免疫-肿瘤中胚层祖细胞(IOMP)细胞制造技术

本发明专利技术涉及免疫‑肿瘤中胚层祖细胞(ioMP)细胞及其在治疗中的应用。

Immuno tumor mesoderm progenitor cells (IOMP) cells

The invention relates to immune mesodermal progenitor cells (ioMP) cells and their application in therapy.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】免疫-肿瘤中胚层祖细胞(IOMP)细胞
本专利技术涉及免疫-肿瘤中胚层祖细胞(ioMP)细胞及其在治疗中的应用。
技术介绍
中胚层细胞来源于许多组织并且充当其它细胞类型的支持结构。例如骨髓由造血和间充质来源的细胞构成。两种主要的间充质细胞类型此前已经得到说明和表征，即，在骨髓中发现的(i)间充质干细胞(MSC)和它们的前体及(ii)间充质前体细胞(MPC)。间充质干细胞(MSC)是多能的成年干细胞。MSC分化形成骨骼组织中发现的不同特化细胞。例如，它们可以分化为软骨细胞、骨细胞(成骨细胞)和脂肪细胞(脂细胞)。MSC已经应用于多种治疗，例如治疗年龄相关的黄斑退化(Age-relatedMacularDegeneration，AMD)和心肌梗塞。一旦给受试者施用，MSC通常迁移(或者归巢)至受损组织，并且通过旁分泌信号传导和通过促进受损组织中邻近细胞的存活、修复和再生来发挥其治疗效果。一些证据表明，MSC可以具有某些免疫抑制和免疫增强特性。MSC因此可用于操纵免疫响应并由此治疗疾病。然而，目前的治疗通常涉及输注MSC亚型的混合物，其中大多数亚型不具有所需的免疫调节性质。这需要使用高细胞剂量，这可能导致脱靶副作用和体积相关的副作用。此外，MSC通常从骨髓获得，因此很难获得该方法所需的大量细胞。
技术实现思路
本专利技术涉及一种以前未被鉴定或分离的新的细胞类型，即免疫-肿瘤中胚层祖细胞(ioMP)细胞。这种ioMP细胞在其组成、功能和特性方面与MSC和MPC两者截然不同，MSC和MPC赋予增强的免疫调节能力。专利技术人出人意料地发现了一种具有特定的标志物表达模式的新的免疫-肿瘤中胚层祖细胞(ioMP)细胞。具体而言，ioMP细胞表达CD66e、CD121b、CD122、CD164、CD172a、CD203c、CD264、CD270、CD328、CD358、T细胞受体(TCR)γδ、FMC7和ITGB7。ioMP细胞比MSC表达显著更大量的这些标志物。ioMP细胞不表达可检测水平的HLA-ABC、MICA/B、Notch2、CD360、CLIP和CD11b。本专利技术的ioMP细胞可分离自单核细胞(MC)，如外周血MC。ioMP细胞能够在体外和体内增加或降低T细胞响应。ioMP细胞也可用于治疗疾病。例如，ioMP细胞可用于通过增加细胞毒性T细胞、辅助T细胞或γδT细胞响应和/或降低调节性T细胞响应来治疗疾病(如癌症)。作为另选，ioMP细胞可用于降低细胞毒性T细胞、辅助T细胞或γδT细胞响应和/或增加调节性T细胞响应来治疗疾病(如过敏性、自身免疫或免疫介导的疾病)。ioMP细胞能够归巢、粘附、迁移、增殖、分泌促炎细胞因子和抗炎细胞因子以及促凋亡分子和抗凋亡分子，和细胞与细胞间的接触依赖性溶解。此外，ioMP细胞可用于提高嵌合抗原受体(CAR)表达性T细胞的稳定性、存活力或功能。因此，本专利技术提供了免疫-肿瘤中胚层祖细胞(ioMP)细胞，其中，所述细胞表达可检测水平的CD66e、CD121b、CD122、CD164、CD172a、CD203c、CD264、CD270、CD328、CD358、T细胞受体(TCR)γδ、FMC7和ITGB7，并且其中不表达可检测水平的HLA-ABC、MICA/B、Notch2、CD360、CLIP和CD11b。本专利技术还提供：-两种或更多种本专利技术的ioMP细胞的群；-一种ioMP细胞的群，其中(i)所述群中至少60％的细胞表达可检测水平的CD66e，(ii)所述群中至少45％的细胞表达可检测水平的CD121b，(iii)所述群中至少35％的细胞表达可检测水平的CD122，(iv)所述群中至少50％的细胞表达可检测水平的CD164，(v)所述群中至少45％的细胞表达可检测水平的CD172a,(vi)所述群中至少35ofthe细胞表达可检测水平的CD203c，(vii)所述群中至少45％的细胞表达可检测水平的CD264，(viii)所述群中至少35％的细胞表达可检测水平的CD270，(ix)所述群中至少35％的细胞表达可检测水平的CD328，(x)所述群中至少50％的细胞表达可检测水平的CD358，(ix)所述群中至少45％的细胞表达可检测水平的TCRγδ；(x)所述群中至少95％的细胞表达可检测水平的FMC，并且(xi)所述群中至少95％的细胞表达可检测水平的ITGB7；并且其中(a)所述群中0.5％以下的细胞表达可检测水平的HLA-ABC,(b)所述群中0.5％以下的细胞表达可检测水平的MICA/B，(c)所述群中0.5％以下的细胞表达可检测水平的Notch2，(d)所述群中0.5％以下的细胞表达可检测水平的CD360，(e)所述群中0.5％以下的细胞表达可检测水平的CLIP，并且(f)所述群中0.1％以下的细胞表达可检测水平的CD11b；-一种药物组合物，所述药物组合物包含：(a)本专利技术的ioMP细胞或本专利技术的群，以及(b)药学上可接受的载体或者稀释剂、一种或多种脂质体和/或一种或多种微泡(microbubble)；-一种药物组合物，所述药物组合物包含：(a)本专利技术的ioMP细胞或本专利技术的群；(b)免疫细胞；(c)抗原；和(d)药学上可接受的载体或者稀释剂。-一种制备本专利技术的ioMP细胞群的方法，所述方法包括：(a)在诱导单核细胞(MC)分化为ioMP细胞的条件下培养单核细胞，和(b)收获和培养所述ioMP细胞，所述ioMP细胞具有如上文所限定的表达模式，从而制备本专利技术的群；-一种增加细胞毒性T细胞、辅助T细胞或γδT细胞的响应于抗原的活性的体外方法，所述方法包括：将所述T细胞与所述抗原和本专利技术的群在增加所述T细胞活性的条件下孵育；-利用以上方法产生的经引发的细胞毒性T细胞、辅助T细胞或γδT细胞；-一种增加调节性T细胞的响应于抗原的活性的体外方法，所述方法包括：将所述T细胞与所述抗原和本专利技术的群在增加所述T细胞活性的条件下孵育；-利用以上方法产生的经引发的调节性T细胞；-一种降低细胞毒性T细胞、辅助T细胞或γδT细胞的响应于抗原的活性的体外方法，所述方法包括：将所述T细胞与所述抗原和本专利技术的群在降低所述T细胞活性的条件下孵育；-利用以上方法产生的受抑制的细胞毒性T细胞、辅助T细胞或γδT细胞；-一种降低调节性T细胞的响应于抗原的活性的体外方法，所述方法包括：将所述T细胞与所述抗原和本专利技术的群在降低所述T细胞活性的条件下孵育；-利用以上方法产生的受抑制的调节性T细胞；-一种增加细胞毒性T细胞、辅助T细胞或γδT细胞的响应于抗原的活性的体内方法，所述方法包括：在增加所述T细胞活性的条件下，对受试者施用本专利技术的群或本专利技术的药物组合物；-利用以上方法产生的经引发的细胞毒性T细胞、辅助T细胞或γδT细胞；-一种增加调节性T细胞的响应于抗原的活性的体内方法，所述方法包括：在增加所述T细胞活性的条件下，对受试者施用本专利技术的群或药物组合物；-利用以上方法产生的经引发的调节性T细胞；-一种降低细胞毒性T细胞、辅助T细胞或γδT细胞的响应于抗原的活性的体内方法，所述方法包括：在降低所述T细胞活性的条件下，对受试者施用本专利技术的群或药物组合物；-利用以上方法产生的受抑制的细胞毒性T细胞、辅助T细胞或γδT细胞；本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种免疫‑肿瘤中胚层祖细胞(ioMP)细胞，其中，所述细胞表达可检测水平的CD66e、CD121b、CD122、CD164、CD172a、CD203c、CD264、CD270、CD328、CD358、T细胞受体(TCR)γδ、FMC7和ITGB7，并且其中所述细胞不表达可检测水平的HLA‑ABC、MIC A/B、Notch2、CD360、CLIP和CD11b。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.08.07 GB 1513996.71.一种免疫-肿瘤中胚层祖细胞(ioMP)细胞，其中，所述细胞表达可检测水平的CD66e、CD121b、CD122、CD164、CD172a、CD203c、CD264、CD270、CD328、CD358、T细胞受体(TCR)γδ、FMC7和ITGB7，并且其中所述细胞不表达可检测水平的HLA-ABC、MICA/B、Notch2、CD360、CLIP和CD11b。2.如权利要求1所述的ioMP细胞，其中，所述ioMP细胞还表达可检测水平的β2-微球蛋白、CD10、CD13、CD29、CD47、CD44、CD49b、CD49c、CD49d、CD49e、CD51/CD61、CD55、CD58、CD59、CD61、CD63、CD73、CD81、CD82、CD90、CD91、CD92、CD95、CD98、CD105、CD108、CD111、CD115、CD119、CD120a、CD130、CD140b、CD147、CD148、CD151、CD155、CD166、CD175s、CD257、CD276、CD288、CD295、CD340、CD344、CD351、CD230、钙粘蛋白-11(CDH11)和淋巴毒素β受体(LTBR)中的一种或多种。3.如权利要求1或2所述的ioMP细胞，其中，所述ioMP细胞还表达可检测水平的CD26、CD44、CD46、CD49a、CD54、CD110、CD137L、CD146、CD156b、CD178、CD186、CD193、CD196、CD201、CD202b、CD221、CD227、CD230、CD231、CD235a、CD245、CD252、CD256、CD267、CD272、CD283、CD286、CD290、CD300e、CD309、CD312、CD337、CD338、CD354、平足蛋白和SSEA-4中的一种或多种。4.如前述权利要求中任一项所述的ioMP细胞，其中，所述ioMP细胞表达可检测水平的权利要求2或3中限定的所有标志物。5.如前述权利要求中任一项所述的ioMP细胞，其中，所述ioMP细胞显示出：CD66e的抗体平均荧光强度(MFI)为至少350，CD121b的MFI为至少700，CD122的MFI为至少300，CD164的MFI为至少400，CD172a的MFI为至少300，CD203c的MFI为至少300，CD264的MFI为至少350，CD270的MFI为至少300，CD328的MFI为至少300，CD358的MFI为至少350，TCRγδ的MFI为至少350，FMC7的MFI为至少3500，并且ITGB7的MFI为至少1500。6.如前述权利要求中任一项所述的ioMP细胞，其中，与间充质干细胞(MSC)相比，所述ioMP细胞表达增加量的CD66e、CD121b、CD122、CD164、CD172a、CD264、CD270、CD328、CD358、TCRγδ和ITGB7中的一种或多种。7.如前述权利要求中任一项所述的ioMP细胞，其中，与MSC相比，所述ioMP细胞表达增加量的β2-微球蛋白、CD10、CD13、CD29、CD47、CD44、CD49b、CD49c、CD49d、CD49e、CD51/CD61、CD55、CD58、CD59、CD61、CD63、CD73、CD81、CD82、CD90、CD91、CD92、CD95、CD98、CD105、CD108、CD111、CD115、CD119、CD120a、CD130、CD140b、CD147、CD148、CD151、CD155、CD166、CD175s、CD257、CD276、CD288、CD295、CD340、CD344、CD351、CD230、钙粘蛋白-11(CDH11)和淋巴毒素β受体(LTBR)中的一种或多种。8.如前述权利要求中任一项所述的ioMP细胞，其中，与MSC相比，所述ioMP细胞表达增加量的β2-微球蛋白、CD10、CD13、CD26、CD29、CD44、CD46、CD47、CD49a、CD49b、CD49c、CD49d、CD49e、CD51/CD61、CD54、CD55、CD58、CD59、CD61、CD63、CD73、CD81、CD82、CD90、CD91、CD92、CD95、CD98、CD105、CD108、CD110、CD111、CD115、CD119、CD120a、CD130、CD137L、CD140b、CD146、CD156b、CD147、CD148、CD151、CD155、CD166、CD175s、CD178、CD186、CD193、CD196、CD201、CD202b、CD221、CD227、CD230、CD231、CD235a、CD245、CD252、CD256、CD257、CD267、CD272、CD276、CD283、CD286、CD288、CD290、CD295、CD300e、CD309、CD312、CD337、CD338、CD340、CD344、CD351、CD354、CDH11、LTBR、平足蛋白和SSEA-4中的一种或多种。9.如权利要求5至8中任一项所述的ioMP细胞，其中，使用高通量荧光激活细胞分选术(HT-FACS)测量所述MFI或者量。10.如前述权利要求中任一项所述的ioMP细胞，其中，与MSC相比，所述ioMP细胞分泌可检测水平的干扰素-γ(IFN-γ)或增加量的IFN-γ。11.如前述权利要求中任一项所述的ioMP细胞，其中，所述ioMP细胞表达可检测水平的表1中的所有标志物。12.如前述权利要求中任一项所述的ioMP细胞，其中，所述ioMP细胞为自体细胞或同种异体细胞。13.两种或更多种如前述权利要求中任一项所述的ioMP细胞的群。14.一种ioMP细胞的群，其中(i)所述群中至少60％的细胞表达可检测水平的CD66e，(ii)所述群中至少45％的细胞表达可检测水平的CD121b，(iii)所述群中至少35％的细胞表达可检测水平的CD122，(iv)所述群中至少50％的细胞表达可检测水平的CD164，(v)所述群中至少45％的细胞表达可检测水平的CD172a，(vi)所述群中至少35的细胞表达可检测水平的CD203c，(vii)所述群中至少45％的细胞表达可检测水平的CD264，(viii)所述群中至少35％的细胞表达可检测水平的CD270，(ix)所述群中至少35％的细胞表达可检测水平的CD328，(x)所述群中至少50％的细胞表达可检测水平的CD358并且(xi)所述群中至少45％的细胞表达可检测水平的TCRγδ；(xi)所述群中至少95％的细胞表达可检测水平的FMC，并且(xii)所述群中至少95％的细胞表达可检测水平的ITGB7；并且其中(a)所述群中0.5％以下的细胞表达可检测水平的HLA-ABC，(b)所述群中0.5％以下的细胞表达可检测水平的MICA/B，(c)所述群中0.5％以下的细胞表达可检测水平的Notch2，(d)所述群中0.5％以下的细胞表达可检测水平的CD360，(e)所述群中0.5％以下的细胞表达可检测水平的CLIP，并且(f)所述群中0.1％以下的细胞表达可检测水平的CD11b。15.一种ioMP细胞的群，其中(i)所述群中至少69％的细胞表达可检测水平的CD66e，(ii)所述群中至少54％的细胞表达可检测水平的CD121b，(iii)所述群中至少43％的细胞表达可检测水平的CD122，(iv)所述群中至少60％的细胞表达可检测水平的CD164，(v)所述群中至少56％的细胞表达可检测水平的CD172a，(vi)所述群中至少47％的细胞表达可检测水平的CD203c，(vii)所述群中至少55％的细胞表达可检测水平的CD264，(viii)所述群中至少47％的细胞表达可检测水平的CD270，(xi)所述群中至少43％的细胞表达可检测水平的CD328，(x)所述群中至少62％的细胞表达可检测水平的CD358，(xi)所述群中至少56％的细胞表达可检测水平的TCRγδ，(xi)所述群中至少99％的细胞表达可检测水平的FMC，并且(xii)所述群中至少99％的细胞表达可检测水平的ITGB7；并且其中(a)所述群中0.1％以下的细胞表达可检测水平的HLA-ABC，(b)所述群中0.1％以下的细胞表达可检测水平的MICA/B，(c)所述群中0.2％以下的细胞表达可检测水平的Notch2，(d)所述群中0.1％以下的细胞表达可检测水平的CD360，(e)所述群中0.1％以下的细胞表达可检测水平的CLIP，并且(f)所述群中0.05％以下的细胞表达可检测水平的CD11b。16.如权利要求14或15所述的群，其中，所述群中至少85％的细胞还表达可检测水平的β2-微球蛋白、CD10、CD13、CD29、CD47、CD44、CD49b、CD49c、CD49d、CD49e、CD51/CD61、CD55、CD58、CD59、CD61、CD63、CD73、CD81、CD82、CD90、CD91、CD92、CD95、CD98、CD105、CD108、CD111、CD115、CD119、CD120a、CD130、CD140b、CD147、CD148、CD151、CD155、CD166、CD175s、CD257、CD276、CD288、CD295、CD340、CD344、CD351、CD230、钙粘蛋白-11(CDH11)和淋巴毒素β受体(LTBR)中的一种或多种。17.如权利要求16所述的群，其中，所述群中至少85％的细胞表达可检测水平的权利要求18中所列出的所有标志物。18.如权利要求14至17中任一项所述的群，其中，所述群中至少75％的细胞还表达可检测水平的CD49a、CD137L、CD146、CD178、CD202b、CD221、CD231、CD252、CD256、CD267、CD337和SSEA-4中的一种或多种。19.如权利要求18所述的群，其中，所述群中至少75％的细胞表达可检测水平的权利要求18中所列出的所有标志物。20.如权利要求14至19中任一项所述的群，其中，所述群中至少60％的细胞还表达可检测水平的CD46f、CD54、CD110、CD186、CD193、CD201、CD245、CD272、CD283、CD286、CD290、CD300e、CD309、CD338、CD354和平足蛋白中的一种或多种。21.如权利要求20所述的群，其中，所述群中至少60％的细胞表达可检测水平的权利要求20中所列出的全部标志物。22.如权利要求14至21中任一项所述的群，其中，所述群中至少50％的细胞还表达可检测水平的CD26、CD196、CD227、CD235a和CD312中的一种或多种。23.如权利要求22所述的群，其中，所述群中至少50％的细胞表达可检测水平的权利要求22中所列出的全部标志物。24.如权利要求14至23中任一项所述的群，其中，...

【专利技术属性】
技术研发人员：A·雷金纳德，S·苏丹，M·J·埃文斯，
申请(专利权)人：细胞治疗有限公司，
类型：发明
国别省市：英国,GB