一种脱细胞异体真皮基质及在阴茎增粗中的应用制造技术

本发明专利技术涉及一种脱细胞异体真皮基质及在阴茎增粗中的应用。为了适应阴茎增粗手术，提供合适的内置生物套材料，本发明专利技术经过酶处理、表面活性剂超声处理、DNA降解处理等多步骤协同操作，制备了一种新的脱细胞异体真皮基质材料，并将其制作成内置生物套，用于早泄、阴茎短小的治疗。本发明专利技术脱细胞异体真皮基质或内置生物套用于阴茎增粗或延长或背神经隔离手术方式不切断背神经，从而避免了由于患者对切断背神经的担心而导致心理性勃起功能障碍的几率。

Acellular allogenic dermis and its application in penile thickening

The invention relates to an acellular allogenic dermis matrix and its application in penis thickening. In order to adapt to the surgery of penile thickening and provide a suitable built-in bionic material, the invention has prepared a new acellular dermal matrix material through enzyme treatment, surfactants ultrasonic treatment, DNA degradation and so on. It is made into a built-in raw material for treating premature ejaculation and short penis. Treatment. The present invention has a acellular allogenic dermis matrix or a built-in biogenic sleeve for penile thickening or lengthening or dorsal nerve isolation without cutting the dorsal nerve, thus avoiding the risk of mental erectile dysfunction due to the patient's fear of cutting the dorsal nerve.

【技术实现步骤摘要】
一种脱细胞异体真皮基质及在阴茎增粗中的应用
本专利技术属于生物医用材料的组织工程
，具体是一种脱细胞异体真皮基质及在阴茎增粗中的应用。
技术介绍
以往阴茎加粗的方法很多，但主要是针对小阴茎患者，直到20世纪90年代以后阴茎加粗术才被用于正常阴茎的美容整形手术。目前阴茎加粗术通常用于先天性或特发性阴茎发育不良而呈小阴茎者，或因妻子生育后阴道松弛、或对自身阴茎粗度不满意而导致性生活质量不高，强烈要求行阴茎加粗术以期改善性生活质量者。几十年前盛行的注射液态硅胶用于加粗阴茎，由于液态硅胶容易产生排斥反应，形成结节，形态异常，腹股沟淋巴结肿大等并发症已被禁用。20年代80世纪中期，开始应用自体脂肪注射加粗阴茎，但由于脂肪的准备、注射方法和注射量的不同，效果也各不相同，因此争论也比较大。由于可能出现脂肪的吸收，脂肪结节的形成，外形的不满意，远端脂肪的堆积等，可能需要多次的注射，所以部分学者不赞同这种方法。近年来有的学者采用真皮脂肪瓣条游离移植以及整片真皮脂肪瓣包裹的方法，行阴茎加粗术，认为这种方法优点是自体组织无排斥反应，脂肪细胞的破坏少，真皮可以快速存活，而且外观自然，无异物感，效果优于脂肪注射。缺点是供区有切口瘢痕，有钙化坏死的可能性。还有学者采用自体大隐静脉加粗阴茎，优点是无排斥反应，解剖恒定，操作简便，缺点是供区有切口瘢痕。近年来随着人工合成材料、生物材料和组织工程技术的应用，如人工血管、膨体聚四氟乙烯(PTFE)、硅橡胶假体及透明质酸酶凝胶等材料均用于阴茎加粗术。但是这些材料除硅橡胶假体外，普遍比较昂贵，有的方法操作比较复杂。这些技术虽然偶有报道，但是具体效果尚未查到统计学数字报道。脱细胞内置生物套，全称为脱细胞异体真皮基质医用组织内置生物套，取自人类异体的片状或膜状组织，是通过脱细胞技术，对生物真皮进行生物和化学处理，完全脱除各种可被宿主识别的、能够引起免疫排斥反应的细胞成分，如果移植用的皮肤是含有细胞的，那么移植后内皮细胞的免疫反应可能导致血管收缩、组织缺血和组织变性坏死，一旦经过脱细胞处理，将人体组织变成没有细胞的基质与支架，这种材料就会产生免疫惰性，因此不会发生免疫排斥反应，同时完整地保留了细胞外基质成分及其三维空间框架结构。基于以上缺陷，研究一种能够用于阴茎增粗的脱细胞异体真皮基质或内置生物套具有实际意义。
技术实现思路
为了适应阴茎增粗手术，提供合适的内置生物套材料，本专利技术经过酶处理、表面活性剂超声处理、DNA降解处理等多步骤协同操作，专利技术制备了一种新的脱细胞异体真皮基质材料，并将其制作成内置生物套，用于早泄、阴茎短小等的治疗。本专利技术的目的在于提供一种脱细胞异体真皮基质和/或内置生物套的制备方法及阴茎增粗手术方法，具有手术创伤小、手术时间短、安全无痛、出血少、术后恢复快、抗感染能力强、兼容性良好的特点。为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种脱细胞异体真皮基质的制备方法，包括如下步骤：步骤一，将异体皮原料投入酶溶液中，浸泡振荡处理，得半成品A；所述酶为磷脂酶，或者所述酶为磷脂酶和蛋白酶；步骤二，将半成品A取出，用生理盐水浸泡，振荡处理，得半成品B；步骤三，将半成品B投入表面活性剂溶液中，超声浸泡处理，得半成品C；步骤四，将半成品C用生理盐水浸泡，振荡处理，得半成品D；步骤五，将半成品D投入盛有DNA水解酶溶液的容器中，振荡处理，得半成品E；步骤六，将半成品E用生理盐水浸泡，振荡处理，得半成品F；步骤七，将半成品F用注射用水清洗浸泡，得成品G；即为脱细胞异体真皮基质；可以直接作为阴茎增粗手术材料使用或用作制备阴茎增粗手术材料一般地，可将上述方法制得的脱细胞异体真皮基质保存于生理盐水中；为延长其保存期，也可进行灭菌处理(例如辐照灭菌)。为便于上述脱细胞异体真皮基质的储存及运输，延长其有效期，进一步地，上述方法还包括以下步骤：步骤八，将成品G取出，包装，灭菌，得成品H；或者将成品G取出，置于含有冻干保护剂的溶液中进行冷冻干燥；包装，灭菌，得成品H。进一步地，步骤一中所述蛋白酶包括胰蛋白酶、菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶、dispase酶(中性蛋白酶，分散酶)等中的一种或多种。在某些实施方式中，前述步骤一中的酶为磷脂酶、或磷脂酶与胰蛋白酶、菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶、dispase酶中的一种或多种。进一步地，所述酶溶液pH值为7.0-8.0。优选地，磷脂酶浓度为0.1g/L-0.4g/L，和/或所述蛋白酶(或其中胰蛋白酶、菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶、dispase酶任一种)的浓度为0.1g/L-0.3g/L。更进一步地，所述磷脂酶为磷脂酶A1、磷脂酶A2、磷脂酶C、磷脂酶D的一种或多种，优选磷脂酶A1、磷脂酶A2、磷脂酶C、磷脂酶D的质量比为1:1:1:1。在某些实施方式中，前述步骤一振荡处理条件为振荡0.5-4小时，振荡转速为10-200rpm，温度为10-40℃。在某些实施方式中，前述步骤三所述表面活性剂溶液中含有0.1-0.3g/L的SDS(十二烷基硫酸钠)，或所述表面活性剂溶液中含有0.1-0.3g/L的TritonX-100(聚乙二醇辛基苯基醚)。进一步地，超声浸泡条件为：40-80KHz，100-400W，温度为1-20℃，超声3-8分钟，浸泡2-4小时，重复2-4次。在某些实施方式中，前述步骤五中所述DNA水解酶溶液的浓度为4-8g/L，pH7.0-8.0；优选浓度为4-6g/L。在某些实施方式中，前述步骤五中振荡处理条件为振荡2-8小时，振荡转速为10-200rpm，温度为10-40℃。在某些实施方式中，所述步骤二、步骤四、步骤六振荡处理条件为振荡1-2小时，振荡转速为80-150rpm，更换生理盐水，继续振荡处理，重复该操作4-6次，温度为1-5℃。在某些实施方式中，所述步骤七注射用水清洗浸泡条件为振荡2小时，振荡转速为80-150rpm，温度为1-5℃，更换注射用水，继续振荡处理，重复该操作4-6次。在某些实施方式中，步骤八所述冻干保护剂溶液包括磷酸盐缓冲液、透明质酸和糖，其中透明质酸的浓度为0.4-0.8mg/100mL，糖的浓度为10-20mg/100mL，所述糖为海藻糖、乳糖、蔗糖、甘油、甘露醇、山梨醇、甘露糖、葡萄糖中的一种或几种。所述磷酸盐缓冲溶液(PBS)可按本领域常规方法配制，优选为10mmol/LpH7.0磷酸盐缓冲液。所述冷冻干燥步骤具体为：将成品G于5℃进箱，保持1小时，降温到-40℃并保持1小时，升温到-18℃并保持1小时，再次降温至-35℃保持1小时，启动真空泵，将干燥箱真空度抽到5-10Pa；用2小时将隔板升温到-30℃，干燥箱真空度抽到1-5Pa，维持15h；用1小时将隔板升温到0℃，并维持10h后，测定压力升，直至压力升小于1pa；用1小时将隔板升温到10℃，并维持10h，测定压力升，直至压力升小于1pa；用0.5小时将隔板升温到25℃，并维持8h，测定压力升，直至压力升小于1pa；整个干燥过程中前箱真空度不应高于30Pa。在某些实施方式中，前述步骤八的包装为将成品G装入包装袋中，封口包装完毕；所述灭菌为钴-60照射，照射剂量为20-30kGy。在符合本领域常识的基础上，上述各优选条件，可以相互组合，即得本专利技术各较佳实例。本专利技术异体皮原料来源于自愿捐本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种脱细胞异体真皮基质的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一，将异体皮原料投入酶溶液中，浸泡振荡处理，得半成品A；所述酶为磷脂酶，或者所述酶为磷脂酶和蛋白酶；步骤二，将半成品A取出，用生理盐水浸泡，振荡处理，得半成品B；步骤三，将半成品B投入表面活性剂溶液中，超声浸泡处理，得半成品C；步骤四，将半成品C用生理盐水浸泡，振荡处理，得半成品D；步骤五，将半成品D投入盛有DNA水解酶溶液的容器中，振荡处理，得半成品E；步骤六，将半成品E用生理盐水浸泡，振荡处理，得半成品F；步骤七，将半成品F用注射用水清洗浸泡，得成品G；或者，进一步地，还包括以下步骤：步骤八，将成品G取出，包装，灭菌，得成品H；或者将成品G取出，置于含有冻干保护剂的溶液中进行冷冻干燥；包装，灭菌，得成品H。

【技术特征摘要】
1.一种脱细胞异体真皮基质的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一，将异体皮原料投入酶溶液中，浸泡振荡处理，得半成品A；所述酶为磷脂酶，或者所述酶为磷脂酶和蛋白酶；步骤二，将半成品A取出，用生理盐水浸泡，振荡处理，得半成品B；步骤三，将半成品B投入表面活性剂溶液中，超声浸泡处理，得半成品C；步骤四，将半成品C用生理盐水浸泡，振荡处理，得半成品D；步骤五，将半成品D投入盛有DNA水解酶溶液的容器中，振荡处理，得半成品E；步骤六，将半成品E用生理盐水浸泡，振荡处理，得半成品F；步骤七，将半成品F用注射用水清洗浸泡，得成品G；或者，进一步地，还包括以下步骤：步骤八，将成品G取出，包装，灭菌，得成品H；或者将成品G取出，置于含有冻干保护剂的溶液中进行冷冻干燥；包装，灭菌，得成品H。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤一中所述磷脂酶为磷脂酶A1、磷脂酶A2、磷脂酶C、磷脂酶D的一种或多种，更优选地，所述磷脂酶为磷脂酶A1、磷脂酶A2、磷脂酶C、磷脂酶D按照质量比为1:1:1:1的混合物；和/或，所述蛋白酶包括胰蛋白酶、菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶、dispase酶中的一种或多种。3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，步骤一中所述酶溶液pH值为7.0-8.0；和/或，优选地，磷脂酶浓度为0.1g/L-0.4g/L；和/或，优选地，所述蛋白酶的浓度为0.1g/L-0.3g/L。4.根据权利要求1-3任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤一振荡处理条件为振荡0.5-4小时，振荡转速为10-200rpm，温度为10-40℃。5.根据权利要求1-4任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤三所述表面活性剂溶液中含有0.1-0.3g/L的SDS，或所述表面活性剂溶液中含有0.1-0.3g/L的TritonX-100；优选地，超声浸泡条件为：40-80KHz，100-400W，温度为1-20℃，超声3-8分钟，浸泡2-4小时，重复2-4次。6.根据权利要求1-5任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤五中所述DNA水解酶溶液的浓度为4-8g/L，pH7.0-8.0；优选浓度为4-6g/L；和/或，所述步骤五中振荡处理条件为振荡2-8小时，振荡转速为10-200rpm，温度为10-40℃。7.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙继煌，王海，曾昂，白明，张海林，吴元翼，张晓威，王伟，李雪银，刘文进，李卫强，石清东，
申请(专利权)人：北京桀亚莱福生物技术有限责任公司，
类型：发明
国别省市：北京,11