一种鹿筋蛋白低聚肽的工业化生产工艺制造技术

本发明专利技术提供了一种鹿筋蛋白低聚肽的工业化生产工艺。具体步骤包括：1、原料、2、浸泡软化、3、绞碎、4、脱脂、5、磨浆、6、盐析、7、压滤、8、酶解、9、超滤低聚肽、10、纳滤截留浓缩、脱盐、脱杂质、11、除菌、12、灌装、13、冷冻干燥、14、压瓶盖塞、贴标签。发明专利技术方法工艺简单、设计合理,充分利用自然资源，可实现高附加值的工业化和规模化生产。本发明专利技术可作为中成药、功能保健品的添加剂或直接服用，同时还可以作为化妆品添加剂使用。

Industrialized production process of deer tendon protein oligopeptide

The invention provides an industrial production process of deer tendon protein oligopeptide. Specific steps include: 1, raw materials, 2, immersion softening, 3, grinding, 4, degreasing, 5, pulping, 6, salting out, 7, pressure filtration, 8, enzymatic hydrolysis, 9, ultrafiltration oligopeptide, 10, nanofiltration interception concentration, desalination, impurity removal, 11, bactericidal, 12, filling, 13, freeze drying, 14, pressure bottle cap stopper, labeling. The invention method has the advantages of simple process, reasonable design, full utilization of natural resources, and can realize industrialization and large-scale production with high added value. The invention can be used as an additive of Chinese patent medicine, functional health care products or directly taken, and can also be used as a cosmetic additive.

【技术实现步骤摘要】
一种鹿筋蛋白低聚肽的工业化生产工艺
本专利技术涉及一种鹿筋蛋白低聚肽的工业化生产工艺，属于医药工业、中成药、功能保健品及化妆品添加剂领域。
技术介绍
我国是世界上养鹿和使用鹿产品最早的国家，已有260多年的养鹿历史和1300多年的鹿产品药用史。我国鹿产品多为原料粗加工产品,极大地浪费了珍贵的鹿资源。缺少以鹿产品为主要原料的保健品、食品和化妆品等精深加工产品。鹿筋为鹿科动物梅花鹿或马鹿四肢的筋。性温，味淡微咸，有补肾阳、壮筋骨之功效。鹿筋胶原蛋白能有效控制骨质丢失,促进骨形成,改善骨代谢的负平衡状态,对维甲酸导致的骨质疏松症具有良好的防治作用。随着蛋白低聚肽市场需求的日益扩大，开发具有生物保健活性的高效安全环保的鹿筋蛋白低聚肽生产工艺，对科学研究及实际应用均具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术是在上述背景下而提供一种产出率高、纯度高的鹿筋蛋白低聚肽的工业化生产工艺。本专利技术包括以下步骤：1、原料、2、浸泡软化、3、绞碎、4、脱脂、5、磨浆、6、盐析、7、压滤、8、酶解、9、超滤低聚肽、10、纳滤截留浓缩、脱盐、脱杂质、11、除菌、12、灌装、13、冷冻干燥、14、压瓶盖塞、贴标签。采用酶技术进行酶解，收集合适分子量的肽片段，采用超滤膜技术，经过浓缩、冷冻真空干燥制备出具备多种生理活性功能的鹿筋蛋白低聚肽。一种鹿筋蛋白低聚肽的工业化生产工艺，具步骤如下：1、原料原料选用经过刮洗与浸泡，剥离筋膜，刮去残肉，的干鹿筋。2、浸泡软化将干鹿筋放入不锈钢清洗槽中，注入纯净水，浸泡48h-72h，直至鹿筋完全复水，成为松软状态。3、绞碎将泡松软的鹿筋捞出淋水后，放入绞肉机中,将其绞碎成粒度为0.1-0.2cm的碎块。4、脱脂将绞碎鹿筋用1.0-2.0%醋酸溶液的脱脂液浸泡脱脂1-2d（天）,最后用30-50℃温水漂洗2次,,获得脱脂浸泡的鹿筋。5、磨浆将脱脂后的鹿筋用骨泥磨研磨成浆液，使成为颗粒在20～50μm大小精磨浆液。6、盐析将制得的精磨浆液调节pH值4.0～4.5，加入NaCl粉末进行盐析，边加边搅拌，使胶原蛋白完全析出后，静置12～24h，获得胶原混合液。7、压滤将混合液均匀铺设到板框滤布上，输送混合液开始压滤1～6h，通过出口阀的开度调节控制压滤进度，弃去滤饼，得到透明的滤液。8、酶解将压滤后的浆液调节pH值为9.0～9.5，在50℃～60℃条件下，加入1-3％胰蛋白酶，使鹿筋蛋白酶解反应8h～10h，在酶解过程中以30转/min不断搅拌后得到含有低聚肽混合液。9、超滤低聚肽将酶解液经反渗透超滤机组进行分级超滤，先经过分子量75KDa的超滤器，再经过分子量3KDa的超滤器过滤。合适分子量片段的肽透过膜进入收集器，大片段的肽继续和酶作用再酶解，再超滤获得低聚肽过滤液。超滤后将其温度升温至80～95℃进行高温灭酶。10、纳滤截留浓缩、脱盐、脱杂质将蛋白低聚肽滤液泵入反渗透纳滤机组的分子量为500Da的纳滤器中进行浓缩。再将浓缩液加同样的体积水洗脱3-5次，获得浓缩至含水量仅有3-5%左右的最小体积的纳滤截留液。将收集含有原料中的其他物质及无机盐等纳滤过滤液，进行净化处理,收集的纳滤截留液为低聚肽浓缩液。11、除菌将浓缩液采用分子量60-80KDa中空纤维超滤器过滤后，再进入0.22μm微孔滤芯进行过滤，通过截留的方式进行除菌。12、灌装除菌后的低聚肽浓缩液用自动灌装机进行灌装，装入清洁无菌的10ml西林瓶中，剂量控制在5ml以内，保证净含量的稳定，每瓶装量200mg，并加压将橡胶塞塞至半加塞状态，得到灌装好的产品。13、冷冻干燥（1）预冻固化将罐装浓缩液西林瓶，摆放在真空冷冻干燥机冻干仓内的隔板上，预冻固化温度-30～-45℃，并保持5～8h，使浓缩液中水分充分冻结，确保无液体存在。（2）升华干燥：冻干机启动真空系统，将仓内压力抽至30～50pa，采取缓慢升温,以每小时1℃的升温速率,缓慢升温到-20～-25℃,保温6～8h,再以每小时2℃的升温速率,缓慢升温到-10℃～-12℃,保温3～6h，进行升华干燥。（3）解析干燥：升华干燥后，再以每小时3℃的升温速率,缓慢升温到40～50℃,压力为10～20Pa。保温6～8h,完成解析干燥冻干，加压塑料盖后取出。14、压瓶盖塞、贴标签冷冻干燥后在无菌条件下机械压瓶盖塞，进入贴标机使其贴好标签。制成蛋白纯度高达99.5%、相对分子质量小于1000Da的低聚肽成份含量平均大于92%的鹿筋低聚肽成品粉。与现有技术相比，本专利技术的主要优点在于：1、作为本专利技术的进一步改进，本专利技术充分利用加工废弃物鹿筋为原料、容易得到、成本低、解决现有资源存在的利用率及附加值低的问题。干鹿筋经过浸泡软化，绞碎、再经骨泥磨研磨后使原料更细腻均匀，破碎效果好，提高提取的低聚肽含量创造了有利条件。2、作为本专利技术的进一步改进，本专利技术在蛋白低聚肽提取上采用NaCl粉末进行盐析的方法先将胶原蛋白置换出来，并在盐析后进行板框压滤机压滤，然后对压滤得浆液进行酶解。在酶解前对鹿筋胶原蛋白所用的酶进行了单酶及复合蛋白酶筛选验证，通过验证选用了具有复合酶功能的胰蛋白酶，并采取适度的酶解后、超滤、再酶解的反复酶解提取方法，破坏了部分肽键形成分子量小于1000Da的蛋白低聚肽，对没有达到小分子肽的提取液实现了进一步酶解，最后采取高温灭酶，该酶解工艺设计使鹿筋胶原蛋白分解成小于1000Da分子量的蛋白低聚肽的成份含量平均高达92%。因而提高了鹿筋蛋白活性和利用率。3、作为本专利技术的进一步改进，本专利技术采用了反渗透超滤机组的超过滤方法，通过反复截留大分子物质，透过小分子物质而达到过滤、分离的目的。先经过分子量75KDa的超滤器过滤，再经过分子量3KDa的超滤器过滤，截留分子量在2000-100000Da蛋白肽，将1000Da以下的小分子量片段低聚肽透过膜进入收集器，大片段的肽继续和酶作用，再行超滤。保证了低聚肽产品的集中产出和原料的充分利用。4、作为本专利技术的进一步改进，本专利技术采用分子量为500Da反渗透纳滤机的纳滤器，通过纳滤获得了低聚肽截留浓缩液，同时使得盐、杂质随着纳滤过滤液被脱出。大大提高了蛋白低聚肽的纯度，使得蛋白低聚肽纯度高达99.5%。同时将收集的含有盐、杂质的纳滤过滤液,泵入生化处理池，进行净化处理,达标后排放，使得生产工艺达到了绿色环保标准。5、作为本专利技术的进一步改进，本专利技术采用物理除菌的方法，根据蛋白低聚肽的分子量及细菌分子量选用了分子量60-80KDa中空纤维超滤器再过滤，过滤后，进入0.22微米除菌小滤器进行除菌。该除菌的方法具有不破坏有效成分，不增加其他污染，效率高，除菌效果好，有效提高了蛋白低聚肽产品的保质期。6、作为本专利技术的进一步改进，本专利技术蛋白低聚肽的生产是在高效连续自动化生产系统下生产，整个工艺流程多为封闭条件下生产，如采用自动灌装机进行灌装，尤其是本专利技术冷冻干燥采取了缓慢升温技术，使整个升华过程中温度不超过共熔点，不会造成冰晶融化而影响低聚肽粉的品质，保证了蛋白低聚肽产品的高活性。本专利技术环保优势突出，不使用有毒试剂、无污染物排放,达到清洁生产、绿色环保，产品安全卫生，具有较好的工业化生产先进性和实用性。为鹿筋合理利用开辟了新的途径，为鹿筋蛋白低聚肽产业化和规模化生产提供了有效的工艺方法。具体本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种鹿筋蛋白低聚肽的工业化生产工艺，具特征在于步骤如下：（1）原料原料选用干鹿筋；（2）浸泡软化注水浸泡48h‑72 h；（3）绞碎绞碎成粒度为0.1‑0.2cm的碎块；（4）脱脂将绞碎鹿筋用1.0‑2.0%醋酸溶液的脱脂液浸泡脱脂1‑2d,最后用30‑50℃温水漂洗2次,,获得脱脂浸泡的鹿筋；（5）磨浆磨成颗粒在20～50μm磨浆液；（6）盐析将制得的磨浆液调节pH值4.0～4.5，加入NaCl粉末进行盐析，边加边搅拌，使胶原蛋白完全析出后，静置12～24h，获得胶原混合液；（7）压滤将混合液均匀铺设到板框滤布上，输送混合液开始压滤1～6h，弃去滤饼，得到透明的滤液；（8）酶解将压滤后的浆液调节pH值为9.0～9.5，在50℃～60℃条件下，加入1‑3％胰蛋白酶，使鹿筋蛋白酶解反应8h～10h，在酶解过程中以30转/min不断搅拌后得到含有低聚肽混合液；（9）超滤低聚肽将酶解液经反渗透超滤机组进行分级超滤，先经过分子量75KDa的超滤器，再经过分子量3KDa的超滤器过滤；合适分子量片段的肽透过膜进入收集器，大片段的肽继续和酶作用再酶解，再超滤获得低聚肽过滤液；超滤后将其温度升温至80～95℃进行高温灭酶；（10）纳滤截留浓缩、脱盐、脱杂质将蛋白低聚肽滤液泵入反渗透纳滤机组的分子量为500Da的纳滤器中进行浓缩；再将浓缩液加同样的体积水洗脱3‑5次，获得浓缩至含水量3‑5%的最小体积的纳滤截留液；将收集含有原料中的其他物质及无机盐等纳滤过滤液，进行净化处理,收集的纳滤截留液为低聚肽浓缩液；（11）除菌将浓缩液采用分子量60‑80KDa中空纤维超滤器过滤后，再进入0.22μm微孔滤芯进行过滤，通过截留的方式进行除菌；（12）灌装用西林瓶灌装；（13）冷冻干燥（1）预冻固化将罐装浓缩液西林瓶，摆放在真空冷冻干燥机冻干仓内的隔板上，预冻固化温度‑30～‑45℃，并保持5～8h，使浓缩液中水分充分冻结，确保无液体存在；（2）升华干燥：冻干机启动真空系统，将仓内压力抽至30～50pa，采取缓慢升温,以每小时1℃的升温速率,缓慢升温到‑20～‑25℃,保温6～8h,再以每小时2℃的升温速率,缓慢升温到‑10℃～‑12℃,保温3～6h，进行升华干燥；（3）解析干燥：升华干燥后，再以每小时3℃的升温速率,缓慢升温到40～50℃,压力为10～20Pa；保温6～8h, 完成解析干燥冻干，加压塑料盖后取出；（14）压瓶盖塞、贴标签冷冻干燥后在无菌条件下机械压瓶盖塞，进入贴标机使其贴好标签；制成蛋白纯度高达99.5%、相对分子质量小于1000Da的低聚肽成份含量平均大于92%的鹿筋低聚肽成品粉。...

【技术特征摘要】
1.一种鹿筋蛋白低聚肽的工业化生产工艺，具特征在于步骤如下：（1）原料原料选用干鹿筋；（2）浸泡软化注水浸泡48h-72h；（3）绞碎绞碎成粒度为0.1-0.2cm的碎块；（4）脱脂将绞碎鹿筋用1.0-2.0%醋酸溶液的脱脂液浸泡脱脂1-2d,最后用30-50℃温水漂洗2次,,获得脱脂浸泡的鹿筋；（5）磨浆磨成颗粒在20～50μm磨浆液；（6）盐析将制得的磨浆液调节pH值4.0～4.5，加入NaCl粉末进行盐析，边加边搅拌，使胶原蛋白完全析出后，静置12～24h，获得胶原混合液；（7）压滤将混合液均匀铺设到板框滤布上，输送混合液开始压滤1～6h，弃去滤饼，得到透明的滤液；（8）酶解将压滤后的浆液调节pH值为9.0～9.5，在50℃～60℃条件下，加入1-3％胰蛋白酶，使鹿筋蛋白酶解反应8h～10h，在酶解过程中以30转/min不断搅拌后得到含有低聚肽混合液；（9）超滤低聚肽将酶解液经反渗透超滤机组进行分级超滤，先经过分子量75KDa的超滤器，再经过分子量3KDa的超滤器过滤；合适分子量片段的肽透过膜进入收集器，大片段的肽继续和酶作用再酶解，再超滤获得低聚肽过滤液；超滤后将其温度升温至80～95℃进行高温灭酶；（10）纳滤截留浓缩、脱盐、脱杂质将蛋白低聚肽滤液泵入反渗透纳滤机组的分子量为5...

【专利技术属性】
技术研发人员：康杰，任跃英，骆长林，康岩，华正杰，
申请(专利权)人：通化百泉保健食品有限公司，
类型：发明
国别省市：吉林,22