用于增强生产的RNA相关酶的修饰制造技术

本发明专利技术尤其提供了使用SUMO‑鸟苷酰转移酶融合蛋白用于大规模生产加帽的mRNA的方法和组合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于增强生产的RNA相关酶的修饰相关专利申请本专利申请要求于2015年10月14日提交的美国临时申请序列号62/241,350的优先权，所述美国临时申请的公开内容在此以引用的方式并入。序列表本说明书参考了于2016年10月14日作为命名为“SL_SHR-1187WO”的.txt文件电子提交的序列表。该.txt文件于2016年10月14日生成，并且大小为28,402字节。序列表的全部内容以引用的方式并入本文。
技术介绍
信使RNA(“mRNA”)疗法正在成为用于治疗各种疾病的越来越重要的方法。有效的mRNA疗法需要将mRNA有效递送给患者，以及由mRNA编码的蛋白质在患者体内的有效产生。为了最佳化mRNA递送和体内蛋白质产生，在构建体的5'末端处通常需要适当的帽，所述帽保护mRNA免于降解并且促进成功的蛋白质翻译。因此，能够给mRNA加帽的酶的大规模生产对于产生用于治疗应用的mRNA特别重要。
技术实现思路
本专利技术提供了用于有效生产能够给mRNA加帽的酶的改进方法。本专利技术部分基于下述令人惊讶的发现：用SUMO标签修饰鸟苷酰转移酶(GT)使得以产生用于治疗应用的加帽的mRNA所需的大规模生本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种产生加帽的RNA或RNA类似物寡核苷酸的方法，其中融合蛋白促进将鸟苷酰分子转移至所述RNA或RNA类似物寡核苷酸的5’末端和使所述鸟苷酰分子甲基化的步骤。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.10.14 US 62/241,3501.一种产生加帽的RNA或RNA类似物寡核苷酸的方法，其中融合蛋白促进将鸟苷酰分子转移至所述RNA或RNA类似物寡核苷酸的5’末端和使所述鸟苷酰分子甲基化的步骤。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述融合蛋白包含鸟苷酰转移酶和小泛素样分子(SUMO)蛋白。3.根据权利要求2所述的方法，其中所述鸟苷酰转移酶包含SEQIDNO:6和SEQIDNO:7，并且所述SUMO蛋白包含SEQIDNO:5。4.根据权利要求2所述的方法，其中所述融合蛋白包含SEQIDNO:8和SEQIDNO:7。5.根据权利要求1所述的方法，其中相对于野生型鸟苷酰转移酶蛋白，所述融合蛋白具有可比较的磷酸酶活性、鸟苷酰转移酶活性和甲基化活性。6.一种融合蛋白，其中所述融合蛋白包含鸟苷酰转移酶和小泛素样分子(SUMO)蛋白。7.根据权利要求6所述的融合蛋白，其中所述鸟苷酰转移酶包含SEQIDNO:6和SEQIDNO:7，并且所述SUMO蛋白包含SEQIDNO:5。8.根据权利要求6所述的融合蛋白，其中所述鸟苷酰转移酶包含大亚基和小亚基。9.根据权利要求8所述的融合蛋白，其中所述SUMO蛋白与所述大亚基共价连接且共表达。10.根据权利要求6所述的融合蛋白，其中相对于野生型鸟苷酰转移酶蛋白，所述融合蛋白具有可比较的磷酸酶活性、鸟苷酰转移酶活性和甲基化活性。11.一种载体，所述载体编码包含鸟苷酰转移酶蛋白和小泛素样分子(SUMO)蛋白的融合蛋白。12.根据权利要求11所述的载体，其中所述载体包含SEQIDNO:1和SEQIDNO:2。13.根据权利要求11所述的载体，其中所述载体包含SEQIDNO:1、SEQIDNO:2和SEQIDNO:3。14.根据权利要求11所述的载体，其中所述载体包含SEQIDNO:4和SEQIDNO:3。15.一种通过发酵生...

【专利技术属性】
技术研发人员：B·斯特拉克罗格，F·德罗莎，M·哈特莱因，
申请(专利权)人：川斯勒佰尔公司，
类型：发明
国别省市：美国,US