作为转移性去势抵抗性前列腺癌(mCRPC)患者的治疗选择的生物标志物的雄激素受体变体7制造技术

本发明专利技术提供了鉴别与雄激素受体(AR)靶向疗法相比，对紫杉烷治疗具有改善应答应答的转移性去势抵抗性前列腺癌(mCRPC)患者的方法，包括(a)在获自所述患者的血液样品中进行包括有核细胞的免疫荧光染色和形态学表征的直接分析，以产生循环肿瘤细胞(CTC)数据，其中所述分析包括检测所述细胞中雄激素受体变体7(AR‑V7)的存在，和(c)评价所述CTC数据，以鉴别与ARS‑导向的疗法相比，对紫杉烷疗法具有改善应答的mCRPC患者。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】作为转移性去势抵抗性前列腺癌(mCRPC)患者的治疗选择的生物标志物的雄激素受体变体7本专利技术申请主张2015年9月25日提交的美国临时专利申请No.62/233,206的权益，该专利申请的全部内容作为参考并入本文。本专利技术公开一般地涉及用于为转移性去势抵抗性前列腺癌(mCRPC)患者选择疗法的方法，其包括在循环肿瘤细胞(CTCs)中检测雄激素受体变体7(AR-V7)。
技术介绍
在美国，前列腺癌(PC)仍是最常见的非皮肤癌症。仅在2014年，前列腺癌的预计发病率为233,000例，其中死亡29,480人，这使得转移性前列腺癌疗法确实成为尚未满足的医学需求。Siegel等人,2014.CACancerJClin.2014；64(1):9–29。欧洲流行病学研究显示了相当的数据，其中2012年预计新发病416700例，占癌症诊断患者的22.8％。总的来说，预期有92200例PC-特异性死亡，使得3位癌症患者中有1位可能死于PC，其死亡率为9.5％。随着仅在过去5年中所测试和批准用于患有转移性去势治疗-耐受性前列腺癌(mCRPC)的患者治疗的新型试剂的指数增长，出现了有关这些试剂的最佳顺序和组合的问题。存在一些指南，其帮助指导临床医师最佳的顺序方法，并且将评价症状的存在或缺少、表现状况以及疾病负荷，从而帮助对于这些试剂确定最佳顺序。Mohler等人,2014,JNatlComprCancNetw.2013；11(12):1471–1479；Cookson等人,2013,JUrol.2013；190(2):429–438。目前，批准的治疗包括紫杉烷类细胞毒性药物和雄激素-靶向疗法。临床医师的困难在于决定施用这些疗法的最佳顺序从而为患者提供最大的益处。然而，基于患者间对疗法的异源反应并且根据每个试剂的交叉抗药性，疗法失败仍是显著的问题。Mezynski等人,AnnOncol.2012；23(11):2943–2947；Noonan等人,AnnOncol.2013；24(7):1802–1807；Pezaro等人,EurUrol.2014,66(3):459-465。另外，患者可能会失去从已证明提供总生存期延长的每种药物获得最大益处的治疗窗。因此，鉴别具有从靶向疗法获得益处的最大可能的目标人群的更好的方法仍是重要的目标。循环肿瘤细胞(CTC)代表了癌症诊断中的巨大发展，并且由于它们的无创测量而使其更有吸引力。Cristofanilli等人,NEnglJMed351:781-91,(2004)。从原发瘤或其转移性位点释放的CTC具有肿瘤生物学相关的重要信息。作为液体活组织检查定量和鉴定CTC帮助临床医师选择疗法过程并监视患者癌症发展。因此，CTC不但可以认为是转移性疾病的替代生物标志物，而且是无创追踪肿瘤变化、治疗反应、癌症复发或患者结局的有希望的重要工具。历史上，血流中极低水平的CTC结合它们未知的表型显著阻止了它们的检测并限制了它们的临床应用。目前，为了利用它们的信息，已发展了用于CTC检测、分离和鉴定的多种技术。雄激素受体信号导向的疗法(AR疗法)，包括乙酸阿比特龙+泼尼松(A)和恩杂鲁胺(E)延长mCRPC患者的生存并且是FDA批准的。在EpCAM选择的CTC中，拼接变体AR-V7mRNA的存在预期与对A&E的耐受性有关(Antonarakis等人，NewEnglandJournalofMedicine371.11(2014):1028-1038)而不是与对紫杉烷化疗(T)的耐受性有关(Antonarakis等人JClinOncol33,2015(suppl7；abstr138)。AR-V7可以在A&E或T之间的疗法选择中提供临床应用。对AR-V7mRNA测定在CTC中的预测价值的重要限制在于CTC中低频率和不稳定的mRNA测量的稳健性的分析验证，其可能不能满足适应社区实践的诊断工作流程。另外，不能评价EpCAM-CTC可能会导致对AR-V7生物标志物的采样不足。需要具有临床应用的诊断测试以告知选择或指导A和E或T的选择。本专利技术解决了该需要并提供了相关优势。
技术实现思路
本专利技术公开描述了使用来自需要疗法改变的进行性mCRPC患者的样品，用于在固定的单一CTC，包括全部CTC亚型中使用的AR-V7免疫荧光测试。本专利技术涉及鉴别与雄激素受体(AR)靶向疗法相比，对紫杉烷疗法具有改善应答的mCRPC患者的方法，其包括(a)在获自所述患者的血液样品中进行直接分析，包括有核细胞的免疫荧光染色和形态学表征以产生循环肿瘤细胞(CTC)数据，其中所述分析包括检测所述细胞中雄激素受体变体7(AR-V7)的存在，和(c)评价所述CTC数据以鉴别与雄激素受体信号-导向(ARS-directed)的疗法相比，对紫杉烷疗法具有改善应答的mCRPC患者。本专利技术涉及鉴别与雄激素受体(AR)靶向疗法相比，对紫杉烷疗法具有改善应答的mCRPC患者的方法，其包括(a)在获自所述患者的血液样品中进行直接分析，包括有核细胞的免疫荧光染色和形态学表征以产生循环肿瘤细胞(CTC)数据，其中所述分析包括检测所述细胞中雄激素受体变体7(AR-V7)的存在，和(c)评价所述CTC数据以鉴别与ARS-导向的疗法相比，对紫杉烷疗法具有改善应答的mCRPC患者，和基于AR-V7在CTC中的核定位，鉴别与ARS-导向的疗法相比，对紫杉烷疗法具有改善应答的所述mCRPC患者。本专利技术涉及鉴别与雄激素受体(AR)靶向疗法相比，对紫杉烷疗法具有改善应答的mCRPC患者的方法，其包括(a)在获自所述患者的血液样品中进行直接分析，包括有核细胞的免疫荧光染色和形态学表征以产生CTC数据，其中所述分析包括检测所述细胞中AR-V7的存在，和(c)评价所述CTC数据以鉴别与ARS-导向的疗法相比，对紫杉烷疗法具有改善应答的mCRPC患者，和基于AR-V7在CTC中的核定位，鉴别与ARS-导向的疗法相比，对紫杉烷疗法具有改善应答的所述mCRPC患者，其中AR-V7的核定位对应于对ARS-导向的疗法的耐受性。本专利技术涉及鉴别与雄激素受体(AR)靶向疗法相比，对紫杉烷疗法具有改善应答的mCRPC患者的方法，其包括(a)在获自所述患者的血液样品中进行直接分析，包括有核细胞的免疫荧光染色和形态学表征以产生CTC数据，其中所述分析包括检测所述细胞中AR-V7的存在，和(c)评价所述CTC数据以鉴别与ARS-导向的疗法相比，对紫杉烷疗法具有改善应答的mCRPC患者，和基于AR-V7在CTC中的核定位，鉴别与ARS-导向的疗法相比，对紫杉烷疗法具有改善应答的所述mCRPC患者，其中AR-V7的核定位对应于与ARS-导向的疗法相比，对紫杉烷疗法的积极反应。在一些实施方式中，所述核定位包括与来自邻近白细胞(WBC)的背景染色相比，信号强度高≥3倍的染色模式。在一些实施方式中，所述方法包括额外步骤(d)，其中如果鉴别为与ARS-导向的疗法相比，对紫杉烷疗法具有改善应答，则用紫杉烷疗法治疗患者。本专利技术还提供了在获自转移性去势抵抗性前列腺癌(mCRPC)患者的血液样品中进行直接分析的方法，包括有核细胞的免疫荧光染色和形态学表征以产生循环肿瘤细胞(CTC)数据，其中所述分析包括检测所述细胞中雄激本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.鉴别与雄激素受体(AR)靶向疗法相比，对紫杉烷疗法具有改善应答的转移性去势抵抗性前列腺癌(mCRPC)患者的方法，所述方法包括(a)在获自所述患者的血液样品中进行包括有核细胞的免疫荧光染色和形态学表征的直接分析，以产生循环肿瘤细胞(CTC)数据，其中所述分析包括检测所述细胞中雄激素受体变体7(AR‑V7)的存在，和(c)评价所述CTC数据以鉴别与雄激素受体信号‑导向(ARS‑导向)的疗法相比，对紫杉烷疗法具有改善应答的mCRPC患者。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.09.25 US 62/233,2061.鉴别与雄激素受体(AR)靶向疗法相比，对紫杉烷疗法具有改善应答的转移性去势抵抗性前列腺癌(mCRPC)患者的方法，所述方法包括(a)在获自所述患者的血液样品中进行包括有核细胞的免疫荧光染色和形态学表征的直接分析，以产生循环肿瘤细胞(CTC)数据，其中所述分析包括检测所述细胞中雄激素受体变体7(AR-V7)的存在，和(c)评价所述CTC数据以鉴别与雄激素受体信号-导向(ARS-导向)的疗法相比，对紫杉烷疗法具有改善应答的mCRPC患者。2.根据权利要求1所述的方法，其中，基于AR-V7在CTC中的核定位来鉴别与ARS-导向的疗法相比，对紫杉烷疗法具有改善应答的所述mCRPC患者。3.根据权利要求2所述的方法，其中，AR-V7的核定位对应于对ARS-导向的疗法的耐受性。4.根据权利要求2所述的方法，其中，AR-V7的核定位对应于与ARS-导向的疗法相比，对紫杉烷疗法的积极反应。5.根据权利要求2所述的方法，其中，所述核定位包括与来自邻近白细胞(WBC)的背景染色相比，信号强度高≥3倍的染色模式。6.根据权利要求1所述的方法，包括额外步骤(d)，其中如果鉴别为与ARS-导向的疗法相比，对紫杉烷疗法具有改善应答，则用紫杉烷疗法治疗患者。7.根据权利要求1所述的方法，还包括将有核细胞作为单层沉积到载玻片上的初始步骤。8.根据权利要求1所述的方法，其中，所述直接分析包括荧光扫描显微术。9.根据权利要求8所述的方法，其中，所述显微术提供了包含CTC和至少200个周围白细胞(WBC)的视场。10.根据权利要求1所述的方法，其中，所述CTC包含与的周围有核细胞相比不同的形态特征。11.根据权利要求10所述的方法，其中，所述形态特征包括由核尺寸、核形状、核中孔的存在、细胞尺寸、细胞形状和核质比、核详情、核轮廓、核的存在与否、细胞质的质量和细胞质的数量组成的组中的一个或...

【专利技术属性】
技术研发人员：瑞安·迪塔莫尔，
申请(专利权)人：艾匹克科学公司，
类型：发明
国别省市：美国,US