得极佳的治疗效果。报道称，经过CAR-T免疫疗法，90％的急性淋巴细胞白血病患者得到完全缓解(S.L.Maudeetal.ChimericantigenreceptorTcellsforsustainedremissionsinleukemia.Engl.J.Med.,371,1507-1517(2014))。靶向CD19抗原治疗B淋巴细胞白血病和淋巴瘤的成功振奋人心，2017年美国食品药品监督局相继批准诺华和吉利的治疗白血病CAR-T细胞产品上市。肺癌是一种常见的肺部恶性肿瘤，发病率和死亡率居所有恶性肿瘤之首，近50年来已成为全球范围内最严重的癌症类型之一。非小细胞肺癌(non-本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种嵌合抗原受体免疫细胞，其特征在于，所述嵌合抗原受体免疫细胞表面表达抗PD‑L1嵌合抗原受体，所述抗PD‑L1嵌合抗原受体的胞外抗原结合区包括PD‑1胞外段及PD‑1信号肽。

【技术特征摘要】
1.一种嵌合抗原受体免疫细胞，其特征在于，所述嵌合抗原受体免疫细胞表面表达抗PD-L1嵌合抗原受体，所述抗PD-L1嵌合抗原受体的胞外抗原结合区包括PD-1胞外段及PD-1信号肽。2.根据权利要1所述嵌合抗原受体免疫细胞，其特征在于，所述PD-1胞外段的核酸序列如SEQIDNO.1所示；优选地，所述PD-1信号肽的核酸序列如SEQIDNO.2所示；优选地，所述抗PD-L1嵌合抗原受体的跨膜区包括PD-1跨膜段；优选地，所述PD-1跨膜段的核酸序列如SEQIDNO.3所示；优选地，所述抗PD-L1嵌合抗原受体的胞内信号转导区包括Toll样受体1或Toll样受体2，优选为Toll样受体2；优选地，所述Toll样受体1的核酸序列如SEQIDNO.4所示；优选地，所述Toll样受体2的核酸序列如SEQIDNO.5所示；优选地，所述抗PD-L1嵌合抗原受体的胞内信号转导区还包括41BB；优选地，所述41BB的核酸序列如SEQIDNO.6所示。3.根据权利要求1或2所述嵌合抗原受体免疫细胞，其特征在于，所述抗PD-L1嵌合抗原受体由PD-1信号肽、PD-1、41BB和Toll样受体2串联组成；优选地，所述抗PD-L1嵌合抗原受体为：PD-1信号肽-PD-1-41BB-Toll2。4.根据权利要求1-3任一项所述嵌合抗原受体免疫细胞，其特征在于，所述嵌合抗原受体免疫细胞表面还表达辅助抗PD-L1嵌合抗原受体的辅助嵌合抗原受体；优选地，所述辅助嵌合抗原受体包括抗Mesothelin嵌合抗原受体、抗PSCA嵌合抗原受体、抗MUC1嵌合抗原受体、抗HER2嵌合抗原受体或抗GPC3嵌合抗原受体中的任意一种；优选地，所述抗Mesothelin嵌合抗原受体的胞外抗原结合区包括Mesothelin单链可变区；优选地，所述Mesothelin单链可变区的核酸序列如SEQIDNO.7所示；优选地，所述抗PSCA嵌合抗原受体的胞外抗原结合区包括PSCA单链可变区；优选地，所述PSCA单链可变区的核酸序列如SEQIDNO.8所示；优选地，所述抗MUC1嵌合抗原受体的胞外抗原结合区包括MUC1单链可变区；优选地，所述MUC1单链可变区的核酸序列如SEQIDNO.9所示；优选地，所述抗HER2嵌合抗原受体的胞外抗原结合区包括HER2单链可变区；优选地，所述HER2单链可变区的核酸序列如SEQIDNO.10所示；优选地，所述抗GPC3嵌合抗原受体的胞外抗原结合区包括GPC3单链可变区；优选地，所述GPC3单链可变区的核酸序列如SEQIDNO.11所示；优选地，所述辅助嵌合抗原受体的信号肽为GM-CSF信号肽；优选地，所述GM-CSF信号肽的核酸序列如SEQIDNO.12所示；优选...

【专利技术属性】
技术研发人员：李鹏，秦乐，魏新茹，赵若聪，程琳，姚瑶，
申请(专利权)人：深圳市体内生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44