用于前列腺癌分析的组合物和方法技术

本发明专利技术涉及用于前列腺癌分析的组合物和方法。本发明专利技术提供基于使用酪胺信号扩增(TSA)检测循环肿瘤细胞(CTC)上的STEAP1来诊断前列腺癌的方法。本发明专利技术还提供确定STEAP1

【技术实现步骤摘要】
用于前列腺癌分析的组合物和方法
[0001]本申请是申请日为2016年4月20日、中国申请号为201680029704.9、专利技术名称为“用于前列腺癌分析的组合物和方法”的专利技术申请的分案申请。
[0002]相关申请
[0003]本申请要求2015年4月21日提交的美国临时专利申请No.62/150,724的优先权权益，将其通过提述完整并入本文。
专利

[0004]本专利技术涉及肿瘤学和癌症诊断领域，更具体地涉及用于前列腺癌筛查、分期和治疗监测的组合物和方法。在具体实施方案中，本专利技术涉及用于前列腺癌的新型预后和诊断试验以及治疗方法。
[0005]专利技术背景
[0006]前列腺癌是男性最常见的癌症之一。虽然早期发病的大多数前列腺癌是无症状和缓慢生长的，但某些前列腺癌更具侵袭性、令人痛苦并导致死亡。目前，两种主要类型的无创筛查试验可用于男性前列腺癌的检测。一种是数字直肠检查(DRE)，其允许医生通过将戴有手套的手指插入直肠并触摸前列腺来检测前列腺异常，另一种是前列腺表面抗原测试(PSA测试)，所述测试测量血液样品中的PSA抗原。虽然FDA已经批准与DRE一起使用PSA测试来帮助检测男性前列腺癌，但PSA测试在筛查中是有争议的，因为尚不清楚测试是否真的可以挽救生命。具体地说，基于这样的发现，即PSA筛查没有降低或几乎没有降低前列腺癌死亡率而同时导致引起不必要的疼痛和副作用的治疗或测试，美国预防服务工作组(United States Preventive Services Task Forces)最近建议不要在健康男性中进行PSA筛查(参见，例如R.Chou等人，Ann.Intern.Med.,October 7,2011E
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375；Djulbegovic等人，BMJ 2010,341:c4543)。前列腺癌的最明确诊断是活组织检查，其中从疑似患者取出一小块前列腺用于显微镜检查，以示肿瘤细胞的存在。显然，这样的操作在早期筛查和检测中是相当有创和不太理想的。因此，鉴于最近发现PSA筛查不能降低死亡率并且活组织检查是有创的，因此开发可以为前列腺癌的诊断和预后提供可靠结果的试剂和方法仍然存在大量需求。
[0007]与许多其他类型的癌症一样，前列腺癌患者的主要死亡原因不是原发性肿瘤，而是转移。一些原发性肿瘤细胞自身可以从原始组织脱离并进入循环。这些细胞称为循环肿瘤细胞(CTC)。一旦CTC将其自身种植在身体内的适合部位，它们可能发展成难以检测到的转移灶，但是当它们发展为继发性肿瘤时可能威胁生命。
[0008]CTC的检测和计数对于患者护理很重要，原因有很多。它们可能在原发性肿瘤之前可检出，从而允许早期诊断。它们对治疗的反应下降，因此计数CTC的能力允许人们监测给定治疗方案的有效性。此外，在辅助治疗中，CTC诊断可用作监测无可测量疾病患者复发的手段。例如，在乳房切除术后8
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22年，在36％的乳腺癌患者中发现存在明显来自微转移(单个肿瘤细胞的沉积或非常小的肿瘤细胞簇)的CTC。Meng等人，Clin.Can.Res.1024):8152
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62,2004。然而，在传统诊断测试失败的情况下，虽然CTC诊断提供了检测癌症的希望，但当前方法受到它们检测特异性肿瘤标志物(例如，STEAP1)的敏感性的限制。
[0009]另外，CTC可用于预测无进展生存期(PFS)和总生存期(OS)，因为已显示转移癌患者中循环肿瘤细胞的存在/数量与PFS和OS相关。参见，例如，Cristofanilli等人，J.Clin.Oncol.23(1):1420
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1430,2005；Cristofanilli等人，N.Engi.J.Med.351(8):781
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791,2004。然而，正如需要提高CTC诊断的敏感性一样，还需要提高检测特异性肿瘤标志物(例如，STEAP1)的CTC测试的敏感性，以确定PFS。
[0010]对于临床试验中的前列腺癌及许多其他疾病，存在着多种认可的治疗选项。治疗选项包括但不限于：在未给予任何治疗情况下进行主动监视和监测直到症状出现和/或改变为止、手术(例如，耻骨后前列腺切除术、会阴前列腺切除术、盆腔淋巴结清扫术和经尿道前列腺切除术)、放射治疗(例如，外放射治疗、进展内放射治疗(progression internal radiation therapy)和/或α发射体放射治疗)、激素治疗(例如，促黄体生成激素释放激动剂、抗雄激素如恩杂鲁胺、阻止肾上腺产生雄激素的药物、睾丸切除术、和雌激素)、化学疗法(例如，阿比特龙、比卡鲁胺、卡巴他赛、康士得、地加瑞克、多西他赛、恩杂鲁胺、醋酸戈舍瑞林、醋酸亮丙瑞林、盐酸米托蒽醌、泼尼松、西普鲁塞
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T(sipuleucel
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T)和二氯化镭223)、生物治疗以及双膦酸盐治疗。
[0011]具体地说，关于生物治疗，抗体药物缀合物(ADC)是特别有意义的，因为它们有希望提高细胞毒药物的治疗指数。STEAP1在转移性去势抗性前列腺癌(mCRPC)中过表达，并且在临床开发中是ADC的靶标。然而，需要伴随诊断来鉴定将对STEAP1
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ADC治疗作出反应的患者。同样，需要伴随诊断来鉴定正在对STEAP1
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ADC治疗作出反应的患者。因此，仍然需要伴随诊断来预测ADC疗法的功效，以便优化和开发新的患者治疗。
[0012]为了鉴定最有可能受益于STEAP1
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ADC治疗的患者，在存档和/或新获得的肿瘤组织中(使用CLIA认证的IHC测定法)、以及在血液中的循环肿瘤细胞(CTC)上(使用EPIC平台)将STEAP1表达用作预测性生物标志物。具体地说，本文中开发并公开了在鉴定STEAP1阳性CTC中具有增强的敏感性的新型多通道诊断和预后测试，以预测和评估STEAP1
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ADC治疗的功效。因此，本文中公开的STEAP1
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ADC CTC测定法的益处为：1)新的测定法可以检测具有STEAP1+mCRPC的患者，其检测敏感性是旧的测定法所不具备的，2)新的测定法可以检测STEAP1+mCRPC患者，无需有创且令人痛苦的活组织检查，所述患者是STEAP1
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ADC治疗的候选者，3)新的测定法最重要的是能够在整个治疗过程中监测STEAP1表达，而无需有创且令人痛苦的活组织检查。
[0013]专利技术概述
[0014]一方面，本公开提供了利用CTC来诊断测试受试者中的前列腺癌的方法，其包括：a)鉴定来自从测试受试者取得的血液样品的CTC；b)使CTC与特异性结合STEAP1的抗体、特异性结合CD45的抗体和特异性结合细胞角蛋白的抗体接触；c)用DAPI将CTC染色；和d)用增强信号的酪胺信号放大(TSA)方案检测DAPI染色和结合抗体；其中在没有CD45表达的情况下表达细胞角蛋白和前列腺特异性标志物并且显示DAPI染色的CTC的存在预测了测试受试者患有前列腺癌。本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于检测与前列腺癌有关的循环肿瘤细胞(CTC)标志物的方法，其包括：使包含在没有CTC富集的情况下自血液样品取得的CTC的组合物与特异性结合STEAP1的抗体、特异性结合CD45的抗体、特异性结合细胞角蛋白的抗体和DAPI接触；并检测在没有CD45表达的情况下表达细胞角蛋白和STEAP1且展现DAPI染色的CTC，其中结合至STEAP1的抗STEAP1抗体的检测包含酪胺信号放大(TSA)。2.权利要求1的方法，其中该抗STEAP1抗体是由具有微生物保藏号PTA
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12259的杂交瘤细胞生成的15A5抗体。3.权利要求1或2的方法，其进一步包括测定CTC上STEAP1的表达水平。4.权利要求1
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3中任一项的方法，其进一步包括基于CTC上STEAP1的表达水平对CTC分级，并确定每个级别中CTC的百分比。5.权利要求1
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4中任一项的方法，其进一步包括通过将每个级别中CTC的百分比乘以代表所述级别中该前列腺特异性标志物的表达水平的独特级别数来计算所述级别的级别得分，并将所有级别得分求和以获得H得分，其中该H得分指示该测试受试者中的前列腺癌的阶段。6.权利要求1
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5中任一项的方法，其中该抗STEAP
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1抗体以≤1000nM的KD结合STEAP
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1。7.权利要求1
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6中任一项的方法，其中该抗STEAP
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1抗体、该抗CD45抗体和/或该抗细胞角蛋白抗体与可检测标记物缀合。8.权利要求1的方法，其中该血液样品是全血样品。9.权利要求1
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8中任一项的方法，其中DAPI、STEAP1、CD45和/或细胞角蛋白信号使用FACS检测。10.权利要求1
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8中任一项的方法，其中DAPI、STEAP1、CD45和/或细胞角蛋白信号使用免疫组织化学检测。11.一种预测前列腺癌疗法在罹患前列腺癌的测试受试者中的功效的方法，其包括：使包含在没有CTC富集的情况下自该测试受试者的血液样品取得的CTC的组合物与特异性...

【专利技术属性】
技术研发人员：O，
申请(专利权)人：艾匹克科学公司，
类型：发明
国别省市：