NKX2-8在肿瘤耐药检测中的应用及FAO抑制剂在NKX2-8缺失型肿瘤中的应用制造技术

本发明专利技术公开了NKX2‑8在肿瘤耐药检测中的应用及FAO抑制剂在NKX2‑8缺失型肿瘤中的应用。本发明专利技术发现了在NKX2‑8缺失的情况下，机体通过激活FAO途径显著促进了肿瘤的化疗抗性和复发。本发明专利技术联合脂肪酸氧化抑制剂ETO使NKX2‑8缺失的上皮性卵巢癌对化疗药物更敏感。这些结果说明NKX2‑8在化学耐药性中的重要作用，可作为NKX2‑8缺失型肿瘤的新型治疗策略。本发明专利技术为肿瘤疾病提供了新的诊断、治疗方法和药物筛选平台。

Application of NKX2-8 in detection of drug resistance and application of FAO inhibitor in NKX2-8 deficient tumors

The invention discloses the application of NKX2_8 in the detection of tumor resistance and the application of FAO inhibitor in NKX2_8 deleted tumor. In the absence of NKX2_8, the body significantly promotes the chemotherapeutic resistance and recurrence of the tumor by activating the FAO pathway. The invention combined with fatty acid oxidation inhibitor ETO makes epithelial ovarian cancer with NKX2_8 deletion more sensitive to chemotherapy drugs. These results suggest that NKX2_8 plays an important role in chemical resistance and may be a novel therapeutic strategy for NKX2_8 deleted tumors. The invention provides a new diagnosis, treatment method and drug screening platform for tumor diseases.

【技术实现步骤摘要】
NKX2-8在肿瘤耐药检测中的应用及FAO抑制剂在NKX2-8缺失型肿瘤中的应用
本专利技术涉及NKX2-8在肿瘤耐药检测、治疗、预后中的应用及FAO抑制剂在NKX2-8缺失型肿瘤治疗中的应用。
技术介绍
卵巢恶性肿瘤是女性生殖器常见的恶性肿瘤之一，发病率仅次于子宫颈癌和子宫体癌而列居第三位。但卵巢上皮癌死亡率却占各类妇科肿瘤的首位，对妇女生命造成严重威胁。由于卵巢的胚胎发育、组织解剖及内分泌功能较复杂，早期症状不典型，术前鉴别卵巢肿瘤的组织类型及良恶性相当困难。在卵巢上皮癌患者手术中发现肿瘤局限于卵巢的仅占30％，大多数已扩散到子宫，双侧附件，大网膜及盆腔各器官，所以一旦诊断后多处于卵巢癌的中后期，因而多采用手术切除以及化学药物紫杉醇-铂的联合治疗。不过上皮性卵巢癌妇女的总生存期从30年前进行化疗以来却几乎没有改善。虽然上皮性卵巢癌患者对标准一线治疗的初步临床反应(包括原发性减瘤手术，其次是紫杉烷-铂类化疗)的结果都比较理性，但大多数接受化疗的上皮性卵巢癌患者在短期缓解后会发生复发并发展为化疗耐药。近25％的上皮性卵巢癌患者在完成化疗后6个月内复发，高达90％的晚期疾病患者随着化疗耐药性的出现在18个月内复发，最终死于这种疾病。因此，显着改善上皮性卵巢癌患者的生存需要逆转患者对化疗药物的化学耐药性。我们知道，异常代谢是人类癌症发展的标志，在癌症进展和化疗失败中起重要作用。各种实验和临床研究表明，癌细胞代谢重编程失调的WarburgEffect的葡萄糖代谢，谷氨酸分解和脂肪酸代谢均可能有利于肿瘤细胞生长和化疗失败，这表明异常代谢是癌细胞的独特脆弱性和癌症治疗的有希望的靶标。由于富含脂肪细胞的微环境，上皮性卵巢癌的代谢与其他癌症是独一无二的，其中高度依赖脂肪酸分解产生ATP和NADPH生物合成中间体，有助于上皮性卵巢癌的生长，转移和化学抗性。例如，脂肪细胞通过将脂肪酸转移到脂肪酸氧化(FAO)的高活化肿瘤细胞中来促进转移性细胞的增殖。同时，铂类似物激活的MSCs分泌的多不饱和脂肪酸通过增加脂肪酸氧化的活性，赋予了上皮性卵巢癌对多种化疗的抵抗力。所有这些对在上皮性卵巢癌中激活脂肪酸氧化的研究产生了深刻的认识，并建议以脂肪酸氧化为目标，可能是针对上皮性卵巢癌的潜在临床战略。此外，已经测试了使用CPT抑制剂如Etomoxir(简称为ETO，简称为ETO)和Teglicar(目前在糖尿病治疗临床试验中)的药理学抑制，其在多种癌症类型中显示出显着的抗肿瘤作用，例如淋巴瘤，白血病，三阴性乳腺癌和神经胶质瘤。因此，研究癌细胞对脂肪酸代谢的依赖将为上皮性卵巢癌患者提供潜在的个性化治疗。
技术实现思路
这了解决上述存在的问题，本专利技术为上皮性卵巢癌的化疗和脂肪酸氧化抑制类药物的联合治疗的提供充足的理论基础，发现了可作为上皮性卵巢癌的临床诊断标记物之一以及相应的检测试剂盒的制备，如果能检测到患者体内出现NKX2-8基因缺失的时候可以结合脂肪酸β氧化的抑制剂联合紫杉醇-顺铂等临床化疗药物的治疗。本专利技术还发现通过检测NKX2-8是否缺失，以及更重要的是检测脂肪酸β氧化的几个关键酶的表达量是否增高，从而来判断上皮性卵巢癌是否复发。本专利技术的目的之一在于提供NKX2-8作为肿瘤耐药检测靶点、肿瘤预后检测靶点、预测肿瘤复发检测靶点的应用。本专利技术的再一目的在于提供检测NKX2-8的试剂在制备肿瘤耐药检测试剂盒、或肿瘤预后检测试剂盒、或预测肿瘤复发检测试剂盒中的应用。本专利技术的再一目的在于提供NKX2-8蛋白或/和提高NKX2-8蛋白表达的物质在制备提高肿瘤对紫杉醇和/或顺铂敏感性的药物中的应用。本专利技术的再一目的在于提供脂肪酸氧化抑制剂在制备治疗NKX2-8缺失型肿瘤药物中的应用。本专利技术的再一目的在于提供脂肪酸氧化抑制剂在制备提高NKX2-8缺失型肿瘤对紫杉醇和/或顺铂敏感性的药物中的应用。本专利技术的再一目的在于提供抑制CPT1A、ACADVL和/或ACSL1表达的试剂在制备提高NKX2-8缺失型肿瘤对紫杉醇和/或顺铂敏感性的药物中的应用。本专利技术的再一目的在于提供检测CPT1A、ACADVL和/或ACSL1表达量的试剂在制备肿瘤耐药检测试剂盒、或肿瘤预后检测试剂盒、或预测肿瘤复发检测试剂盒中的应用。本专利技术所采取的技术方案是：NKX2-8作为肿瘤耐药检测靶点、肿瘤预后检测靶点、预测肿瘤复发检测靶点的应用，所述肿瘤耐药中的药物包括紫杉醇、顺铂。定量检测NKX2-8的试剂在制备肿瘤耐药检测试剂盒、或肿瘤预后检测试剂盒、或预测肿瘤复发检测试剂盒中的应用，所述肿瘤耐药中的药物包括紫杉醇、顺铂。进一步的，所述定量检测NKX2-8的试剂选自检测NKX2-8基因是否缺失或突变的试剂、定量检测NKX2-8的RNA转录水平的试剂、定量检测NKX2-8的蛋白表达水平的试剂中的至少一种。进一步的，所述检测NKX2-8基因是否缺失或突变的试剂含有SEQIDNO:1～2所述的引物或者检测NKX2-8基因的探针。NKX2-8蛋白或/和提高NKX2-8蛋白表达的物质在制备提高肿瘤对紫杉醇和/或顺铂敏感性的药物中的应用。脂肪酸氧化抑制剂、和/或抑制CPT1A、ACADVL和/或ACSL1表达的试剂在制备治疗NKX2-8缺失型肿瘤药物中的应用。脂肪酸氧化抑制剂、或抑制CPT1A、ACADVL和/或ACSL1表达的试剂在制备提高NKX2-8缺失型肿瘤对紫杉醇和/或顺铂敏感性的药物中的应用。进一步的，所述脂肪酸氧化抑制剂包括乙莫克舍、替格列卡、派克西林、雷诺嗪、曲美他。进一步的，所述抑制CPT1A、ACADVL和/或ACSL1表达的试剂为沉默CPT1A、ACADVL和/或ACSL1的siRNA序列。进一步的，沉默CPT1A、ACADVL、ACSL1的siRNA序列分别如SEQIDNO:3、SEQIDNO:4、SEQIDNO:5所示。检测CPT1A、ACADVL和/或ACSL1表达量的试剂在制备肿瘤耐药检测试剂盒、或肿瘤预后检测试剂盒、或预测肿瘤复发检测试剂盒中的应用，所述肿瘤耐药中的药物包括紫杉醇、顺铂。一种肿瘤耐药、肿瘤预后、或/和预测肿瘤复发的检测试剂盒，该试剂盒中含有检测NKX2-8的试剂，或/和检测CPT1A、ACADVL和/或ACSL1表达量的试剂，所述肿瘤耐药中的药物包括紫杉醇、顺铂。进一步的，所述定量检测NKX2-8的试剂选自检测NKX2-8基因是否缺失或突变的试剂、定量检测NKX2-8的RNA转录水平的试剂、定量检测NKX2-8的蛋白表达水平的试剂中的至少一种。一种提高肿瘤对紫杉醇和/或顺铂敏感性的药剂，，该药剂中含有NKX2-8蛋白、提高NKX2-8蛋白表达的物质、脂肪酸氧化抑制剂、抑制CPT1A、ACADVL和/或ACSL1表达的试剂中的至少一种。一种提高NKX2-8缺失型肿瘤对紫杉醇和/或顺铂敏感性的药剂，该药剂中含有NKX2-8蛋白、提高NKX2-8蛋白表达的物质、脂肪酸氧化抑制剂、抑制CPT1A、ACADVL和/或ACSL1表达的试剂中的至少一种。本专利技术的有益效果是：(1)本专利技术发现了在NKX2-8缺失的情况下，机体通过激活FAO途径显著促进了肿瘤(如上皮性卵巢癌)的化疗抗性和复发。本专利技术联合脂肪酸氧化抑制剂ETO使NKX2-8缺失的上皮性卵巢癌对化疗本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.NKX2‑8作为肿瘤耐药检测靶点、肿瘤预后检测靶点、预测肿瘤复发检测靶点的应用，所述肿瘤耐药中的药物包括紫杉醇、顺铂。

【技术特征摘要】
1.NKX2-8作为肿瘤耐药检测靶点、肿瘤预后检测靶点、预测肿瘤复发检测靶点的应用，所述肿瘤耐药中的药物包括紫杉醇、顺铂。2.定量检测NKX2-8的试剂在制备肿瘤耐药检测试剂盒、或肿瘤预后检测试剂盒、或预测肿瘤复发检测试剂盒中的应用，所述肿瘤耐药中的药物包括紫杉醇、顺铂。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述定量检测NKX2-8的试剂选自检测NKX2-8基因是否缺失或突变的试剂、定量检测NKX2-8的RNA转录水平的试剂、定量检测NKX2-8的蛋白表达水平的试剂中的至少一种。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述检测NKX2-8基因是否缺失或突变的试剂含有SEQIDNO:1～2所述的引物或者检测NKX2-8基因的探针。5.NKX2-8蛋白或/和提高NKX2-8蛋白表达的物质在制备提高肿瘤对紫杉醇和/或顺铂敏感性的药物中的应用。6.脂肪酸氧化抑制剂、和/或抑制CPT1A、ACADVL和/或ACSL1表达的试剂在制备治疗NKX2-8缺失型肿瘤药物中的应用。7.脂肪酸氧化抑制剂、或抑制CPT1A、ACADVL和/或ACSL1表达的试剂在制备提高NKX2-8缺失型肿瘤对紫杉醇和/或顺铂敏感性的药物中的应用。8.根据权利要求6或7所述的应用，其特征在于，所述脂肪酸氧化抑制剂包括乙莫克舍、替格列卡、派克西林、雷诺嗪、曲美他。9.根据权利要求6或7所述的应用，其特征在于，所述抑制CPT1A、ACADVL和/或ACSL1表达的试剂为沉默CPT1A、A...

【专利技术属性】
技术研发人员：李隽，宋立兵，朱金容，吴阁艳，李梓文，曹丽雪，谭展瑶，
申请(专利权)人：中山大学，广州杰尔克生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44