RBMS3作为肿瘤耐药检测、治疗及预后分子靶点的应用制造技术

本发明专利技术公开了RBMS3作为肿瘤耐药检测、治疗及预后分子靶点的应用，本发明专利技术发现RBMS3缺失可促进肿瘤顺铂耐药性及肿瘤复发。目前大部分肿瘤的治疗方案都是手术切除辅助化疗，化疗耐药性现已成为影响肿瘤患者预后的重要因素。本发明专利技术寻找到一个特异性的分子标志物，可作为预测肿瘤耐药的重要分子标志物。本发明专利技术的目的基因可以在DNA水平检测，DNA比RNA或蛋白具有更强的稳定性，可提高诊断的准确性和局限性。本发明专利技术为肿瘤患者的治疗提供了有针对性的治疗方案，对于RBMS3‑非缺失的肿瘤患者，单独使用顺铂即可获得较好治疗效果；但对于RBMS3‑缺失的肿瘤患者，需联合顺铂和PRI‑724，才能使患者获得较好治疗效果。

RBMS3 as a molecular target for drug resistance detection, treatment and prognosis

The invention discloses the application of RBMS3 as a molecular target for tumor resistance detection, treatment and prognosis. It is found that the absence of RBMS3 promotes the cisplatin resistance and tumor recurrence. At present, most of the treatments for cancer are surgical excision and adjuvant chemotherapy. Chemotherapeutic resistance has become an important factor affecting the prognosis of cancer patients. The invention finds a specific molecular marker which can be used as an important molecular marker for predicting tumor resistance. The target gene of the invention can be detected at the DNA level, and the DNA has stronger stability than RNA or protein, which can improve the accuracy and limitation of diagnosis. The invention provides a targeted treatment scheme for tumor patients, and for RBMS3_non-missing tumor patients, cisplatin alone can achieve better therapeutic effect; but for RBMS3_missing tumor patients, cisplatin and PI_4 should be combined to achieve better therapeutic effect.

【技术实现步骤摘要】
RBMS3作为肿瘤耐药检测、治疗及预后分子靶点的应用
本专利技术涉及RBMS3作为肿瘤耐药检测、治疗及预后分子靶点的应用。
技术介绍
卵巢癌是妇科肿瘤中死亡率最高的肿瘤之一，其中上皮性卵巢癌(EpithelialOvarianCancer,EOC)是最常见的肿瘤类型。目前针对EOC的治疗方案是手术切除(细胞减压术)联合铂类药物为主的化学治疗。虽然超过80％的EOC患者在接受铂类药物的化疗后具有较好的缓解反应，但是超过75％的患者会由于对铂类药物产生耐药而导致肿瘤复发，从而造成EOC患者的5年生存率只有30％。因此，探索肿瘤耐药的分子调控机制并寻找其中的靶向调控分子是非常重要的研究方向和开发领域。导致肿瘤细胞抵抗铂类药物的分子机制主要包括抗凋亡、增加药物泵出及增强DNA修复能力等。已有文献报导，细胞内各种信号通路的异常激活可促进肿瘤细胞的耐药性，其中Wnt/β-catenin信号通路在多种肿瘤中的异常激活已被证实与顺铂、卡铂及奥沙拉铂等铂类耐药密切相关。乙酰基转移酶CREB结合蛋白(CBP)与β-catenin的结合可特异性地上调一系列与细胞泵药、抗凋亡及DNA修复的靶基因，包括ABCB1,ABCG2,Survivin，MMP-7，MRE11及MRE11等，因此Wnt/β-catenin/CBP信号通路的激活可显著促进肿瘤细胞的化疗抵抗性。由此，抑制CBP与β-catenin结合的小分子抑制剂PRI-724(ICG-001多用于体外实验研究中)目前正被运用于多种肿瘤的临床试验中，然而，由于缺乏特异性的分子靶向指标，PRI-724的临床运用效果受到极大的限制。基因变异是诱发肿瘤及促进肿瘤恶性发展的的重要因素之一，而染色体缺失则是其中最常见的类型。已有大量文献证明，染色体缺失可作为预测肿瘤患者的生存预后的标志物，并与肿瘤的化疗抵抗性相关。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供RBMS3作为卵巢癌耐药检测靶点、卵巢癌预后检测靶点、预测卵巢癌肿瘤复发检测靶点的应用。本专利技术的另一目的在于提供一种卵巢癌耐药、卵巢癌预后、或/和预测卵巢癌肿瘤复发的检测试剂盒。本专利技术的再一目的在于提供一种提高卵巢癌对顺铂类药物敏感性的药剂。本专利技术所采取的技术方案是：RBMS3作为肿瘤耐药检测靶点、肿瘤预后检测靶点、预测肿瘤复发检测靶点的应用，所述肿瘤耐药中的药物指顺铂类药物。进一步的，所述肿瘤包括卵巢癌、乳腺癌、头颈鳞癌、肝癌。检测RBMS3的试剂在制备肿瘤耐药检测试剂盒、或肿瘤预后检测试剂盒、或预测肿瘤复发检测试剂盒中的应用，所述肿瘤耐药中的药物指顺铂类药物。进一步的，所述定量检测RBMS3的试剂选自检测RBMS3基因水平拷贝数的试剂、定量检测RBMS3的RNA转录水平的试剂、定量检测RBMS3的蛋白表达水平的试剂中的至少一种。进一步的，所述肿瘤包括卵巢癌、乳腺癌、头颈鳞癌、肝癌。RBMS3蛋白或/和提高RBMS3蛋白表达的物质在制备提高肿瘤对顺铂类药物敏感性的药物中的应用。进一步的，所述肿瘤包括卵巢癌、乳腺癌、头颈鳞癌、肝癌。蛋白DKK3、AXIN1、BACH1和/或NFAT5在制备提高肿瘤对顺铂类药物敏感性的药物中的应用。提高DKK3、AXIN1、BACH1和/或NFAT5蛋白表达的物质在制备提高肿瘤对顺铂类药物敏感性的药物中的应用。进一步的，所述肿瘤包括卵巢癌、乳腺癌、头颈鳞癌、肝癌。一种肿瘤耐药、肿瘤预后、或/和预测肿瘤复发的检测试剂盒，该试剂盒中含有检测RBMS3的试剂，所述肿瘤耐药中的药物指顺铂类药物。进一步的，所述定量检测RBMS3的试剂选自检测RBMS3基因水平拷贝数的试剂、定量检测RBMS3的RNA转录水平的试剂、定量检测RBMS3的蛋白表达水平的试剂中的至少一种。进一步的，所述肿瘤包括卵巢癌、乳腺癌、头颈鳞癌、肝癌。一种提高肿瘤对顺铂类药物敏感性的药剂，该药剂中含有RBMS3蛋白、提高RBMS3蛋白表达的物质、蛋白DKK3、AXIN1、BACH1和/或NFAT5、提高DKK3、AXIN1、BACH1和/或NFAT5蛋白表达的物质中的至少一种。进一步的，所述肿瘤包括卵巢癌、乳腺癌、头颈鳞癌、肝癌。本专利技术的有益效果是：(1)本专利技术发现RBMS3缺失可作为顺铂耐药的重要分子标志物。由于目前大部分肿瘤的治疗方案都是手术切除辅助化疗，化疗耐药性现已成为影响肿瘤患者预后的重要因素。本专利技术寻找到一个特异性的分子标志物，可作为预测肿瘤耐药的重要分子标志物。(2)以往的检测结果易受取样环境、实验条件影响。以往的肿瘤分子标志物大多通过检测目的基因的RNA及蛋白表达水平，由于RNA及蛋白在取样及提取过程中容易降解，所以实验结果可信度不高。本专利技术的目的基因可以在DNA水平检测，DNA比RNA或蛋白具有更强的稳定性，可以提高诊断的准确性和局限性。(3)本专利技术为肿瘤患者的治疗提供了有针对性的治疗方案，对于RBMS3-非缺失的肿瘤患者，单独使用顺铂即可以获得较好的治疗效果；但对于RBMS3-缺失的肿瘤患者，需要联合使用顺铂+PRI-724，才能使患者获得较好的肿瘤治疗效果。(4)现有的分子标志物具有肿瘤类型局限性。大部分分子标志物都局限于某一种或某一类肿瘤的运用，本专利技术RBMS3的缺失是从多种肿瘤中筛选出来的结果，提示本专利技术的应用具有多种肿瘤的广泛应用行，可以消除应用上的肿瘤类型局限性。附图说明图1为RBMS3在多种肿瘤中的缺失情况以及与肿瘤耐药的相关性；A～D为在TCGA公共数据库中，RBMS3在包括卵巢癌在内的13种肿瘤中存在缺失并与患者的复发呈正相关；E为A2780和SKOV3细胞的MTT结果均显示低表达RBMS3对顺铂的作用具有最显著的抑制效应；E～H为在临床样品中，RBMS3也被证实在卵巢癌中缺失，并与患者的肿瘤耐药及生存预后呈正相关；G中“+/+”代表RBMS3是野生型，“+/-”代表RBMS3杂合性缺失；I中RBMS3-低表达组的患者具有更高的复发率及更短的无复发生存时间；图2为在体内实验中RBMS3缺失对上皮性卵巢癌细胞顺铂耐药的影响；结果显示在PDX模型及腹腔种植肿瘤模型中，RBMS3缺失均增强上皮性卵巢癌细胞的顺铂耐药性，并提示小鼠较短的生存时间；图中Sc-DOPC、si#1-DOPC或si#2-DOPC分别表示Scramble-DOPC、RBMS3-si#1-DOPC或RBMS3-si#2-DOPC；图3为在体外实验中RBMS3缺失对上皮性卵巢癌细胞顺铂耐药的影响；显示为RBMS3缺失在多种体外顺铂处理实验中均抑制上皮性卵巢癌细胞的凋亡从而促进上皮性卵巢癌细胞的顺铂耐药性；图4为RBMS3调控上皮性卵巢癌顺铂耐药的调控途径探索；显示为RBMS3缺失可显著促进Wnt/β-Catenin信号通路的激活，并上调其下游一系列基因的RNA和蛋白表达；图5为RBMS3调控Wnt/β-Catenin信号通路的具体调控分子机制；显示为RBMS3可作为一个RNA结合蛋白，稳定多个Wnt/β-Catenin信号通路的负调控因子(DKK3,AXIN1,BACH1,NFAT5)的RNA，从而抑制Wnt/β-Catenin信号通路的激活；图6为体内外实验验证小分子抑制剂ICG-001/PRI-724对顺铂敏感性的影响；显示为在多个体内外实验中本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.RBMS3作为肿瘤耐药检测靶点、肿瘤预后检测靶点、预测肿瘤复发检测靶点的应用，所述肿瘤耐药中的药物指顺铂类药物。

【技术特征摘要】
1.RBMS3作为肿瘤耐药检测靶点、肿瘤预后检测靶点、预测肿瘤复发检测靶点的应用，所述肿瘤耐药中的药物指顺铂类药物。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述肿瘤包括卵巢癌、乳腺癌、头颈鳞癌、肝癌。3.检测RBMS3的试剂在制备肿瘤耐药检测试剂盒、或肿瘤预后检测试剂盒、或预测肿瘤复发检测试剂盒中的应用，所述肿瘤耐药中的药物指顺铂类药物。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述定量检测RBMS3的试剂选自检测RBMS3基因水平拷贝数的试剂、定量检测RBMS3的RNA转录水平的试剂、定量检测RBMS3的蛋白表达水平的试剂中的至少一种。5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述肿瘤包括卵巢癌、乳腺癌、头颈鳞癌、肝癌。6.RBMS3蛋白或/和提高RBMS3蛋白表达的物质在制备提高肿瘤对顺铂类药物敏感性的药物中的应用。7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述肿瘤包括卵巢癌、乳腺癌、头颈鳞癌、肝癌。8.蛋白DKK3、AXIN1、BACH1和/或NFAT5在制备提高肿瘤对顺铂类药物敏感性的药物中的应用。9.提高DKK3、AXIN1、BAC...

【专利技术属性】
技术研发人员：李隽，宋立兵，吴阁艳，朱金容，胡雅梦，谭展瑶，曹丽雪，
申请(专利权)人：中山大学，广州杰尔克生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44