改进的TNF结合剂制造技术

本发明专利技术涉及与肿瘤坏死因子α(“TNF”或“TNF‑α”)结合的氨基酸序列、化合物和多肽。具体而言，本发明专利技术涉及与肿瘤坏死因子α结合的改进的重链免疫球蛋白单可变结构域(本文也称为“ISV”或“ISVD”)，以及包含此类ISVD的蛋白质、多肽和其他构建体、化合物、分子或化学实体，统称为TNF结合剂。基于本文的公开，本发明专利技术的其他方面、实施方案、特征、用途和优点对于本领域技术人员将是清楚的。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】改进的TNF结合剂概述本专利技术涉及与肿瘤坏死因子α(“TNF”或“TNF-α”)结合的氨基酸序列、化合物和多肽。具体而言，本专利技术涉及与肿瘤坏死因子α结合的改进的重链免疫球蛋白单可变结构域(本文也称为“ISV”或“ISVD”)，以及包含此类ISVD的蛋白质、多肽和其他构建体、化合物、分子或化学实体，统称为TNF结合剂。基于本文的公开，本专利技术的其他方面、实施方案、特征、用途和优点对于本领域技术人员将是清楚的。背景在本申请中，免疫球蛋白重链可变结构域中的氨基酸残基/位置将用根据Kabat的编号表示。为了方便起见，图1给出了一张表格，该表格列出了本文将特别提到的一些氨基酸位置以及根据一些替代编号系统的编号。(例如Aho和IMGT，注意：除非明确指出，否则对于本说明书和权利要求书，Kabat编号是决定性的；其他编号系统仅供参考)。关于CDR，如本领域中众所周知的那样，存在多种惯例来定义和描述VH或VHH片段的CDR，例如Kabat定义(其基于序列变异性并且是最常用的)和Chothia定义(其基于结构环区域的位置)。例如参考网站http：//www.bioinf.org.uk/abs/。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.免疫球蛋白单可变结构域(ISVD)，其具有：‑CDR1，(根据Abm)其为氨基酸序列GFTFSTADMG(SEQ ID NO：5)；和‑CDR2，(根据Abm)其为氨基酸序列RISGIDGTTY(SEQ ID NO：6)；和‑CDR3，(根据Abm)其为氨基酸序列PRYADQWSAYDY(SEQ ID NO：4)；并具有：‑与SEQ ID NO：1的氨基酸序列(其中可以存在的任何C端延伸以及CDR不被考虑用于确定序列同一性程度)具有至少85％、优选至少90％、更优选至少95％的序列同一性程度；和/或‑与SEQ ID NO：1的氨基酸序列具有不超过7个、例如不超过5个、优选不超过3个、例如仅...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.11.12 US 62/254,3751.免疫球蛋白单可变结构域(ISVD)，其具有：-CDR1，(根据Abm)其为氨基酸序列GFTFSTADMG(SEQIDNO：5)；和-CDR2，(根据Abm)其为氨基酸序列RISGIDGTTY(SEQIDNO：6)；和-CDR3，(根据Abm)其为氨基酸序列PRYADQWSAYDY(SEQIDNO：4)；并具有：-与SEQIDNO：1的氨基酸序列(其中可以存在的任何C端延伸以及CDR不被考虑用于确定序列同一性程度)具有至少85％、优选至少90％、更优选至少95％的序列同一性程度；和/或-与SEQIDNO：1的氨基酸序列具有不超过7个、例如不超过5个、优选不超过3个、例如仅有3个、2个或1个“氨基酸差异”(如本文所定义，并且不考虑可以存在的第11、89、110或112位中一个或多个位置的任何上文列举的突变并且不考虑可以存在的任何C端延伸)(其中所述氨基酸差异如果存在的话可存在于框架和/或CDR中，但优选仅存在于框架中而不存在于CDR中)；并任选地具有：-C端延伸(X)n，其中n为1至10，优选1至5，例如1、2、3、4或5(并且优选1或2，比如1)；并且每个X是独立地选择的(优选天然存在的)氨基酸残基，并且优选独立地选自由以下各项组成的组：丙氨酸(A)、甘氨酸(G)、缬氨酸(V)、亮氨酸(L)或异亮氨酸(I)；其中：-第11位的氨基酸残基优选选自L或V；并且-第89位的氨基酸残基优选选自T、V或L；并且-第110位的氨基酸残基优选选自T、K或Q；并且-第112位的氨基酸残基优选选自S、K或Q；这样使得(i)第89位是T；或(ii)第89位是L并且第11位是V；或(iii)第89位是L并且第110位是K或Q；或(iv)第89位是L并且第112位是K或Q；或(v)第89位是L并且第11位是V并且第110位是K或Q；或(vi)第89位是L并且第11位是V并且第112位是K或Q；或(vii)第11位是V并且第110位是K或Q；或(vii)第11位是V并且第112位是K或Q。2.根据权利要求1所述的ISVD，其中第49位的氨基酸残基是丙氨酸。3.根据权利要求1或2所述的ISVD，其中第74位的氨基酸残基是丝氨酸。4.根据权利要求3所述的ISVD，其中第73位处的氨基酸残基是N并且第75位处的氨基酸残基是K。5.根据权利要求1至4中任一项所述的ISVD，其中所述ISVD选自由以下各项组成的组：SEQIDNO：40、39、36、37、38、41和61-68，特别是SEQIDNO：40、39和36，最特别是SEQIDNO：40。6.根据权利要求1至5中任一项所述的免疫球蛋白单可变结构域，其基本上为单价形式。7.根据权利要求5所述的免疫球蛋白单可变结构域，其在第1位处具有D并且具有C端延伸X(n)，所述C端延伸X(n)优选为C端丙氨酸残基。8.包含至少一个根据权利要求1至5中任一项所述的ISVD的化合物。9.根据权利要求8所述的化合物，其包含至少两个根据权利要求1至5中任一项所述的ISVD。10.根据权利要求9所述的化合物，其中所述至少两个ISVD可以相同或不同。11.根据权利要求10所述的化合物，其中所述至少两个ISVD独立地选自由SEQIDNO：8-41、61-66和69组成的组。12.根据权利要求8-11中任一项所述的化合物，其中所述化合物还包含血清蛋白结合性部分。13.根据权利要求12所述的化合物，其中所述血清蛋白结合性部分结合血清白蛋白。14.根据权利要求12或13所述的化合物，其中所述血清蛋白结合性部分是血清白蛋白结合性ISVD。15.根据权利要求14所述的化合物，其中所述血清白蛋白结合性ISVD基本上由4个构架区(分别为FR1至FR4)和3个互补决定区(分别为CDR1至CDR3)组成，其中CDR1为SFGMS，CDR2为SISGSGSDTLYADSVKG并且CDR3为GGSLSR。16.根据权利要求15所述的化合物，其中所述血清白蛋白结合性ISVD包含Alb8、Alb23、Alb129、Alb132、Alb11、Alb11(S112K)-A、Alb82、Alb82-A、Alb82-AA、Alb82-AAA、Alb82-G、Alb82-GG、Alb82-GGG、Alb92和Alb223。17.根据权利要求12或13所述的化合物，其中所述血清蛋白结合性部分是基于非抗体的多肽。18.根据权利要求8-11中任一项所述的化合物，其进一步包含PEG。19.根据权利要求8-18中任一项所述的化合物，其中所述ISVD彼此直接连接或通过接头连接。20.根据权利要求8-19中任一项所述的化合物，其中第一ISVD和/或第二ISVD和/或可能的第三ISVD和/或可能的...

【专利技术属性】
技术研发人员：玛丽安格·比斯，约阿希姆·布克内奥，彼得·卡斯特尔，吉诺·范黑克，
申请(专利权)人：埃博灵克斯股份有限公司，
类型：发明
国别省市：比利时,BE